Тест по окружающему миру 4 класс вахрушев 4 четверть: Тесты по окружающему миру для 4 класса онлайн

Содержание

Тест по окружающему миру 4 класс 3 четверть

Окружающий мир, 4 класс.

Тест за III четверть.

  1. В каком году возникло книгопечатание.

*1235г *1445г *882г

  1. Какой мореплаватель открыл Америку.

*Кирилл *Фернанд Магелан *Христофор Колумб

  1. Какие народы возникли от восточных славян.

*Русские, украинцы, белорусы

*Немцы *Англичане

  1. Назови год княжения Рюрика.

*882 г *862г *980г

  1. В каком году князь Олег объединил Новгород и Киев.

*980г *882г *862г

  1. Какой князь вошел в историю как креститель Руси.

*Владимир *Ярослав Мудрый *Иван Грозный

  1. Назови год Крещения Руси.

*1015г *988г *862г

  1. Назови годы правления князя Владимира.

*980-1015г *1019-1054г *862г

  1. Назови годы правления Ярослава Мудрого.

*980-1015г *1019-1054г *988г

10.Что такое вече.

* Собрание всех горожан *Город *Народ

11. Назови год нашествия хана Батыя на Русь.

*1237г *1325г *1240г

12. Как называлось государство монголов.

*Монголы *Варяги * Золотая Орда

13. В каком году была битва «Ледовое побоище».

*1240г *1300г *5 апреля 1242г

14. В каком веке возник Троицкий монастырь.

* XXI *XIV *XIX

15. Назови годы правления Ивана Калиты.

*1325-1340г *1533-1584 *1685-1720г

16. В каком году состоялась битва на Куликовом поле.

* 1350г *1380г *1450г

17. Назови годы правления Ивана III.

*1462-1505г *1485-1612г *1533-1584г

18.Назови годы правления Ивана IV Грозного.

*1533-1584г *1462-1505г 1485-1612г

19. Кто стал первым в истории России царем.

* Иван I * Иван III *Иван IV

20. Какая книга является первой печатной русской книгой.

* Повесть временных лет * Апостол *Букварь

21. Кто напечатал первый русский букварь.

*Иван Федоров *Иван Иванович * Тургенев

22. В каком году была издана первая русская печатная книга.

*1500г *1237г *1563г

23. В каком году было создано народное ополчение для борьбы с врагом.

*1019г *1240г *1612г

24. В каком году был избран Михаил Федорович Романов на царство.

*1612г *1613г *1614г

25. Назови годы правления Петра I Великого.

*1533-1584г *1682-1725* *1614г

26. В каком году Петр I был провозглашен императором и Россия стала империей.

*2000г *2010г *1721г

ГДЗ контрольно-измерительные материалы (ким) по окружающему миру 4 класс Яценко

Четвертый класс для любого школьника является важным и сложным периодом. Ведь на этом году обучения приходится не только познавать массу новой информации по разным предметам, но и серьезно готовиться к первым в жизни переводным проверочным работам – итоговым аттестациям. Чтобы освоить весь предлагаемый школьной программой материал по окружающему миру и качественно подготовиться к годовому срезу знаний, можно часами сидеть над учебниками, совершенно не уделяя внимание другим предметам. Либо можно обратиться за помощью к репетиторам. Однако такая возможность есть не у каждой семьи. Лучший вариант – гдз по окружающему миру контрольно-измерительные материалы за 4 класс Яценко – сборник, который содержит верные решения к тестам по 54 темам за весь курс этого учебного года. С ним любой ребенок сможет без труда самостоятельно проверить правильность своих ответов, а в случае выявления ошибок своевременно обратиться к книгам и восполнить пробелы в знаниях.

Для кого решебник играет важную роль в процессе освоения предмета?

В первую очередь, это ученики четвертых классов. Для одних это хорошая возможность просто списать готовый ответ и не заморачиваться с размышлениями над заданием. Для других же справочник с решениями к контрольно-измерительным материалам по окружающему миру за 4 класс автора Яценко – серьезный стимул, чтобы заниматься самостоятельно и не бояться ошибиться. Ведь в случае сомнений или выявленных с помощью таблиц из сборника с ответами ошибок можно подучить нужную тему и все легко исправить. Также такое пособие пригодится:

  • родителям четвероклассников, которые привыкли лично контролировать выполнение домашних заданий своими детьми, а особенно сейчас, когда речь идет о подготовке к предстоящей итоговой аттестации;
  • детям, находящимся на домашней или дистанционной форме обучения, в качестве дополнительной литературы для самостоятельной тренировки перед предстоящими срезами знания;
  • ученикам старших классов, изучающих уже новые предметы (география, биология, история), базовая основа которых все-таки опирается на тематический материал начальной школы по окружающему миру;
  • учителям, репетиторам, руководителям факультативных природоведческих кружков как подспорье в планировании занятий и т.
    д.

Какими достоинствами обладает сборник с ответами?

Знание того или иного предмета базируется не только на своевременном изучении нового материала, но и на регулярном повторении, а также на практическом применении полученных навыков. Используя в течение года решебник с ответами к контрольно-измерительным материалам по окружающему миру за 4 класс (автор Яценко), можно закреплять изучаемые темы постепенно. Это обеспечит перед итоговой аттестацией больше времени на подготовку по другим предметам. Тем более, что такое пособие:

  • максимально удобно, ведь все ответы собраны в таблицы по темам;
  • доступно в любое время суток;
  • экономит время, которое может быть потрачено и на отдых или занятие любимым хобби;
  • освобождает родителей от забот, связанных с дополнительным пояснением материала, который непонятен их ребенку, и поиском репетиторов.

Даже самые сложные темы и тяжелые контрольные работы с еуроки ГДЗ будут даваться школьникам легко и не заставят нервничать их родителей.

▶▷▶ административная контрольная работа по окружающему 4 класс

▶▷▶ административная контрольная работа по окружающему 4 класс
ИнтерфейсРусский/Английский
Тип лицензияFree
Кол-во просмотров257
Кол-во загрузок132 раз
Обновление:05-11-2018

административная контрольная работа по окружающему 4 класс — Yahoo Search Results Yahoo Web Search Sign in Mail Go to Mail» data-nosubject=»[No Subject]» data-timestamp=’short’ Help Account Info Yahoo Home Settings Home News Mail Finance Tumblr Weather Sports Messenger Settings Yahoo Search query Web Images Video News Local Answers Shopping Recipes Sports Finance Dictionary More Anytime Past day Past week Past month Anytime Get beautiful photos on every new browser window Download Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Школа infourokru/itogovaya-kontrolnaya-rabota-po Cached › Тесты › Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Школа России Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Школа России Административная контрольная работа по окружающему миру за 1 docplayerru/62410571-Administrativnaya Cached 1 Административная контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие 4 класс Административная контрольная работа (тест) по окружающему миру infourokru/administrativnaya-kontrolnaya-rabota Cached Административная контрольная работа (тест) по окружающему миру в 4 (-ом) классе по программе Административная контрольная работа по математике 4 класс kopilkaurokovru/matematika/uroki/ Cached Просмотр содержимого документа « Административная контрольная работа по математике 4 класс Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс multiurokru/files/itoghovaia-kontrol-naia Cached Итоговая контрольная работа по окружающему миру для 4 класса представлена в двух вариантах Рекомендуется использовать учителям, работающим по УМК «Школа 2100» Контрольная работа по окружающему миру 3 класс за 1 полугодие wwwprodlenkaorg/metodicheskie-razrabotki/ Cached Главная \ Методические разработки \ Начальная школа \ Окружающий мир, экология \ Контрольная работа по окружающему миру 3 класс за 1 полугодие Итоговая контрольная работа по окружающему миру для 4 класса videourokinet/razrabotki/itogovaya-kontrolnaya Cached Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Цель: проверить знания учащихся Административная проверочная работа по математике 4 класс за uchitelyacom/matematika/91784-administrativnaya Cached Скачать Административная проверочная работа по математике 4 класс за 1 полугодие Контрольная работа за 1 полугодиеОкружающий мир4 класс pedportalnet/nachalnye-klassy/okruzhayuschiy Cached Контрольная работа по окружающему миру за 1-ое полугодие, 3 класс УМК «Перспектива» Шафранская Ирина Исааковна Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс kopilkaurokovru/nachalniyeKlassi/prochee/ Cached Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Просмотр содержимого документа «Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс » Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster, smarter, easier way to browse the web and all of Yahoo 1 2 3 4 5 Next 90,200 results Settings Help Suggestions Privacy (Updated) Terms (Updated) Advertise About ads About this page Powered by Bing™

