Рт биология: ГДЗ Биология/окр. мир Пасечник. С шишкой Дрофа 5 класс Рабочая тетрадь

Биология | Республиканский олимпиадный центр

Биология | Республиканский олимпиадный центр

Горячая линия : +7 (950) 315 90 09


2021-2022

Скачать (74 Кб) Программа проведения Регионального этапа всероссийской олимпиады школьников по биологии
Скачать (5. 4 Мб) Итоговый протокол заключительного этапа республиканской и регионального этапа всероссийской олимпиад по биологии 2021-2022 учебного года

2020-2021

Скачать (4.8 Мб) Об итогах регионального этапа всероссийской олимпиады школьников в Республике Татарстан по биологии для обучающихся 9-11 классов в 2021 году
Скачать (70 Кб) Программа проведения заключительного этапа республиканской и регионального этапа всероссийской олимпиад школьников По биологии
Скачать (4. 2 Мб) Об итогах заключительного этапа республиканской олимпиады школьников по биологии для обучающихся 8 классов в 2021 году
Скачать (28 Кб) Итоговый протокол обучающихся 9-11 классов регионального этапа всероссийской олимпиады школьников по предмету биология в 2020-2021 учебном году
Скачать (13 Кб) Итоговый протокол обучающихся 8 класса заключительного этапа республиканской олимпиады школьников по предмету биология в 2020-2021 учебном году

2019-2020

Скачать (13 Кб) Итоговый протокол заключительного этапа республиканской олимпиады по предмету биология в 2019-2020 учебном году
Скачать (16 Кб) Итоговый протокол регионального этапа всероссийской олимпиады по биологии
Скачать (1.
2 Мб)
Приказ МОиН РТ от 17.01.2020 №под-66/20″Об утверждении состава жюри регионального этапа всероссийской и заключительного этапа республиканской олимпиад школьников по биологии в 2019/2020 учебном году»
Скачать (3.4 Мб) Приказ МОиН РТ от 27.02.2020 №под-294/20″Об итогах регионального этапа всероссийской олимпиады школьников по биологии в 2020 году»

Скачать (4.8 Мб) Приказ МОиН РТ от 27.02.2020 №под-293/20″Об итогах заключительного этапа республиканской олимпиады школьников по биологии в 2020 году»
Скачать (120 Кб) Требования к организации и проведению регионального этапа всероссийской олимпиады школьников по биологии в 2019/20 учебном году
Скачать (72 Кб) ПРОГРАММА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАКЛЮЧИТЕЛЬНОГО ЭТАПА РЕСПУБЛИКАНСКОЙ И РЕГИОНАЛЬНОГО ЭТАПА ВСЕРОССИЙСКОЙ ОЛИМПИАДЫ ШКОЛЬНИКОВ ПО БИОЛОГИИ

2018-2019

Скачать (44 Кб) Итоговый протокол заключительного этапа республиканской и регионального этапа всероссийской олимпиады школьников по предмету биология в 2018-2019 учебном году
Скачать (15 Кб) Итоговый протокол заключительного этапа республиканской олимпиады по предмету биология в 2018-2019 учебном году, 8класс
Скачать (15 Кб) Итоговый протокол регионального этапа ВсОШ по предмету биология в 2018-2019 учебном году (9 класс)
Скачать (16 Кб) Итоговый протокол регионального этапа ВсОШ по предмету биология в 2018-2019 учебном году (10 класс)
Скачать (30 Кб) Итоговый протокол регионального этапа ВсОШ по предмету биология в 2018-2019 учебном году (11 класс)

ГАОУ «Республиканский олимпиадный центр»

г. Казань, ул. Социалистическая, д. 5
Тел.: 8(843) 590-28-82
Email: [email protected], [email protected], [email protected] (бухгалтерия)

РТ Биология 5-6 кл. Сухова в 2-х ч. Ч.2 /Вент/

РТ Биология 5-6 кл. Сухова в 2-х ч. Ч.2 /Вент/

Каталог/ Учебная литература/ Для средней и старшей школы/ Биология/РТ Биология 5-6 кл. Сухова в 2-х ч. Ч.2 /Вент/

Аннотация к книге «РТ Биология 5-6 кл. Сухова в 2-х ч. Ч.2 /Вент/»

Тетрадь ориентирована на работу с учебником Т.С. Сухановой, В.И. Строганова «Биология. 5-6 классы» (М.: Вентана-Граф), входящим в систему «Алгоритм успеха». Содержит комплект заданий, рисунков, схем, в основу которых положен системно-структурный подход, являющийся необходимым условием развивающего обучения

Отзывов пока что нет

Возможно, вам понравится

  • 494

    419. 9 Р

  • 739

    628.15 Р

  • 640

    544 Р

  • 181

    153.85 Р

  • 496

    421. 6 Р

  • 618

    525.3 Р

  • 161

    136.85 Р

  • 99

    84.15 Р

  • 709

    602. 65 Р

  • 202

    171.7 Р

  • 290

    246.5 Р

  • 333

    283.05 Р

  • 213

    181. 05 Р

  • 455

    386.75 Р

  • 359

    305.15 Р

  • 193

    164.05 Р

  • 187

    158. 95 Р

  • 166

    141.1 Р

  • 230

    195.5 Р

  • 362

    307.7 Р

© 2000–2021, ООО «Гемера-Плюс»
Моя книга | Сеть книжных магазинов в Саратове

Поиск материала «РТ 2019/2020, Этап 3, Вариант 1, Тематическое консультирование по биологии» для чтения, скачивания и покупки

Ниже показаны результаты поиска поисковой системы Яндекс. В результатах могут быть показаны как эта книга, так и похожие на нее по названию или автору.

Search results:

  1. Тематическое консультирование по биологии Вариант 1

    РТ–2018/2019 гг. Этап I. Вариант 1 Тематическое консультирование по биологии 5. Раздел программы вступительных испытаний.

    А16.Из четырех предложенных примеров изменчивости три можно объединить в одну группу по характеру наследуемости. Выберите пример, невходящий в эту группу: 1) увеличение количества эритроцитов в крови у группы людей при переселении с морского побережья в горы; 2) появление укороченных крыльев у одного из потомков при скрещивании чистых линий дрозофил с крыльями нормальной длины; 3)…

    studopedia.ru

  2. РТ по биологии! | ВКонтакте

    У кого имеется РТ-2 1 вариант по ХИМИИ за 2019 год анализ ответов. 1. Нравится Показать список оценивших.

    Может есть 2 этап 2 вариант по рт биологии , пожалуйста сбросьте.

    vk.com

  3. Купить эту книгу

  4. Канцтовары

    Канцтовары: бумага, ручки, карандаши, тетради. Ранцы, рюкзаки, сумки. И многое другое.

    my-shop.ru

  5. Тематическое консультирование по биологии Вариант 2

    РТ–2018/2019 гг. Этап II.Вариант2 Тематическое консультированиепо биологии 4. Раздел программы вступительных испытаний. Элемент содержания.

    В4.В кариотипе крысы 42 хромосомы. В результате мутации по одной паре хромосом образовался моносомик. Сколько хромосом в соматических клетках моносомика? Ответ запишите цифрами в виде целого числа.

    studopedia.ru

  6. РТ по белорусскому языку, химии и биологии (3 этап) | ВКонтакте

    Интересует биология 3й этап. Кто может поделиться, пожалуйста? Нравится Показать список оценивших.

    Добрый день. Может есть у кого-нибудь РТ по химии 3-й этап вариант 2 и онлайн-рт по химии 1 и 2 этапа?

    vk.com

  7. ЦТ по биологии

    Тематическое консультирование по биологии. Этап 3. Вариант 1.

    1 вариант — 11 с. Сборник содержит тестовые задания 1 (типичного) варианта по биологии, предложенные абитуриентам при проведении централизованного тестирования в 2007 году. Ко всем заданиям даны ответы.

    www.studmed.ru

  8. Скачать РТ 2017-2018 по биологии тематическое… — Eruditor

    Тематическое консультирование по биологии. Этап 3. Вариант 2. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие. Рекомендуется учащимся старших классов, абитуриентам для самостоятельной подготовки к централизованному тестированию. ..

    РТ-2017/2018 гг. Этап 2. Тематическое консультирование по биологии. Вариант 1. pdf. Раздел: Централизованное тестирование (Республика Беларусь) → ЦТ по биологии.

    eruditor.io

  9. РТ 2016. Тематическое консультирование по биологии. Этап

    Минск: Республиканский институт контроля знаний, 2016. — 38 с. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  10. РТ 2016. Тематическое консультирование по биологии. Этап

    Минск: Республиканский институт контроля знаний, 2016. — ? с. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  11. РТ тесты 2015\2016 1,2,3 этапы. Консультации по всем предметам

    Здесь вы можете скачать консультации для подготовки Русский язык

    Консультации по всем предметам. Подготовка к ЦТ 2018 — ЦТ-тесты.бел 30 авг 2016 в 19:32.

    vk.com

  12. РТ по биологии! | ВКонтакте

    РТ по биологии!: обсуждения в сообществе Биология ◆ подготовка к ЦТ 2022 ◆ Адукар.

    Екатерина Аверина 8 апр 2019 в 10:36.

    Ася, походу за того что на 3 этап больше народу пришло. Я био писал и была вся аудитория для био, а у подруги вся аудитория на бел. была.

    vk.com

  13. РТ 2017. Тематическое консультирование по биологии. Этап. ..

    Минск: Республиканский институт контроля знаний. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  14. Биология. РТ 3 этап. Вариант 2 — презентация онлайн

    (Вариант 2). ВПР по биологии. 5 класс.

    Разбираем полный вариант ЕГЭ по биологии. Анатомия. Новый этап. Онто-филогенетические закономерности развития эволюции систем органов. (Вариант 3). Тест.

    ppt-online.org

  15. Тематическое консультирование. РТ 2016/2017

    Тематическое консультирование по итогам первого этапа РТ.

    Физика, Тесты, 11 класс, Подготовка к ЦТ, Тематическое консультирование.