  • которые человек использует как топливо Нефть
  • методиста для 4 класса по ФГОС Учебно-дидактические материалы по Окружающему миру для 4 класса по УМК АА Плешаков Читать ещё Контрольные / проверочные работы для учителя начальных классов
  • торф

проверочные и контрольные Представляем вам сборник отличных ответов по окружающему миру для тетрадей с проверочными и контрольными работами к учебнику «Человек и природа» и «Человек и человечество» Читать ещё Ответы 4 класса окружающего мира к тетрадям 1 и 2 частей Самостоятельные

известняк Скрыть 8 Входная контрольная работа по окружающему миру doc4webru › Окружающий мир › …-kontrolnaya-rabota-po… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Административное право Алгебра Английский язык Конспект урока по Окружающему миру «Кто такие мы» 1 класс Конспект открытого урока по предмету « Окружающий мир» в 1 классе «Где зимуют птицы?» Читать ещё Административное право Алгебра Английский язык Арбитражный процесс Архитектура Астрология Астрономия Конспект урока по Окружающему миру «Кто такие мы» 1 класс Конспект открытого урока по предмету « Окружающий мир» в 1 классе «Где зимуют птицы?» 27505275032750227501274992749827496 X Код для использования на сайте: Ширина блока px Скопируйте этот код и вставьте себе на сайт X Чтобы скачать документ

  • работающим по УМК «Школа 2100» Контрольная работа по окружающему миру 3 класс за 1 полугодие wwwprodlenkaorg/metodicheskie-razrabotki/ Cached Главная \ Методические разработки \ Начальная школа \ Окружающий мир
  • работающим по УМК «Школа 2100» Контрольная работа по окружающему миру 3 класс за 1 полугодие wwwprodlenkaorg/metodicheskie-razrabotki/ Cached Главная \ Методические разработки \ Начальная школа \ Окружающий мир
  • 3 класс УМК «Перспектива» Шафранская Ирина Исааковна Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс kopilkaurokovru/nachalniyeKlassi/prochee/ Cached Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Просмотр содержимого документа «Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс » Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster

административная контрольная работа по окружающему 4 класс — Все результаты Административная контрольная работа по окружающему миру за 1 Административная контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие 4 класс «Начальная школа 21 века» Фамилия, имя I вариант 1 Система Тест по окружающему миру (4 класс) на тему: КОНТРОЛЬНАЯ 10 мар 2018 г — КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА ПО ОКРУЖАЮЩЕМУ МИРУ ДЛЯ 4-ОГО КЛАССА ЗА l по окружающему миру для 4 класса (за 1 полугодие) Примерные административные контрольные работы по математике, по Тест по окружающему миру (4 класс) по теме: Итоговая 3 июл 2013 г — Итоговая контрольная работа за курс начальной школы по окружающему миру ученика (цы) 4 класса Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс › Окружающий мир 12 окт 2017 г — Административная итоговая стандартизированная предметная контрольная работа по окружающему миру в 4 классе 1Цель и Административные контрольные работы по окружающему миру › Окружающий мир 4 окт 2017 г — Cкачать: Административные контрольные работы по окружающему миру для 4 класса по полугодиям программа «Начальная школа 21 Административная входная контрольная работа по окружающему › Окружающий мир 15 янв 2018 г — Cкачать: Административная входная контрольная работа по окружающему миру 4 класс Итоговый тест по окружающему миру 4 класс плешаков | imhydcock Итоговый тест по окружающему миру 4 класс плешаков Административная контрольная работа по математике 2 класс 2 четверть программа школа 4 класс Окружающий мир Итоговая контрольная работа № 2 за Похожие 4 класс Окружающий мир Итоговая контрольная работа № 2 за курс начальной школы Обществознание Административная контрольная работа Итоговая контрольная работа по окружающему миру для 4 класса Похожие Работа составлена в соответствии с требованиями ФГОС и предназначена для итоговой проверки знаний учащихся Видео 5:11 Окружающий мир 4 класс Тесты с ответами 1 — Полугодие!!! Тестовичок YouTube — 11 янв 2017 г 5:01 Окружающий мир 4 класс Тесты с ответами 2 — Полугодие!!! Тестовичок YouTube — 11 янв 2017 г 18:21 Окружающий мир 4 класс Тесты с ответами 1 — Часть!!! Тестовичок YouTube — 21 сент 2017 г Все результаты [PDF] Административная контрольная работа по окружающему миру за www30astr-s35edusiteru/DswMedia/4klokrujayushaiymir21vekpdf Административная контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие 4 класс «Начальная школа 21 века» Фамилия Административная контрольная работа по окружающему миру 4 апр 2018 г — данная административная контрольная работа разработана для проверки умений и навыков учеников 4 класса по окружающему миру Административная контрольная работа по окружающему миру в 3 17 июн 2017 г — Возможная административная контрольная работа по окружающему миру 3 класс ФГОС Школа России Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс 21 авг 2017 г — Итоговая контрольная работа по окружающему миру для 4 класса представлена в двух вариантах Рекомендуется использовать Картинки по запросу административная контрольная работа по окружающему 4 класс «cb»:3,»cl»:3,»cr»:3,»id»:»Kdqjf7QEySb2hM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:57,»oh»:625,»ou»:» «,»ow»:415,»pt»:»ipinimgcom/originals/5c/13/a6/5c13a66094cdbda92e»,»rh»:»pinterestcom»,»rid»:»weRhLZKnCOo7hM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Pinterest»,»th»:102,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcSr_KPUohyBF23x88Zr5GHUiRdBxXLdi8RIN-_8a71mAh0SK_hfwVdR_w»,»tw»:68 «cb»:3,»cl»:3,»cr»:6,»ct»:21,»id»:»py9FR2KCAIGBaM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:109,»oh»:480,»ou»:» «,»ow»:640,»pt»:»cdn2arhivurokovru/multiurok/html/2018/02/26/s_5a»,»rh»:»multiurokru»,»rid»:»Ig9M_SpF9Fux7M»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Мультиурок»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcSpEz816F3WEE—r2nCOfZ9t5kQk6JFGgG85HEgwUap8ybCVjtYscbTPA»,»tw»:120 «ct»:3,»id»:»sfy25vysgs14eM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:119,»oh»:213,»ou»:» «,»ow»:697,»pt»:»arhivurokovru/videouroki/html/2014/04/26/98681006″,»rh»:»videourokinet»,»rid»:»wqsAiUWo6BlukM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Видеоуроки»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcS8kF8rUtP00Ntoggc1p-RghvKBziGf6VAAY9Oys1N4cS9ZKYDdtIb9KYoL»,»tw»:295 «id»:»CJ0VcoliyBldlM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:66,»oh»:266,»ou»:» «,»ow»:196,»pt»:»ds04infourokru/uploads/ex/10fa/000b6f21-f5517eaf»,»rh»:»infourokru»,»rid»:»z3wTEBnUs-t3UM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Инфоурок»,»th»:97,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcTTyLnMOvuThpT7Tllemt5ssz0nPjZCMfYpbYrf2SO1PuC5DgyaMBL84CM»,»tw»:72 «cb»:3,»cl»:3,»cr»:3,»ct»:12,»id»:»XMxnh_vk7_ouVM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:113,»oh»:480,»ou»:» «,»ow»:640,»pt»:»cdn2arhivurokovru/multiurok/html/2018/02/26/s_5a»,»rh»:»multiurokru»,»rid»:»Ig9M_SpF9Fux7M»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Мультиурок»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcS5v2ucFoiy9_Lof3Wk0ZWyv28Qe0lpkz-z-52TV1pWsGdj1kKNAwaTtA»,»tw»:120 «cr»:3,»ct»:3,»id»:»liy8XJqfYMXRKM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:116,»oh»:786,»ou»:» «,»ow»:1100,»pt»:»lh6googleusercontentcom/f1y95Z-0HrGq7pycPbqBx0bD»,»rh»:»nsportalru»,»rid»:»pRFGh64Y9NK4XM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Социальная сеть работников образования»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcQsredsq5P9VCCSc_Th2uPU_yfakkWQJhOHYk_SBx_iRpJX8OinKRJjVOk»,»tw»:126 Другие картинки по запросу «административная контрольная работа по окружающему 4 класс» Жалоба отправлена Пожаловаться на картинки Благодарим за замечания Пожаловаться на другую картинку Пожаловаться на содержание картинки Отмена Пожаловаться Все результаты Итоговая контрольная работа за курс начальной школы по Похожие Итоговая контрольная работа за курс начальной школы по окружающему миру за 2010 – 2011 учебный год ученика(цы) 4 класса «____» контрольная работа по окружающему миру по теме человек 4 класс lechurchillcom//kontrolnaia-rabota-po-okruzhaiushchemu-miru-po-teme-chelovek- для 4 класса по теме: » Организм multiurokru/files/tiesty-po- okruzhaiushchiemu Cached Административная контрольная работа по окружающему миру в [PDF] Контрольно-измерительные материалы школа114екатеринбургрф/file/download/6156 1 Контрольно-измерительные материалы окружающий мир 1- 4 класс Итоговая контрольная работа 1 класс 1 Зачеркни лишний находить на политико – административной карте России местоположение своего края; Административная контрольная работа по окружающему миру в 3 Похожие 29 дек 2014 г — Главная / Начальные классы / Административная контрольная работа по окружающему миру в 3 классе за II четверть по программе 4 Какие вещества входят в состав воздуха? а) водород, медь, цинк [PDF] Промежуточная аттестация Итоговая административная sch2161mskobrru/files/%20мир%204pdf Итоговая административная контрольная работа по окружающему миру 4 класс (образец) 1На каком из рисунков указан герб Москвы? Обведи номер Контрольная работа по окружающему миру 4 класс 2 триместр Похожие 18 апр 2016 г — Контрольная / проверочная работа для учителя начальных классов для 4 класса Учебно-дидактические материалы по Окружающему Окружающий мир | Контрольные, Тесты — ЗАВУЧинфо wwwzavuchru/methodlib/318/?pg=2 Похожие Итоговая проверочная работа по окружающему миру в 4 классе за 2016 – 2017 Контрольная работа проверяет знания по основным темам по Административный срез по окружающему миру в 3 классе (УМК «Школа России») окружающий мир 2 класс виноградова итоговая контрольная работа roskinoorg//okruzhaiushchii-mir-2-klass-vinogradova-itogovaia-kontrolnaia-rabota окружающий мир 2 класс виноградова итоговая контрольная работа Cached Итоговая контрольная работа по окружающему миру в 4 классе за iii 1 для Итоговая ( административная ) контрольная работа (тест) Комплексная контрольная работа в 4 классе по окружающему миру за 1 полугодие wwwomaorgtw//kontrolnaia-rabota-v-4-klasse-po-okruzhaiushchemu-miru-za-1-p Контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие 4 класс миру в 4 классе за 1 полугодие Административная контрольная работа по ГДЗ по окружающему миру 4 класс Вахрушев, Сизова Ответы 4 класса окружающего мира к тетрадям 1 и 2 частей Самостоятельные, проверочные и контрольные работы контрольная работа окружающий мир 3 класс 1 — Harnessbike harnessbikecom//kontrolnaia-rabota-okruzhaiushchii-mir-3-klass-1-chetvert-plesha контрольная работа окружающий мир 3 класс 1 четверть плешаков Cached 1 Контрольная работа по окружающему миру 4 класс 1 четверть 1 Что называют Административная контрольная работа по окружающему миру в 3 Контрольная работа за 1 полугодиеОкружающий мир4 класс Похожие документ · Контрольная работа по математике за 1 полугодие 4 класс разное · Контрольная работа по окружающему миру за 1-ое полугодие, 2 класс документ · Административная контрольная работа за 1 полугодие, 8 класс Входные административные контрольные работы techliceumru/p416aa1html Входные административные контрольные работы Файл Окружающий мир (Вариант 2) Файл 4 класс Русский язык Файл Математика Файл Итоговые контрольные работы по предмету «Окружающий мир» nsc1septemberru/articlephp?ID=200401303 Похожие Итоговые контрольные работы по предмету » Окружающий мир» Контрольные работы составлены в двух вариантах 4 -й класс 1-й вариант окружающий мир 3 класс контрольная работа за 1 — Galli Produce galliproducecom//okruzhaiushchii-mir-3-klass-kontrolnaia-rabota-za-1-polugodie-z окружающий мир 3 класс контрольная работа за 1 полугодие занков Контрольная работа по математике в 4 классе за 1 четверть по системе ЛВ Занкова контрольные-работырф/okr-mir/3-klass Cached Административная [PDF] окружающий мир 4 класс — МАОУ «Полесская СОШ» Настоящая рабочая программа по окружающему миру для 4 класса ( административный контроль): 1 Контрольная работа по итогам II четверти 3 [DOC] В» классе по окружающему миру — МОУ СОШ №37 кнацттс37рф//Analiz-monitoringovoy-raboty-okruzhayushchiy-mir-v-4-klassahdo В 4 -х классах контрольную работу по окружающему миру выполняли 94 работы по окружающему миру ( административная контрольная работа ) за Май | 2016 | Сайт учителя начальных классов Марины mapustobaevaru/ /2016/05 1 мая 2016 г — График контрольных работ по окружающему миру в 2018 -2019 учебном 4 16052019, Административная контрольная работа (тест) КИМы по ПНШ за 4 классdoc — КИМ , 4 класс, УМК — Знанио Похожие Контрольные работы по окружающему миру Входная контрольная работа по математике №1 4 класс Контрольная работа № 2 Класс миллионов [DOC] 2015-2016 Похожие График административных контрольных работ на 2015-2016 учебный год контрольные работы по русскому языку, математике, окружающему миру 4 класс , Стартовый контроль по русскому языку и математике, Проверка Итоговые контрольные работы 1-4 кл — Учителю начальных классов 8 9 » Контрольная работа по окружающему миру 1 класс · Итоговые контрольные 306 80 0 Итоговая контрольная работа по русскому языку 4 класс Административная контрольная работа по математике 4 класс Похожие 17 янв 2015 г — Административная контрольная работа за 1 полугодие 4 класс УМК Школа РоссииВариант IБазовый уровень:1Реши задачу:Сколько Контрольная работа окружающий мир 4 класс 1 четверть wwwliendakcom/component/k2/itemlist/user/1523 Контрольная работа окружающий мир 4 класс 1 четверть вахрушев, применяются за нарушение норм административного , конституционного, Итоговый тест по окружающему миру («Человек и природа») 4 lvova-tvru/?p=1086 19 янв 2015 г — Данный тест предназначен для учеников 4го класса по предмету Итоговый тест по окружающему миру («Человек и природа») 4 класс 1 полугодие Что управляет работой организма и сложным поведением Проверочные тесты по окружающему миру 2-4 классы — БОТАН › Учителю › Начальные классы 31 мая 2016 г — Административная контрольная работа по окружающему миру за 3 четверть 2015-2016 учебного года ученика (цы) 2 класса Оценка знаний учащихся — Начальные классы — Сообщество pedsovetsu › Файлы для скачивания › Начальные классы Похожие Шаблон «Анализ и динамика административных контрольных работ по административной контрольной работы параллели 4 -х классов (до 8 классов в Предлагаю вашему вниманию итоговый тест по окружающему миру для 1 [DOC] Подпись к фото: word График по проведению административных kms-s22ippkru/images/ocenka_kachestva/grafik_kontrolnih_rabotdoc Административная контрольная работа Русский язык, математика Октябрь, декабрь, март Литературное чтение, окружающий мир Декабрь 4 класс Итоговая тестовая работа по русскому языку 4 класс Вариант 1 wwwnachalkacom › Тест-центр Похожие 26 февр 2012 г — Итоговая тестовая работа по русскому языку 4 класс Вариант 1 Вс, 2012-02 -26 Тест по окружающему миру на тему «Космос» 2 класс Гдз решебник Окружающий мир, Контрольные и проверочные helpzaochnikuru/gdz-reshebnik-okruzhayushhij-mir-kontrolnye-i-proverochnye-rab Похожие 1 нояб 2016 г — Бесплатный Гдз решебник читать онлайн Ответы Вахрушев АА Окружающий мир 4 класс контрольные работы по окружающему Контрольные работы для начальной школы — Начальная школа Контрольные работы для учителей начальных классов Образец Всероссийской проверочной работы по окружающему миру (ВПР) для 4 класса [PDF] РАБОЧАЯ ПРОГРАММА по окружающему миру для 4 «В» класса s579ru/materials/documents/rab_programmy//1-4/rab_prog-okruzh_mir-4vpdf 5 Проверочная работа № 5 «Страницы истории России» 6 Административная контрольная работа 2 ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ПРОГРАММЫ № плешаков окружающий мир 3 класс 1 четверть контрольная работа dpsnalconagarcom//pleshakov-okruzhaiushchii-mir-3-klass-1-chetvert-kontrolnaia- 5 дней назад — плешаков окружающий мир 3 класс 1 четверть контрольная работа 1 Контрольная работа по окружающему миру 4 класс 1 четверть плешаков 4 четверть , За год Входная работа, 1 , 2, 3, 3 Административная контрольная работа русский язык 4 класс 3 четверть школа россии galerielereverberecom//kontrolnaia-rabota-russkii-iazyk-4-klass-3-chetvert-shkola-r контрольная работа русский язык 4 класс 3 четверть школа россии работа по Административная контрольная работа по русскому языку 4 класс 2 3 4 четверть Контрольные работы по окружающему миру 4 класс [PDF] — Все Страницы всемирной истории Контрольная работа для 4 класса wwwmysharedru/slide/459630/ Зарисуйте временные отрезки и подпишите названия эпох 4 Страницы всемирной истории Контрольная работа для 4 класса по учебнику «Мир вокруг нас» Тема презентации по окружающему миру 4 класс : Автор: Блинник Инна Ивановна Учитель Государственно- административные реформы Результаты учебной работы начальной школы в 2017-2018 учг 3 июл 2018 г — 3 класс 75 8 50 17 100 77 61 4 класс 85 19 44 22 — 100 74 64 Административная контрольная работа по окружающему миру 4 Вместе с административная контрольная работа по окружающему 4 класс часто ищут итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс фгос итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс школа 2100 контрольная работа по окружающему миру 4 класс плешаков контрольная работа по окружающему миру 4 класс ответы итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс перспектива проверочные работы по окружающему миру 4 класс школа россии контрольная работа по окружающему миру 4 класс 2 четверть итоговая контрольная работа по окружающему миру за 4 класс с ответами Навигация по страницам 1 2 Следующая Ссылки в нижнем колонтитуле Россия — Подробнее… Справка Отправить отзыв Конфиденциальность Условия Аккаунт Поиск Карты YouTube Play Новости Почта Контакты Диск Календарь Google+ Переводчик Фото Ещё Документы Blogger Hangouts Google Keep Подборки Другие сервисы Google