    Тематическое консультирование. РТ 2016/2017. Категория: Физика. 02.02.2019 22:50.

    multiurok. ru

  16. РТ 2016. Тематическое консультирование по химии. Этап

    Минск: Республиканский институт контроля знаний, 2016. — 30 с. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  17. РТ по биологии! | ВКонтакте

    РТ по биологии!: обсуждения в сообществе Биология ◆ подготовка к ЦТ 2022 ◆ Адукар.

    У кого есть рт био 2014/2015 год 2 этап 1 вариант ответы?

    Ирина, 3 этап рт биология 2019 решение.

    vk.com

  18. ПОЛНЫЙ РАЗБОР РТ III ЭТАП 2019-2020 / БИОЛОГИЯ… — YouTube

    Сегодня начинаем рассматривать РТ-2019/2020 III этап. Биология.

    www. youtube.com

  19. Консультации этапов РТ 2021

    Рассказываем, что такое консультации РТ и зачем они вообще нужны. Подробный разбор варианта теста репетиционного тестирования.

    После того как этап тестирования пройдет (то есть весь второй или третий этап), ты сможешь зайти на сайт РИКЗа, в раздел результаты РТ, заполнить свои данные и указать личный код участника. И увидеть не только правильные ответы, но и все правила, которые нужно было вспомнить, чтобы выполнить задание.

    100ct.by

  20. Консультации 3 этап (2017) | ВКонтакте

    » Консультации 3 этап (2017). Лиза Химичева 28 апр 2017 в 18:43.

    Может у кого-нибудь есть биология 2 вариант?

    Может у кого-нибудь есть консультация по математике 1 вариант?

    vk.com

  21. А уже появились консультации I этапа РТ! Не писал этот этап?

    Не писал этот этап? Или хочешь разобрать другой вариант? Предлагаем взаимопомощь!

    Можно пожалуйста белорусский, биологию,химию,математику Нужны оба варианта

    Тематическое консультирование РТ русский язык 1 этап 2020-21. Спасибо, если отправите.

    vk.com

  22. Задания РТ 2/2017

    Вариант 2 Тематическое консультирование по биологии 1. © Министерство образования Республики Беларусь. Учреждение образования «Республиканский институт контроля знаний».

    РТ–2016/2017 гг. Этап III. Вариант 2 Тематическое консультирование по биологии 2. Раздел программы.

    multiurok.ru

  23. ЕГЭ 2023 по биологии: тренировочные и реальные варианты

    ЕГЭ по биологии: тренировочные тесты, пробные и реальные варианты ЕГЭ по биологии.

    Сборники тренировочных тестов по биологии для ЕГЭ в 2023 году и для ЕГЭ прошлых лет.

    ctege.info

  24. РТ 2017. Тематическое консультирование по биологии. Этап

    Минск: Республиканский институт контроля знаний. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  25. «РЕШУ ЦТ»: биология. ЦТ — 2022: задания, ответы, решения.

    Варианты. Централизованное тестирование по биологии.

    Централизованное тестирование по биологии 2020 года с решениями. Вариант 2 . ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ РАБОТЫ ЦТ 2019.

    bio.reshuct.by

  26. Долгожданный 3 этап РТ!!! Забирайте задания к себе на стену…

    P.S. Пока есть не все предметы и варианты, но мы все опубликуем, как только они появятся, следи за обновлениями! 🙂 Последние записи: Абитуриенты на майские праздники делятся на.. Продолжается запись на 4,5-часовой суперинтенсив.. Основные формулы по химии, необходимые для.. Белорусский язык 3 этап 1 вариант.pdf.

    vk.com

  27. 3 этап РТ 2021/2022 – Telegram | Вариант 2

    Вариант 1.

    3 этап РТ 2021/2022. Forwarded from Подготовка к ЦТ (Математика).

    t.me

  28. РТ 2017. Тематическое консультирование по химии. Этап

    Минск: Республиканский институт контроля знаний. Репетиционное тестирование. Приводятся содержание заданий, ответы, комментарии и решения заданий, ссылки на учебник, учебное пособие.

    www.studmed.ru

  29. Репетиционное тестирование 3 этап 2018/2019 | Форум

    Здесь вы можете обменяться ответами и решениями по РТ-3 2018-2019 (варианты 1 и 2), задать вопросы. Вариант 1.

    www.alsak.ru

  30. Телеграм канал 3 этап РТ 2021/2022 — rt_3_etap_2021_2022

    Аналитика телеграм канала ‘3 этап РТ 2021/2022’ — 2979 подписчиков.

    Подпишись на наш паблик ВКонтакте, чтобы самым первым получать свежие новости, узнавать об акциях и скидках. Ну и просто быть умничкой :3.

    telemetr.me

  31. Тематическое консультирование по русскому языку (вариант 2)

    РТ–2021/2022 гг. Этап III. Вариант 2. Тематическое консультирование по русскому языку 3.

    Союз тоже пишется слитно в отличие от созвучного ему сочетания то же (местоимение с частицей). РТ–2021/2022 гг. Этап III. Вариант 2. Тематическое консультирование по русскому языку 5.

    ppt-online.org

  32. Рабочие программы по биологииБиология — Учительский портал

    Рабочие программы, тематическое и поурочное планирование уроков биологии по ФГОС.