Яндекс Яндекс Найти Поиск Поиск Картинки Видео Карты Маркет Новости ТВ онлайн Музыка Переводчик Диск Почта Коллекции Все Ещё Дополнительная информация о запросе Показаны результаты для Нижнего Новгорода Москва 1 Тест по окружающему миру ( 4 класс ) на тему nsportalru › Начальная школа › Окружающий мир › …-kontrolnaya-rabota-po Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Сайт – выбор пользователей Подробнее о сайте Предварительный просмотр: Административная контрольная работа по окружающему миру для 4 класса (за 1 Контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие, 3 класс Проверочная работа выполнена в форме теста Административная контрольная работа по русскому языку за 1 Читать ещё Предварительный просмотр: Административная контрольная работа по окружающему миру для 4 класса (за 1 полугодие) I — вариант Что такое астрономия? Контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие, 3 класс Проверочная работа выполнена в форме теста Административная контрольная работа по русскому языку за 1 полугодие 3 класса со спецификацией Контрольная работа содержит по русскому языку за 1 полугодие 3 класса содержит спецификацию и кодификатор умений в соответствии с ФГОС Контрольная работа по окружающему миру за 1 полугодие по системе Л В Занкова Скрыть 2 Административные контрольные работы по infourokru › …okruzhayuschemu…klassa…2147216html Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Сайт – выбор пользователей Подробнее о сайте Административные контрольные работы по окружающему миру для 4 класса по полугодиям (программа «Начальная Контрольные работы разработаны на основе изучения курса « Окружающий мир» по учебнику НФВиноградовой « Окружающий мир» по программе «Начальная школа XXI века» На выполнение Читать ещё Административные контрольные работы по окружающему миру для 4 класса по полугодиям (программа «Начальная школа 21 века») скачать материал библиотека материалов МАОУ «Петропавловская СОШ №1» МО учителей начальных классов КОНТРОЛЬНЫЕ РАБОТЫ по окружающему миру для 4 класса Контрольные работы разработаны на основе изучения курса « Окружающий мир» по учебнику НФВиноградовой « Окружающий мир» по программе «Начальная школа XXI века» На выполнение контрольных работ отводится 40 минут Форма контроля — тестовая Составлена в двух вариантах Уровень — базовый Контрольная работа за I полугодие проверяют знания учащихся по следующим разделам Скрыть 3 Административное тестирование за 1 полугодие metod-kopilkaru › …za…4_klasse_po_okruzhayuschemu… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Административная контрольная работа по окружающему миру для 4 класса 1Солнце и движущие вокруг него небесные ‹ › Название документа 1 вариантdocx Ключи к административной контрольной работе по окружающему миру для 4 класса за 1 полугодие I — вариант Что такое астрономия? Читать ещё Административная контрольная работа по окружающему миру для 4 класса 1Солнце и движущие вокруг него небесные тела составляют: Солнечную систему ‹ › Название документа 1 вариантdocx Ключи к административной контрольной работе по окружающему миру для 4 класса за 1 полугодие I — вариант Что такое астрономия? Скрыть 4 Контрольные работы по окружающему миру в 4 классе multiurokru › files/kontrol-nyie-raboty-po…v-4html Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные работы по окружающему миру в 4 классе проводятся в конце каждой четверти по программе «Школа 21 века» 5 Контрольная работа по окружающему миру 4 класс prodlenkaorg › …rabota/284681…kontrolnaja…po… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Административная работа \ Итоговая контрольная работа по окружающему Учитель начальных классов Контрольная работа по окружающему миру 4 План работы кафедры начальных классов Рабочая программа по русскому языку Современный урок Для скачивания материалов с сайта необходимо Читать ещё Главная \ Методические разработки \ Начальная школа \ Административная работа \ Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Итоговая контрольная работа по окружающему миру 4 класс Наименование ОУ Учитель начальных классов Контрольная работа по окружающему миру 4 класс ФИ учащегося_ Дата проведения_ 1Представитель какой профессии изображен на фотографии План работы кафедры начальных классов Рабочая программа по русскому языку Современный урок Для скачивания материалов с сайта необходимо авторизоваться на сайте (войти под своим логином и паролем) Скрыть 6 Контрольная работа по окружающему миру в 4 классе урокрф › …kontrolnaya…po_okruzhayushemu…v_4_klasse… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные / проверочные работы для учителя начальных классов, методиста для 4 класса по ФГОС Учебно-дидактические материалы по Окружающему миру для 4 класса по УМК АА Плешаков Читать ещё Контрольные / проверочные работы для учителя начальных классов, методиста для 4 класса по ФГОС Учебно-дидактические материалы по Окружающему миру для 4 класса по УМК АА Плешаков Контрольная работа по окружающему миру в 4 классе за 1 полугодие Нажмите, чтобы скачать публикацию в формате MS WORD (*DOC) Размер файла: 1561 Кбайт Контрольная работа по окружающему миру в 4 классе за 1 полугодие Фамилия, имя _ 1 Как называется наука о небесных телах? а) история б) география в) экология г) астрономия 2 О какой природной зоне идет речь в строчке стихотворения? Скрыть 7 Итоговая контрольная работа по окружающему миру videourokinet › …kontrolnaya…po-okruzhayushchemu…4… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте 4 класс Цель: проверить знания учащихся Установление причинно-следственных связей Подведение частных понятий под общее ЗАДАНИЕ 4 Подчеркни те полезные ископаемые, которые человек использует как топливо Читать ещё 4 класс Цель: проверить знания учащихся Установление причинно-следственных связей Подведение частных понятий под общее ЗАДАНИЕ 4 Подчеркни те полезные ископаемые, которые человек использует как топливо Нефть, торф, гранит, медный колчедан, природный газ, железная руда, бокситы, каменный уголь, известняк Скрыть 8 Входная контрольная работа по окружающему миру doc4webru › Окружающий мир › …-kontrolnaya-rabota-po… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Административное право Алгебра Английский язык Конспект урока по Окружающему миру «Кто такие мы» 1 класс Конспект открытого урока по предмету « Окружающий мир» в 1 классе «Где зимуют птицы?» Читать ещё Административное право Алгебра Английский язык Арбитражный процесс Архитектура Астрология Астрономия Конспект урока по Окружающему миру «Кто такие мы» 1 класс Конспект открытого урока по предмету « Окружающий мир» в 1 классе «Где зимуют птицы?» 27505275032750227501274992749827496 X Код для использования на сайте: Ширина блока px Скопируйте этот код и вставьте себе на сайт X Чтобы скачать документ, порекомендуйте, пожалуйста, его своим друзьям в любой соц сети Скрыть 9 Административная контрольная работа по окружающему 4 класс — смотрите картинки ЯндексКартинки › административная контрольная работа по Пожаловаться Информация о сайте 29 октября Ещё картинки 10 ГДЗ по окружающему миру 4 класс Вахрушев, Сизова gdzlolbiz › okruzhayushhij…4-klass…proverochnye-i… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Ответы 4 класса окружающего мира к тетрадям 1 и 2 частей Самостоятельные, проверочные и контрольные Представляем вам сборник отличных ответов по окружающему миру для тетрадей с проверочными и контрольными работами к учебнику «Человек и природа» и «Человек и человечество» Читать ещё Ответы 4 класса окружающего мира к тетрадям 1 и 2 частей Самостоятельные, проверочные и контрольные работы Представляем вам сборник отличных ответов по окружающему миру для тетрадей с проверочными и контрольными работами к учебнику «Человек и природа» и «Человек и человечество» Наши ГДЗ созданы только для проверки домашней работы и не предназначены для простого списывания Пособие поможет родителям для контроля усвоения материала Ответы по окружающему миру 4 класс Вахрушев, Сизова ( проверочные и контрольные работы ): Часть 1 Скрыть Контрольная работа по окружающему миру 4 класс kopilkaurokovru › nachalniyeKlassi…rabota-po…4… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Просмотр содержимого документа « Контрольная работа по окружающему миру 4 класс » Входная контрольная работа 1 Выберите верное высказывание Читать ещё Просмотр содержимого документа « Контрольная работа по окружающему миру 4 класс » Входная контрольная работа 1 Выберите верное высказывание object(ArrayObject)#850 (1) [«storage»:»ArrayObject»:private] = array(6) [«title»] = string(85) «Интегрированная контрольная работа в 1 классе » [«seo_title»] = string(50) «intieghrirovannaia-kontrol-naia-rabota-v-1-klassie» [«file_id»] = string(6) «201700» [«category_seo»] = string(16) «nachalniyeKlassi» [«subcategory_seo»] = string(7) «prochee» [«date»] = string(10) «1429105357» Итоговые контрольные работы для 2 класс Скрыть Специалист поддержки – Удалённо, РФ Как писать резюме Полезная информация Готовое резюме Профориентация hhru › найти-работу Не подходит по запросу Спам или мошенничество Мешает видеть результаты Информация о сайте реклама Грамотный русский, английский 6 EUR/час, от 6 ч/день Вместе с « административная контрольная работа по окружающему 4 класс » ищут: административная работа административная входная контрольная работа по математике 4 класс итоговая контрольная работа по математике 6 класс входная административная контрольная работа по русскому языку 5 класс итоговая контрольная работа по алгебре 7 класс итоговая контрольная работа по математике 4 класс разложить на множители административная ответственность административное право административный диктант 4 класс 1 четверть 1 2 3 4 5 дальше Браузер Все новые вкладки с анимированным фоном 0+ Скачать