    Рабочая программа учебного предмета «Биология» составлена в соответствии с требованиями ФГОС второго поколения на основе УМК И.Н. Пономаревой. Структура курса – концентрическая. С целью более качественного достижения требований образовательного стандарта 1 час на изучение учебного предмета «биология» введён из компонента образовательного учреждения.

    www.uchportal.ru

  33. Рабочие программы по биологии на 2022-2023 учебный год…

    С календарно-тематическим и поурочным планированием. Для 5 класса рабочая программа по новым ФГОС 3 поколения. УМК для 5, 9 класса: Пономарёва И.Н УМК для 6, 7, 8 класса: Пасечник В. В.

    Коллеги, продолжаем выкладывать для вас актуальные рабочие программы, в этом посте рабочие программы для 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 класса по учебному предмету БИОЛОГИЯ по ФГОС.

    vk.com

  34. Результаты 3-го РТ 2018 и 2019 годов: как изменились баллы по…

    Сравниваем результаты 3-го этапа РТ за 2018 и 2019 годы, чтобы понять, какова будет конкуренция среди абитуриентов с баллами 60+.

    Ежегодно наша редакция проводит опрос среди читателей Адукар, на сколько баллов они написали каждый этап РТ. Мы решили сравнить статистику за 2018 и 2019 год, чтобы узнать, как новая методика подсчёта баллов ЦТ повлияла на результаты репетиционного тестирования и выросло ли количество абитуриентов с баллами 50+.

    adukar.com


На данной странице Вы можете найти лучшие результаты поиска для чтения, скачивания и покупки на интернет сайтах материалов, документов, бумажных и электронных книг и файлов похожих на материал «РТ 2019/2020, Этап 3, Вариант 1, Тематическое консультирование по биологии»

Для формирования результатов поиска документов использован сервис Яндекс.XML.

Нашлось 59 млн ответов. Показаны первые 32 результата(ов).

Дата генерации страницы:

Основы обратной транскрипции | Thermo Fisher Scientific

Обратная транскрипция включает большое семейство ферментов, называемых обратными транскриптазами, которые играют уникальную роль в потоке генетической информации. С момента их открытия исследователи использовали эти ферменты в качестве основных инструментов в широком диапазоне приложений молекулярной биологии.

На этой странице:

  • Открытие
  • Распространенность
  • Приложения
  • Ссылки
  • Ресурсы

Открытие

Первоначальная центральная догма молекулярной биологии утверждала, что ДНК транскрибируется в РНК, которая, в свою очередь, транслируется в белок. Однако эта концепция была поставлена ​​под сомнение в 1970-х годах, когда две группы ученых, одна под руководством Говарда Темина из Висконсинского университета, а другая под руководством Дэвида Балтимора из Массачусетского технологического института, независимо идентифицировали новые ферменты, связанные с репликацией РНК-вирусов, называемые ретровирусами [1,2]. ]. Эти ферменты превращают геном вирусной РНК в молекулу комплементарной ДНК (кДНК), которая затем способна интегрироваться в геном хозяина. Это РНК-зависимые ДНК-полимеразы, которые называются обратной транскриптазой, потому что, в отличие от потока ДНК-к-РНК согласно центральной догме, они транскрибируют матрицы РНК в молекулы кДНК (9). 0008 Рисунок 1 ). В 1975 году Темин и Балтимор получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине (совместно с Ренато Дульбекко за родственную работу по вирусам, вызывающим опухоли) за их новаторскую работу по идентификации обратных транскриптаз [3].

Рисунок 1. Современное понимание потока генетической информации включает обратную транскрипцию.

 

Распространенность

Обратные транскриптазы были обнаружены во многих организмах, включая вирусы, бактерии, животных и растения. В этих организмах общая роль обратной транскриптазы заключается в преобразовании последовательностей РНК в последовательности кДНК, которые способны встраиваться в различные области генома. Таким образом, обратная транскрипция способствует ( Рисунок 2 ):

  • Размножение ретровирусов — например, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вируса мышиного лейкоза Молони (M-MuLV) и вируса птичьего миелобластоза (AMV) [1,2]
  • Генетическое разнообразие эукариот с помощью мобильных мобильных элементов, называемых ретротранспозонами [4]
  • Репликация концов хромосом, называемых теломерами [5,6]
  • Синтез внехромосомных химерных элементов ДНК/РНК, называемых многокопийной одноцепочечной ДНК (мсДНК) у бактерий [7,8]

Рисунок 2. Роль обратной транскриптазы в биологических системах. (A) Вирусная РНК подвергается обратной транскрипции для интеграции в геном хозяина. ( B ) При ретротранспозиции промежуточная РНК подвергается обратной транскрипции для вставки копий ДНК в другие области генома. ( C ) Теломеразная обратная транскриптаза (TERT) использует РНК в качестве матрицы для удлинения и поддержания концов эукариотических хромосом. ( D ) Обратная транскрипция является промежуточным этапом в образовании многокопийной одноцепочечной ДНК (мсДНК) у бактерий.

 

Приложения

Хотя обратные транскриптазы играют функциональную роль в биологических системах, они также служат важными инструментами для изучения популяций РНК. Одним из первых протоколов молекулярной биологии с использованием обратных транскриптаз было производство кДНК для создания библиотек, содержащих ДНК-копии мРНК из клеток и тканей [9,10]. Эти библиотеки кДНК помогают понять активно экспрессируемые гены и их функции в определенный момент времени.

Несмотря на то, что создание библиотек кДНК было важным шагом вперед в характеристике экспрессируемых генов, исследования РНК с низким содержанием оставались нерешенными. Впоследствии они были решены путем разработки полимеразной цепной реакции (ПЦР) — метода амплификации небольших количеств генетического материала. Обратная транскрипция в сочетании с ПЦР или ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) позволяет обнаруживать РНК даже при очень низких уровнях экспрессии генов и прокладывает путь к обнаружению циркулирующих РНК, РНК-вирусов и слияний раковых генов в молекулярной диагностике [11]. -13].

Кроме того, кДНК служат матрицами в таких приложениях, как микрочипы и секвенирование РНК, для характеристики неизвестных РНК с высокой пропускной способностью [14-17]. (Подробнее о приложениях обратной транскрипции.)

 

использованная литература

  1. Temin HM, Mizutani S (1970) РНК-зависимая ДНК-полимераза в вирионах вируса саркомы Рауса. Природа 226(5252):1211–1213.
  2. Baltimore D (1970) РНК-зависимая ДНК-полимераза в вирионах РНК-опухолевых вирусов. Природа 226(5252):1209–1211.
  3. Nobel Media AB (2014) Нобелевская премия по физиологии и медицине 1975 . Nobelprize.org
  4. Домброски Б.А., Фэн К., Матиас С.Л. и др. (1994) Анализ in vivo обратной транскриптазы ретротранспозона L1 человека в Sacchromyces cerevisiae. Mol Cell Biol 14(7):4485–4492.
  5. Weinrich SL, Pruzan R, Ma L et al. (1997) Реконструкция теломеразы человека с помощью компонента матричной РНК hTR и субъединицы каталитического белка hTRT. Nat Genet 17(4): 498–502.
  6. Poole JC, Andrews LG, Tollefsbol TO (2001)Активность, функция и генная регуляция каталитической субъединицы теломеразы (hTERT). Ген 269(1-2):1–12.
  7. Inouye S, Herzer PJ, Inouye M (1990) Два независимых ретрона с очень разнообразными обратными транскриптазами у Myxococcus xanthus. Proc Natl Acad Sci U S A 87(3):942–945.
  8. Lampson BC, Inouye M, Inouye S (2005) Ретроны, мДНК и бактериальный геном. Cytogenet Genome Res 110(1-4):491–499.
  9. Okayama, H, Berg P (1982) Высокоэффективное клонирование полноразмерной кДНК. Mol Cell Biol 2(2):161–170.
  10. Gubler, U, Hoffman BJ (1983) Простой и очень эффективный метод создания библиотек кДНК. Ген 25(2-3):263–269.
  11. Кавасаки Э.С., Кларк С.С., Койн М.Ю. и др. (1988) Диагностика хронических миелоидных и острых лимфоцитарных лейкозов путем выявления специфических для лейкемии последовательностей мРНК, амплифицированных in vitro . Proc Natl Acad Sci U S A 85(15):5698–5702.
  12. Mayer G, Müller J, Lünse CE (2011)Диагностика РНК: стратегии RT-PCR в реальном времени и многообещающие новые РНК-мишени. Wiley Interdiscip Rev RNA 2(1):32–41.
  13. Bridge JA (2016) Молекулярное тестирование цитологических образцов с обратной транскрипцией и полимеразной цепной реакцией: преаналитические и аналитические факторы. Рак цитопатола. doi: 10.1002/cncy.21762. [Epub перед печатью]
  14. Schena M, Shalon D, Davis RW et al. (1995) Количественный мониторинг паттернов экспрессии генов с помощью комплементарного ДНК-микрочипа. Наука 270(5235):467–470.
  15. Wang Z, Gerstein M, Snyder M (2009) RNA-Seq: революционный инструмент для транскриптомики. Nat Rev Genet 10(1):57–63.
  16. Mortazavi A, Williams BA, McCue K (2008) Картирование и количественная оценка транскриптомов млекопитающих с помощью RNA-Seq. Nat Methods 5(7):621–628.
  17. Пархомчук Д., Бородина Т., Амстиславский В. (2009) Транскриптомный анализ с помощью специфичного для нитей секвенирования комплементарной ДНК. Рез. нуклеиновых кислот 37(18):e123.

Ресурсы

Учить больше

  • ПЦР
  • ПЦР в реальном времени
  • Молекулярное клонирование
  • Микрочипы и секвенирование РНК

Сопутствующие товары

  • Ферменты и реагенты для обратной транскрипции
  • Ферменты и реагенты для ПЦР
  • Анализы и реагенты для ПЦР в реальном времени
  • Ферменты рестрикции и клонирование
  • Наборы для подготовки библиотек для секвенирования РНК

Только для исследовательских целей. Не для использования в диагностических процедурах.