Тестовые задания по окружающему миру за I полугодие, 3 класс, УМК «Школа 2100»

Тестовые задания

по окружающему миру (3 класс) за I полугодие

ОС «Школа 2100»

Разработала учитель начальных классов

МБОУ «Лицей №1» р. п.Чамзинка Республики Мордовия

Котикова И.Н.

Тест- повторение по темам «Древняя Русь. Московское государство» рассчитан на учащихся начальных классов с целью контроля знаний.

Цель: обобщение и систематизация знаний учащихся по темам «Древняя Русь. Московское государство» (I полугодие)

Задачи:

Развивающая:

— формировать самооценку и самоконтроль;

— развивать внимание, память, логическое мышление;

— прививать умения самостоятельной организации труда.

Воспитывающая:

— прививать любовь к родному отечеству.

Обучающая:

— обобщать и классифицировать знания по пройденным темам

Инструкция к тестовым заданиям.

 Тестирование проводится на заключительном уроке изучения тем «Древняя Русь. Московское государство» в конце 1 полугодия по двум вариантам. Продолжительность выполнения тестовых заданий составляет 20-25 минут. В процессе тестирования запрещается использование учебника и посторонней помощи.

Тест состоит из двух частей А и Б и включает в себя 10 заданий. Часть А включает в себя 8 заданий. К каждому заданию предлагается четыре варианта ответов. Среди предложенных вариантов ответов нужно выбрать верный и записать номер ответа рядом в бланк. Часть Б включает в себя 2 задания. Ответы на задания необходимо записать в работе на отведённых для этого строчках. Если необходимо изменить ответ, то можно зачеркнуть предыдущий и записать новый.

Критерии оценивания.

Каждый правильный ответ на тестовые задания части А оценивается в 1 балл. Правильные ответы на тестовые задания части Б оцениваются в 2 балла

Отметка по пятибалльной шкале

«2»

«3»

«4»

«5»

Сумма набранных баллов

0–5

6–7

8–9

10–12

Фамилия Имя_____________________________________ Класс___________

Тест за I полугодие по темам: «Древняя Русь. Московское государство» (УМК «Школа 2100»), учебник А.А. Вахрушева, Д.Д. Данилова «Окружающий мир. Моё отечество» 3 класс

Вариант 1

А1. Когда было образовано Древнерусское государство?

882г.

1240г.

988г.

1380г.

     

    А2. Кто крестил Русь?

    Ярослав

    Князь Олег

    Князь Владимир

    Иоанн Грозный

       

      А3. Кто является создателями первой славянской азбуки?

      Олег и Владимир

      Кирилл и Мефодий

      Владимир и Ярослав

      Монахи

         

        А4. Какое событие произошло в 1242 году?

        Куликовская битва

        Нашествие хана Батыя на Русь

        Образование Древнерусского государства

        Ледовое побоище

           

          А5. Кому принадлежат эти слова: «Кто с мечом к нам придёт, от меча и погибнет! На том стояла, стоит и стоять будет земля Русская!» ?

          Александру Невскому

          Хану Батыю

          Князю Владимиру

          Князю Олегу

             

            А 6. В каком году произошло нашествие монголо-татар во главе с ханом Батыем на Русь?

            882—988г.г.

            1237—1242 г.г.

            1480 —1547г.г.

            1242—1380г.г.

               

              А7. Какой русский князь победил в битве на Куликовом поле?

              Князь Владимир

              Александр Невский

              Дмитрий Донской

                 

                А8. В каком году возникло Московское государство?

                в 882г.

                в 1547г.

                в 1242г.

                в 1480г.

                   

                  Б1. Что такое летопись?

                  ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

                  Б2. Напишите имя первого русского книгопечатника.

                  ___________________________________________

                  Фамилия Имя_____________________________________ Класс___________

                  Тест за I полугодие по темам: «Древняя Русь. Московское государство» (УМК «Школа 2100»), учебник А.А. Вахрушева, Д.Д. Данилова «Окружающий мир. Моё отечество» 3 класс

                  Вариант 2

                  А1. Кто образовал Древнерусское государство?

                  1) Ярослав

                  Князь Олег

                  Князь Владимир

                  Иоанн Грозный

                     

                    А2. В каком году произошло Крещение Руси?

                    в 882г.

                    в 1240г.

                    в 1380г.

                    в 988г.

                       

                      А3. Как называлась первая славянская азбука?

                      Древний алфавит

                      Кириллица

                      Летопись

                      Древняя азбука

                         

                        А4. Какой князь разгромил немецких рыцарей на Чудском озере?

                        1) Дмитрий Донской

                        Александр Невский

                        Князь Владимир

                        Князь Олег

                           

                          А5. Как называется древняя повесть о походе князя Игоря Святославовича на половцев?

                          «Слово о погибели русской земли»

                          «Поучения Владимира Мономаха»

                          «Повесть временных лет»

                          «Слово о полку Игореве»

                             

                            А 6. В каком году произошла Куликовская битва?

                            в 988г.

                            в 1242 г.

                            в1380 г.

                            в 1480г.

                               

                              А7. Кто благословил Д.Донского на победу в Куликовской битве?

                              Князь Владимир

                              Сергий Радонежский

                              Иоанн Грозный

                              Александр Невский

                                 

                                А8. Кто из правителей Московского государства называл себя великим государем Руси?

                                Князь Владимир

                                Дмитрий Донской

                                Иоанн Грозный

                                Князь Олег

                                   

                                  Б1. Что такое иконостас?

                                  ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

                                  Б2. Напишите, как называли стрельцов в Московском государстве?

                                  ___________________________________________

                                  Ответы на тестовые задания за I полугодие по темам: «Древняя Русь. Московское государство» (УМК «Школа 2100»),

                                  учебник А.А. Вахрушева, Д.Д. Данилова «Окружающий мир. Моё отечество» 3 класс

                                  Вариант 1

                                  задания

                                  Ответ

                                  А1

                                  882г.

                                    А2

                                    3)Князь Владимир

                                    А3

                                    2) Кирилл и Мефодий

                                    А4

                                    4)Ледовое побоище

                                    А5

                                    1) Александру Невскому

                                    А6

                                    2) 1237—1242 г. г.

                                    А7

                                    3) Дмитрий Донской

                                    А8

                                    4)в 1480г.

                                    Б1

                                    Летопись – это запись событий русской истории, расположенные по годам.

                                    Б2

                                    Иван Фёдоров

                                    Вариант 2

                                    задания

                                    Ответ

                                    А1

                                    2) Князь Олег

                                    А2

                                    4) в 988г.

                                    А3

                                    2) Кириллица

                                    А4

                                    2)Александр Невский

                                    А5

                                    4) «Слово о полку Игореве»

                                    А6

                                    3) в1380 г.

                                    А7

                                    2) Сергий Радонежский

                                    А8

                                    3)Иоанн Грозный

                                    Б1

                                    Иконостас – стена из икон в храме.

                                    Б2

                                    Служилые люди или стрелецкое войско

                                    RUSKII VOPROS

                                    Дорогие читатели!

                                    Этот номер журнала мы начинаем статьей-прощанием с одним из создателей и идеологов этого журнала, человеком без которого он не стал бы таким интересным и содержательным, не собрал бы таких уважаемых авторов из разных стран. И, конечно, не обрел бы столько читателей и настоящих друзей. Памяти Петра Вагнера.

                                    Чехия лишилась блестящего дипломата, историческая наука потеряла глубокого независимого мыслителя, страны Восточной, Центральной Европы и постсоветского пространства лишились большого друга.

                                    Смерть Петра Вагнера стала личной трагедией для многих людей. Его громадное обаяние, особый, присущий только ему, юмор в сочетании с мужеством и самоиронией привлекали к нему всех, кто имел счастье соприкасаться с ним в работе или в спорте, которому он отдавался с той же страстью, как и всему остальному, чем увлекался этот удивительный в своей многогранности человек.

                                    Уникальный стиль Петра Вагнера проявлялся во всех его ипостасях: в дипломатии, в науке, в общественной деятельности.

                                    Не будет преувеличением сказать, что Петр создал свое особое направление в дипломатии. Будучи сотрудником чешского МИДа, государственным служащим,  он от имени Чешской республики реализовывал то, что лучше всего можно назвать внешней политикой дружбы и взаимной симпатии. Множество людей в России, в Украине и в Азербайджане именно благодаря Петру Вагнеру стали с особой теплотой относиться к Чехии и к чешскому народу.

                                    В 2001 году Петр Вагнер создал журнал «Русский вопрос», издание о настоящем и прошлом государств, возникших на территории бывшего СССР.

                                    Будучи человеком европейской культуры, историком, дипломатом, и прежде всего чешским патриотом, Петр Вагнер испытывал жгучий интерес к России, как вечному «Другому», который одновременно находится и «внутри» Европы и вне ее, постоянно угрожая то внешней агрессией, то разложением изнутри.

                                    Безвременная кончина Петра Вагнера поставила перед авторами «Русского вопроса» проблему почти неразрешимую. Непонятно, как продолжать выпуск журнала без его создателя, который был не только организатором и вдохновителем издания, но и его камертоном. А похоронить «Русский вопрос» одновременно с его создателем – значит предать память близкого и дорогого нам человека, друга и учителя…

                                    Светлая память тебе, Петр. Глубокие соболезнования семье. 

                                    (PDF) Тестирование четырех типов пузырьков в биржи бирки 1000001

                                    Приложение

                                    Результаты ADF, PP и KPSS Испытания на обменный курс

                                    ADF PP KPSS

                                    Уровень 1

                                    ST

                                    Различный уровень 1

                                    ST

                                    Различный уровень 1

                                    ST

                                    Diff

                                    ST

                                    Diff

                                    Spot Brazil Constance и Trend -1. 48 -6.26 -1.79 -16.47 0.27 -1.79 -16.47 0,27 0,09

                                    Константы -1.36 -6.26 -1.68 -16.50 0,73 0.10

                                    Нет 0.36 -6.23 0,27 -16.50

                                    Россия Постоянная и тренд −2.51 -7.87 -2.01 -9.06 0.24 0,07

                                    Константа -1.21 -7.87 -0.65 -9.10 1.07 -0.65 -9.10 1.07 0,14

                                    None 0.23 -7.80 0.72 -9.16

                                    Индия Константы и Trend -1.45 -5.08 -1.73 -13.90 0,41 0,07

                                    Константа -0.34 -5.03 -0.66 -13.92 -0.66 -13.92 1.39 0.12

                                    Нет 1.30 -4.83 1.15 -13.88

                                    China Constance и Trend -1.49 -9.20 -1.08 -9.70 0.32 0,06

                                    Константы -2.47 -8.70 -2.38 -9.55 0.99 0.44

                                    Нет −1,37 −6,18 −1,95 −9,28

                                    Южная Африка Постоянная и тренд −1.48 -6,26 -1,79 -16,47 0,27 0,09

                                    Постоянная -1,36 -6,26 -1,68 -16,50 0,73 0,10

                                    Нет 0,36 -6,23 0,27 -16,50

                                    -1,0502 FUND1, Бразилия Постоянная и тренд 1 −8,19 0,19 0,07

                                    Постоянная −1,01 −8,07 −0,87 −8,21 1,70 0,07

                                    Нет постоянной тренда 1,89 −6,17 2, 23 −7,83

                                    Россия Постоянная и тренд −2,23 −7,06 −1,87 −9,56 0,28 0,05

                                    Постоянная 0,54 −7,00 0,60 −9,53 1,39 0,17

                                    Без постоянной тренда 2,17 −9,09 3,59 −9,09

                                    Индия Постоянная и тренд −2,05 −8,52 −1,94 −12,49 0, 40 0,06

                                    Постоянная −0,29 −8,52 −0,01 −12,49 1,79 0,14

                                    Нет постоянной тренда 1,95 −8,22 2,26 −12,26

                                    Китай Постоянная и тенденция −1,43 −6,81 −1,81 −8,63 0,28 0,04

                                    Постоянная −2,17 −6,40 −2,67 −8,45 0,96 0 ,40

                                    Без постоянной тренда −1,15 −6,26 −1,48 −8,37

                                    Южная Африка Постоянная и тренд −1,49 −5,98 −1,22 −12,19 0,30 0,07

                                    Постоянная 0,22 −5,91 0,54 −12,1 4 1,64 0,21

                                    Без константы тренда 2,16 −5,46 2,50 −11,82

                                    ФОНД2 Бразилия Постоянная и тренд −2,55 −8,17 −2,06 −8,33 0,20 0,08

                                    Постоянная −1,18 −8,18 −0,95 −8,34 1,71 0,08

                                    Нет постоянной тренда 1,89 −6,23 2,27 −7, 95

                                    Россия Постоянная и тренд −2,27 −7,19 −1,96 −9,71 0,29 0,05

                                    Постоянная 0,44 −7,16 0,52 −9,70 1,39 0 ,16

                                    Без постоянной тренда 1,91 −9,25 3,72 −9,25

                                    Индия Постоянная и тренд −2,15 −8,35 −1,99 −12,48 0,39 0,06

                                    Постоянная −0,40 −8,36 −0,15 −12,49 1,80 0,12

                                    Без постоянной тренда 1,82 −8,09 2,17 −12,27

                                    Китай Постоянная и тренд −1,10 −6,78 −1,88 −8,99 0,28 0,04

                                    Константа −2,13 −6,46 −2,62 −8,96 0,94 0,36

                                    Без постоянной тренда −1,41 −6,33 −1,51 −8,91

                                    Южная Африка Постоянная и тренд −1,57 −6,00 −1,27 −12,33 0,29 0,06

                                    Постоянная 0,08 −5,95 0,45 −12,32 1,55 0,18

                                    Без постоянной тренда 2,10 −5,51 2,56 −12,16

                                    5% Критические значения тестов АДФ и ПП для каждой модели составляют соответственно −3. 43, -2,88 и -1,94.