В чем разница между ПЦР, ОТ-ПЦР, кПЦР и ОТ-кПЦР?


Полимеразная цепная реакция (ПЦР) представляет собой относительно простой и широко используемый метод молекулярной биологии для амплификации и обнаружения последовательностей ДНК и РНК. По сравнению с традиционными методами клонирования и амплификации ДНК, которые часто могут занимать дни, ПЦР требует всего несколько часов. ПЦР обладает высокой чувствительностью и требует минимального количества шаблонов для обнаружения и амплификации определенных последовательностей. Основные методы ПЦР усовершенствовались от простого обнаружения ДНК и РНК. Ниже мы представили обзор различных методов ПЦР и реагентов, которые мы предоставляем в Enzo Life Sciences для ваших исследовательских нужд. Мы стремимся помочь ученым быстро получить доступ к реагентам ПЦР для использования в их следующем исследовательском проекте!

ПКР

Для стандартной ПЦР вам потребуется только ДНК-полимераза, магний, нуклеотиды, праймеры, ДНК-матрица для амплификации и термоциклер. Механизм ПЦР так же прост, как и его цель: 1) двухцепочечная ДНК (дцДНК) денатурируется нагреванием, 2) праймеры выравниваются с одиночными цепями ДНК и 3) праймеры удлиняются с помощью ДНК-полимеразы, в результате чего получаются две копии исходной ДНК. Нить ДНК. Процесс денатурации, отжига и удлинения в течение ряда температур и периодов времени известен как один цикл амплификации. Каждый шаг цикла должен быть оптимизирован для используемого шаблона и набора праймеров. Этот цикл повторяют примерно 20-40 раз, после чего можно анализировать амплифицированный продукт. ПЦР широко используется для амплификации ДНК для последующего использования в экспериментах. ПЦР также применяется в генетическом тестировании или для обнаружения патогенной ДНК.

Поскольку ПЦР является высокочувствительным методом и для проведения одной реакции требуются очень небольшие объемы, рекомендуется приготовить мастер-микс для нескольких реакций. Мастер-микс необходимо хорошо перемешать, а затем разделить на количество реакций, гарантируя, что каждая реакция будет содержать одинаковое количество фермента, dNTP и праймеров. Многие поставщики, такие как Enzo Life Sciences, также предлагают смеси для ПЦР, которые уже содержат все, кроме праймеров и матрицы ДНК.

Области, богатые гуанином/цитозином (богатые GC), представляют собой проблему для стандартных методов ПЦР. Последовательности, богатые GC, более стабильны, чем последовательности с более низким содержанием GC. Кроме того, последовательности, богатые GC, имеют тенденцию образовывать вторичные структуры, такие как петли-шпильки. В результате двойные цепи, богатые GC, трудно полностью разделить во время фазы денатурации. Следовательно, ДНК-полимераза не может беспрепятственно синтезировать новую цепь. Более высокая температура денатурации может улучшить это, а регулирование в сторону более высокой температуры отжига и более короткого времени отжига может предотвратить неспецифическое связывание GC-богатых праймеров. Дополнительные реагенты могут улучшить амплификацию GC-богатых последовательностей. ДМСО, глицерин и бетаин помогают разрушить вторичные структуры, вызванные взаимодействием GC, и тем самым облегчить разделение двойных цепей.

Горячий старт PCR

Неспецифическая амплификация представляет собой проблему, которая может возникнуть во время ПЦР. Большинство ДНК-полимераз, используемых для ПЦР, лучше всего работают при 68–72°C. Следовательно, выбранная температура расширения должна быть в этом диапазоне. Однако фермент может быть менее активен и при более низких температурах. При температурах намного ниже температуры отжига праймеры склонны к неспецифическому связыванию, что может привести к неспецифической амплификации, даже если реакция проводится на льду. Этого можно избежать, используя ингибиторы полимеразы, которые диссоциируют от ДНК-полимеразы только при достижении определенной температуры. Ингибитор может представлять собой антитело, которое связывает полимеразу и денатурирует при начальной температуре денатурации.

ОТ-ПЦР

ПЦР с обратной транскрипцией или ОТ-ПЦР позволяет использовать РНК в качестве матрицы. Дополнительный шаг позволяет обнаруживать и амплифицировать РНК. РНК обратно транскрибируется в комплементарную ДНК (кДНК) с использованием обратной транскриптазы. Качество и чистота матрицы РНК необходимы для успеха ОТ-ПЦР. Первым этапом ОТ-ПЦР является синтез гибрида ДНК/РНК. Обратная транскриптаза также имеет функцию РНКазы Н, которая расщепляет РНК-часть гибрида. Затем одноцепочечная молекула ДНК достраивается ДНК-зависимой ДНК-полимеразной активностью обратной транскриптазы в кДНК. Эффективность реакции первой цепи может влиять на процесс амплификации. С этого момента для амплификации кДНК используется стандартная процедура ПЦР. Возможность превратить РНК в кДНК с помощью ОТ-ПЦР имеет много преимуществ. РНК одноцепочечная и очень нестабильная, что затрудняет работу с ней. Чаще всего он служит первым шагом в количественной ПЦР, которая количественно определяет транскрипты РНК в биологическом образце.

qPCR и RT-qPCR

Количественная ПЦР (кПЦР) используется для обнаружения, характеристики и количественного определения нуклеиновых кислот для многочисленных приложений. Обычно в RT-qPCR транскрипты РНК количественно определяют путем их обратной транскрипции в кДНК, как описано выше, а затем последовательно проводят qPCR. Как и в стандартной ПЦР, ДНК амплифицируется в 3 повторяющихся этапа: денатурация, отжиг и удлинение. Однако в количественной ПЦР флуоресцентная маркировка позволяет собирать данные по мере прохождения ПЦР. Этот метод имеет много преимуществ благодаря целому ряду доступных методов и химикатов.

В количественной ПЦР на основе красителя (обычно зеленого цвета) флуоресцентная маркировка позволяет количественно определить амплифицированные молекулы ДНК с использованием красителя, связывающего двухцепочечную ДНК. Во время каждого цикла измеряют флуоресценцию. Сигнал флуоресценции увеличивается пропорционально количеству реплицированной ДНК, и, следовательно, количество ДНК определяется в «реальном времени». Недостатки количественной ПЦР на основе красителя заключаются в том, что одновременно можно исследовать только одну мишень и что краситель будет связываться с любой двухцепочечной ДНК, присутствующей в образце.

При количественной ПЦР на основе зондов в каждом образце можно одновременно обнаружить множество мишеней, но для этого требуется оптимизация и разработка зонда, специфичного для мишени, используемого в дополнение к праймерам. Существует несколько типов конструкций зондов, но наиболее распространенным типом является зонд для гидролиза, который включает использование флуорофора и гасителя. Резонансный перенос энергии флуоресценции (FRET) предотвращает испускание флуорофора через гаситель, пока зонд не поврежден. Однако во время реакции ПЦР зонд гидролизуется во время удлинения праймера и амплификации специфической последовательности, с которой он связан. Расщепление зонда отделяет флуорофор от гасителя и приводит к зависимому от амплификации увеличению флуоресценции. Таким образом, сигнал флуоресценции от реакции количественной ПЦР на основе зонда пропорционален количеству последовательности-мишени зонда, присутствующей в образце. Поскольку кПЦР на основе зондов более специфична, чем кПЦР на основе красителей, эта технология часто используется в диагностических анализах кПЦР.

Дополнительную информацию можно найти на нашем веб-сайте: AMPIGENE® PCR & qPCR Solutions. Миссия Enzo — предоставлять недорогие, легко адаптируемые и эффективные решения для рынка диагностики. Наша платформа AMPIPROBE® использует новый дизайн ПЦР для количественного определения нуклеиновых кислот для клинически значимых мишеней. Наши анализы легко адаптируются для лабораторного использования и являются экономически эффективными без ущерба для качества и производительности. Анализы AMPIPROBE®, совместимые с открытыми платформами ПЦР, могут быть проверены на существующем оборудовании, что устраняет необходимость в капитальных затратах.

В приведенной ниже сводной таблице представлены продукты ПЦР, доступные для ПЦР, ОТ-ПЦР и количественной ПЦР. Нажмите на интересующий продукт, чтобы получить дополнительную информацию, или свяжитесь с нашей службой технической поддержки для получения дополнительной помощи.
Ознакомьтесь с нашими 10 советами для успешной количественной ПЦР в реальном времени!

СКРИПТ RT-qPCR ProbesMaster UNG, Probes / TaqMan® Detection

Вы здесь: Молекулярная биология | Обратная транскрипция / ОТ-ПЦР | Зонды / Обнаружение TaqMan® | СЦЕНАРИЙ RT-qPCR ProbesMaster UNG

Только для in vitro !

Доставка: поставляется в гелевых упаковках

Условия хранения: хранить при -20 °C
избегать циклов замораживания/оттаивания

Срок годности: 12 месяцев

Форма выпуска: жидкость

Концентрация: 2х конц.

Описание:
СКРИПТ RT-qPCR ProbesMaster UNG предназначен для количественного анализа РНК-матриц в режиме реального времени с использованием флуоресцентных зондов с двойной меткой. Готовая к использованию смесь основана на генно-инженерной обратной транскриптазе с повышенной термостабильностью, обеспечивающей повышенную специфичность, высокий выход кДНК и повышенную эффективность для высокоструктурированных и длинных фрагментов кДНК.
2x конц. смесь содержит все реагенты, необходимые для RT-qPCR (кроме матрицы, праймеров и флуоресцентного зонда с двойной меткой), чтобы обеспечить быструю и простую подготовку с минимальным количеством шагов пипетирования. Ферменты высшего качества и оптимизированный реакционный буфер, содержащий сверхчистые dNTP, обеспечивают превосходные результаты ПЦР в реальном времени.