                                    Критические значения теста KPSS для каждой модели составляют соответственно: 0,15 и 0,46. (5%)

                                    ИСПЫТАНИЕ ЧЕТЫРЕХ ТИПОВ ПУЗЫРЕЙ В ОБМЕННЫХ КУРСАХ БРИКС 21

                                    Характеристика функциональных доменов для проникновения TIM-опосредованного оболочечного вируса

                                    АННОТАЦИЯ

                                    T-клеточный иммуноглобулин и муциновый домен 1 (TIM-1 семья) и другие TIM члены были недавно идентифицированы как опосредованные фосфатидилсерином (PtdSer) рецепторы, усиливающие проникновение вируса (PVEER). Эти белки усиливают проникновение вируса Эбола (EBOV) и других вирусов, связывая PtdSer на вирусной оболочке, концентрируя вирус на поверхности клетки и способствуя последующей интернализации.PtdSer-связывающая активность иммуноглобулиноподобного вариабельного (IgV) домена важна как для связывания вируса, так и для интернализации TIM-1. Однако TIM-3, домен IgV которого также связывает PtdSer, не способствует эффективному проникновению вируса, что указывает на то, что другие домены белков TIM функционально важны. Здесь мы исследуем домены, поддерживающие усиление проникновения оболочечных вирусов, тем самым определяя функции, необходимые для функционального PVEER. Используя множество химер и делеционных мутантов, мы обнаружили, что в дополнение к функциональному PtdSer-связывающему домену PVEER требуется стеблевой домен достаточной длины, содержащий последовательности, которые способствуют расширенной структуре.Ни цитоплазматический, ни трансмембранный домен TIM-1 не являются существенными для усиления проникновения вируса, при условии, что белок все еще связан с плазматической мембраной. Основываясь на этих определенных характеристиках, мы создали миметик, лишенный последовательностей TIM и состоящий из аннексина V, муциноподобного домена α-дистрогликана и гликофосфатидилинозитолового якоря, который функционировал как PVEER для усиления трансдукции вирионов, отображающих вирусы Эбола, Чикунгунья, Росс-Ривер. , или гликопротеины вируса Синдбис. Эта идентификация ключевых особенностей, необходимых для опосредованного PtdSer усиления проникновения вируса, обеспечивает основу для более эффективного распознавания неизвестных PVEER.

                                    ВАЖНОСТЬ Т-клеточный иммуноглобулин и муциновый домен 1 (TIM-1) и другие члены семейства TIM представляют собой недавно идентифицированные фосфатидилсериновые (PtdSer)-опосредованные рецепторы, усиливающие проникновение вируса (PVEER). Эти белки усиливают проникновение вируса путем связывания фосфолипида PtdSer, присутствующего на вирусной мембране. Хотя известно, что связывание PtdSer необходимо для функции PVEER TIM-1, TIM-3 разделяет эту связывающую активность, но не усиливает проникновение вируса. Никаких всесторонних исследований, чтобы охарактеризовать другие домены TIM-1, не проводилось.В этом исследовании, используя различные химерные белки и делеционные мутанты, мы определяем особенности, необходимые для функционального PVEER. Имея в виду эти особенности, мы создали миметик TIM-1, используя функционально сходные домены из других белков. Этот мимик, как и TIM-1, эффективно усиливал трансдукцию. Эти исследования дают представление о ключевых характеристиках, необходимых для PVEER, и позволят более эффективно идентифицировать неизвестные PVEER.

                                    ВВЕДЕНИЕ

                                    Т-клеточный иммуноглобулин и муциновый домен 1 (TIM-1; также называемый HAVCR-1, TIMD1 или KIM-1) является членом семейства TIM гликопротеинов клеточной поверхности 1 типа.TIM-1 усиливает проникновение широкого спектра вирусов, включая членов семейств пикорнавирусов, филовирусов, флавивирусов, альфавирусов, аренавирусов и бакуловирусов (1,–6). Хотя TIM-4 менее изучен, все данные свидетельствуют о том, что он усиливает проникновение вируса так же, как TIM-1. Считается, что для вирусов с оболочкой это усиление происходит за счет связывания TIM с фосфатидилсерином (PtdSer) на вирусной оболочке. Управляя клеточным механизмом, участвующим в поглощении апоптотических телец, интернализация вируса происходит независимо от взаимодействия гликопротеина вириона с рецепторами клеточной поверхности (2, 5).Этот механизм апоптотической мимикрии был впервые описан для вируса коровьей оспы (7). Впоследствии комплекс Gas6/Axl, TIM-1 и TIM-4 были идентифицированы как клеточные белки, участвующие в этом процессе (8). Мы назвали этот класс вирусных рецепторов PtdSer-опосредованными рецепторами, усиливающими проникновение вируса (PVEER).

                                    Семейство белков TIM, TIM-1, -3 и -4 у человека, имеет общую структуру. Их эктодомены включают амино-концевой иммуноглобулин-подобный вариабельный (IgV)-подобный домен, который простирается от плазматической мембраны с помощью сильно O-связанного гликозилированного муциноподобного домена (MLD) (9).Петли CC’ и FG всех доменов TIM IgV человека образуют карман, который связывает PtdSer (10,-13). Этот карман высоко консервативен между членами семейства TIM человека и их мышиными ортологами. Кроме того, целостность и ключевые остатки внутри этого кармана необходимы для связывания PtdSer и последующего TIM-1-опосредованного усиления проникновения вируса (2, 3, 5). Однако, несмотря на эту консервацию, TIM-3 намного менее эффективно усиливает проникновение вируса (2, 3).

                                    Механизм, с помощью которого члены семейства TIM усиливают проникновение вируса, неясен. Было высказано предположение, что они усиливают проникновение, действуя как факторы прикрепления и концентрируя вирус на поверхности клетки путем связывания PtdSer (2, 3, 5). Однако это не объясняет способность TIM-1 усиливать интернализацию оболочечных вирусов, не содержащих гликопротеинов (2, 5). Есть два вероятных механизма улучшения входа, которые не исключают друг друга; либо TIM непосредственно интернализуют вирионы в эндосомы, либо комплексы TIM/вирион взаимодействуют с дополнительными PtdSer-связывающими белками, которые облегчают интернализацию.

                                    В этом исследовании мы определяем необходимые характеристики семейства белков TIM для усиления проникновения вируса Эбола (EBOV). В дополнение к консервативным PtdSer-связывающим элементам домена IgV мы обнаружили, что длина и доменная структура MLD имеют решающее значение для связывания и трансдукции вируса. Однако наличие трансмембранного домена и цитоплазматического хвоста не является существенным для проникновения вируса, поскольку якорь гликозилфосфатидилинозита (GPI) может заменять эти элементы, демонстрируя, что передача сигналов цитоплазматического хвоста TIM не является критической для усиления трансдукции EBOV. Используя знания, полученные в результате идентификации доменов, необходимых для проникновения вируса, мы построили химерную молекулу, состоящую из якоря GPI, стебля α-дистрогликана и аннексина V, которая усиливала проникновение EBOV так же эффективно, как TIM дикого типа (WT). -1.

                                    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

                                    Клеточные линии и вирусы.

                                    Клетки HEK 293T, линию эмбриональных клеток почки человека, поддерживали в модифицированной Дульбекко среде Игла (Gibco-BRL) с 5% фетальной бычьей сывороткой (FBS) и 1% пенициллином-стрептомицином.

                                    Псевдовирионы вируса везикулярного стоматита (VSV) получали, как описано ранее (4, 14,–16). Мы использовали псевдовирионы VSV (штамм Indiana), в геномах которых ген гликопротеина G заменен усиленным зеленым флуоресцентным белком (VSVΔG-EGFP). Для получения псевдовирионов VSV клетки HEK 293T трансфицировали плазмидами, экспрессирующими либо EBOV GP без муцинового домена GP1, предшественник гликопротеина (GPC) вируса Ласса (LASV), белок оболочки вируса Синдбис (SINV) 2. 2 1L1L (env), вирус Росс-Ривер (RRV) GP, GP64 или вирус Чикунгунья (CHIKV) env (штамм OPY1) и трансдуцированный через 24 часа псевдовирионами VSVΔG-EGFP.После 4 ч поглощения вируса планшеты промывали и обновляли средой. Псевдотипированные вирионы собирали в супернатанте через 48 и 72 ч после трансдукции, объединяли и фильтровали через фильтр с размером пор 0,45 мкм. Аликвоты вируса хранили при -80°C до использования.