Смесь содержит UNG (урацил-N-гликозилаза) и dUTP вместо dTTP, чтобы исключить переходящее загрязнение ДНК из предыдущих реакций ПЦР. Обработка UNG в начале термоциклирования удаляет остатки урацила из ДНК, содержащей dU, и предотвращает ее использование в качестве матрицы.

RT-qPCR используется для амплификации двухцепочечной ДНК из одноцепочечных РНК-матриц, что позволяет проводить быструю количественную оценку РНК-мишеней в реальном времени. На этапе обратной транскрипции обратная транскриптаза синтезирует молекулы одноцепочечной ДНК (кДНК), комплементарные матрице РНК. В первом цикле стадии ПЦР ДНК-полимераза горячего старта синтезирует молекулы ДНК, комплементарные кДНК, таким образом создавая двухцепочечную матрицу ДНК. Активность полимеразы горячего старта блокируется при температуре окружающей среды и автоматически включается в начале начальной денатурации. Термическая активация предотвращает удлинение неспецифически отожженных праймеров и образований праймер-димер при низких температурах во время настройки ПЦР.
Одноэтапная RT-qPCR предлагает огромное удобство при анализе мишеней из нескольких образцов РНК и сводит к минимуму риск контаминации.
Смесь также можно использовать в сочетании с эталонным красителем ROX (#PCR-351) в приборах для ПЦР, совместимых с оценкой сигнала ROX.

SCRIP RT-qPCR Probes Master одобрен для молекулярной диагностики SARS-CoV-2, вызывающего новое коронавирусное инфекционное заболевание COVID-19.

Содержимое:
SCRIPT RT-qPCR ProbesMaster UNG
Готовая к использованию смесь обратной транскриптазы SCRIPT, полимеразы горячего старта AB+, UNG, ингибитора РНКазы, dNTP, вкл. dUTP, реакционный буфер и стабилизаторы.

Вода для ПЦР


Флуоресцентные зонды с двойной маркировкой:
Технология ПЦР в реальном времени, основанная на ДНК-зондах с двойной меткой, обеспечивает высокочувствительную и специфичную систему ПЦР с возможностью мультиплексирования. Для этого требуются два стандартных праймера для ПЦР и ДНК-зонд, который гибридизуется с внутренней частью ампликона. Последовательность ДНК-зонда с двойной меткой должна избегать вторичной структуры и образования праймер-димера.

Чувствительность:
Мишени, как правило, могут быть обнаружены из

Подготовка анализа RT-qPCR:
Добавьте следующие компоненты в микропробирку без нуклеаз и осторожно перемешайте компоненты пипеткой вверх и вниз. Как правило, воду, РНК и праймеры следует смешивать перед добавлением мастер-микса.

компонент конц. окончательная конц. 20 мкл
Анализ
50 мкл
Анализ
ПЦР -градитная вода До
. template 1)
x μl x μl
forward Primer 2) 10 μM 400 nM 0.8 μl 2 μl
reverse Primer 2) 10 μM 400 nM 0.8 μl 2 μl
dual-labeled Probe 3) 10 μM 200 nM 0.4 μl 1 μl
SCRIPT RT-qPCR Probes-Master UNG 4) 2x 1x 10 μl 25 μl

1) up to 100 ng polyA RNA or total RNA
2) Оптимальная концентрация праймеров и зондов может варьироваться от 100 до 500 нМ.
3) Для получения оптимальных результатов может потребоваться титрование концентрации ДНК-зонда от 50 до 800 нМ.
4) Микс уже содержит ингибитор РНКазы, что может быть необходимо при работе с небольшим количеством исходной РНК.

Продолжить обратную транскрипцию и термоциклирование в соответствии с рекомендациями.

Обратная транскрипция и термоциклирование:
Поместите флаконы в ПЦР-циклер и запустите следующую программу.

903
реверс
Транскрипция 5)
50-55 ° C 20-30 мин 1x

Денатурация 6)
95°C 15 sec 35-45x
annealing and
elongation
60-65 °C 7) 40-60 sec 6) 35-45x

5) Время обратной транскрипции 20 минут рекомендуется для оптимальной длины ампликона от 100 до 200 п. н. Более длинные ампликоны до 500 п.н. могут потребовать более длительной инкубации в течение 30 минут. Добавьте 3 мин на каждые дополнительные 100 п.н. Оптимальная температура зависит от особенностей строения РНК. Увеличьте температуру до 55°C для сложных шаблонов с высокой вторичной структурой. Обратите внимание, что оптимальное время реакции и температура должны быть скорректированы для каждой конкретной РНК.
6) Начальное время денатурации 5 минут рекомендуется для инактивации обратной транскриптазы
7) Температура отжига зависит от температуры плавления используемых праймеров и ДНК-зонда.
8) Время элонгации зависит от длины ампликона. Рекомендуется время 1 мин для фрагмента 1000 п.н.

Для оптимальной специфичности и амплификации может потребоваться индивидуальная оптимизация рекомендуемых параметров. Обратите внимание, что оптимальное время реакции и температура должны быть скорректированы для каждой конкретной пары РНК/праймер.