                                    Меченые флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) псевдовирионы EBOV GP были получены, как описано ранее (5). Вкратце, псевдовирионы концентрировали путем центрифугирования супернатантов в течение ночи при 4°C при 5380 × г , ресуспендировали в 500 мМ карбонатном буфере (pH 9.5) и реагировали с FITC-изомером 1 (Invitrogen) при 4°C в течение 1 ч в темноте. Затем псевдовирионы диализовали в 1× фосфатно-солевом буфере (PBS) с использованием диализных кассет Slide-A-Lyzer с отсечкой молекулярной массы 10000 (Thermo Scientific) и очищали ультрацентрифугированием через 20%-ную подушку из сахарозы при 80000 × г при 4°С. Осадки ресуспендировали в 1× PBS, фильтровали через шприцевой фильтр с размером пор 0,45 мкм, делили на аликвоты и хранили при -80°C до использования.

                                    Трансдукции.Клетки

                                    HEK 293T трансфицировали плазмидами, как показано на рисунках, с использованием полиэтиленимина в соответствии со стандартным протоколом (17). Через 24 часа после трансфекции одну часть клеточной популяции переносили в шестилуночный планшет для тканевых культур и через 24 часа окрашивали для поверхностной экспрессии, как описано ниже. Вторую порцию трансфицированных клеток переносили в 48-луночный планшет для тканевых культур и через 24 ч трансдуцировали псевдовирионами при множественности инфицирования (MOI), указанных в подписях к рисункам.Через 24 ч после трансдукции клетки открепляли раствором аккутазы (Millipore) и оценивали экспрессию EGFP с помощью проточной цитометрии как процент положительных клеток в канале FL-1. Данные трансдукции были нормализованы, как указано в подписях к фигурам.

                                    Для трансдукции в клетки, экспрессирующие смеси мутантов MLD, ДНК для векторов экспрессии мутантов MLD смешивали вместе в равных соотношениях ДНК в следующих комбинациях: (только C66, C66+C84, C66+C84+C101, отдельно C84, С84+С101, С84+С101+С118, только С101, С101+С118 и С66+С84+С101+С118). Все клеточные популяции трансфицировали одинаковой общей массой ДНК; таким образом, масса ДНК, используемая для одного мутантного вектора экспрессии в смеси трех мутантов, будет составлять одну треть массы ДНК, используемой при трансфекции только этого мутанта.

                                    Выражение поверхности.

                                    Трансфицированные клетки HEK 293T открепляли 1× PBS плюс 5 мМ ЭДТА через 48 ч после трансфекции, промывали 1× PBS плюс 5% FBS и инкубировали в течение 1 ч с козьими поликлональными антисыворотками, специфичными к mTIM-1, TIM-1, TIM-3 или TIM-4, как указано (R&D Systems) в концентрации 4 мкг/мл.В качестве альтернативы клетки инкубировали в течение 1 ч с человеческими TIM-1-специфичными мышиными моноклональными антителами (MAbs) ARD5 или AKG7 (4, 18, 19), как указано, в концентрации 5 мкг/мл. В качестве отрицательного контроля использовали нормальную козью сыворотку или очищенный мышиный IgG2a (R&D Systems). Клетки промывали и инкубировали в течение 20 минут с вторичной антисывороткой против мышей или против коз, конъюгированной либо с Cy5 (Invitrogen), либо с DyLight 649 (Jackson ImmunoResearch). После инкубации клетки промывали и оценивали экспрессию белка путем измерения процента положительных клеток в канале FL-4 с использованием проточного цитометра FACSCalibur (BD Biosciences).Все данные проточной цитометрии анализировали с использованием программного обеспечения FlowJo (TreeStar, Inc.).

                                    Генерация мутантов и химер TIM.

                                    TIM-1 ({«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»NM_012206.2″,»term_id»:»153085426″,»term_text»:»NM_012206.2″} }NM_012206.2), TIM-3 ({«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«текст»:»NM_032782.4″,»term_id»:»354681988″,»term_text»:»NM_032782 .4″}}NM_032782.4), TIM-4 ({«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«текст»:»NM_138379.2″,»term_id»:»226529862″,»term_text «:»NM_138379.2»}}NM_138379.2) и mTIM-1 ({«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«текст»:»NM_134248.2″,»term_id»:»262231820″,»term_text «:»NM_134248.2»}}NM_134248.2) кДНК клонировали ниже по течению и экспрессировали из промотора немедленно-раннего цитомегаловируса человека (CMV) в pCMV6-XL5. Все конструкции дикого типа и химерные конструкции были полностью секвенированы для проверки правильная композиция

                                    (i) Химеры TIM IgV

                                    Химеры были созданы с помощью ПЦР-амплификации доменов IgV с выступающими праймерами, содержащими сайты рестрикционных ферментов. Затем и вектор, и продукт ПЦР расщепляли соответствующими парами ферментов, очищали на геле и лигировали вместе. Во всех случаях сайты рестрикции вырезали домен IgV из родительского вектора. Последовательности, кодирующие IgV-домены mTIM-1 или TIM-3, клонировали в экспрессионную плазмиду TIM-1 с использованием 5′-сайтов рестрикции KpnI и 3′ MfeI для создания химер m1h2 или h4h2 и клонировали в экспрессионную плазмиду TIM-4 с использованием 5 ‘сайты рестрикции EcoRI и 3′ BamHI для создания m1h5 или h4h5 соответственно.Первоначально сайт фермента рестрикции BamHI был вставлен ниже домена IgV TIM-4, вводя миссенс-мутацию A134G, которая не влияла на трансдукцию EBOV (данные не показаны). Последовательности, кодирующие домен IgV TIM-1, клонировали в экспрессионную плазмиду TIM-3 с использованием 5′-сайтов рестрикции NheI и 3’-BstEII для создания h2h4.

                                    (ii) Мутанты длины TIM-1 MLD.

                                    Пары праймеров, содержащие выступающие 5′-сайты рестрикционных ферментов MfeI и 3′-PstI, были созданы для амплификации различных областей между сайтами рестрикции MfeI и PstI, присутствующими в кодирующей области TIM-1 MLD экспрессионной плазмиды. Продукты ПЦР и вектор экспрессии TIM-1 расщепляли MfeI и PstI, разделяли на агарозном геле, очищали и лигировали. Мутации были подтверждены секвенированием. Последовательности выровнены в .

                                    Длина MLD влияет на связывание вирионов EBOV. (A) Выравнивание CLUSTAL V области аминокислотных последовательностей TIM-1 и мутантной MLD (128-250 а.о. TIM-1 дикого типа). Выравнивание определяли с помощью MegAlign (DNASTAR). Мутанты были названы в зависимости от того, сохранили ли они амино-концевую (N), среднюю (M) или карбокси-концевую (C) последовательность MLD и длины их MLD.(B) Связывание FITC-меченых вирионов VSV, псевдотипированных с помощью EBOV GP, с клетками HEK 293T, экспрессирующими мутанты WT TIM-1 или MLD, по оценке проточной цитометрии. Все показанные мутанты сохраняют карбоксиконцевую последовательность MLD. Репрезентативные гистограммы показаны черными линиями, представляющими связывание вируса, и серыми линиями, представляющими фоновую флуоресценцию. (C) Репрезентативные контурные графики связывания меченого FITC вириона по сравнению с экспрессией TIM-1. Трансфицированные клетки окрашивали MLD-специфическим MAb AKG7 после связывания с вирусом.(D) Точечный график связывания вируса с TIM-1 в зависимости от расчетной длины муцина. Данные были количественно оценены из исследований связывания на панели B с использованием средней интенсивности флуоресценции (MFI) вирус-позитивных клеток. (E) Иммуноблот, демонстрирующий эквивалентные количества меченого HA белка TIM после нормализации супернатантов HEK 293T. (F) Связывание растворимых мутантов WT TIM-1 и MLD с липосомами PtdSer. Серийные разведения нормализованного белка TIM-1 инкубировали с планшетами для ELISA, предварительно связанными в течение ночи с липосомами PtdSer (50 мкМ).Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего по крайней мере для трех повторов.

                                    (iii) Мутанты цитоплазматического хвоста TIM-1.

                                    Конструкция TIM-1, лишенная цитоплазматического хвостового домена (h2Δcyto), была описана ранее (18). Делеции цитоплазматического хвоста TIM-3, TIM-4 и mTIM-1 (h4Δcyto, h5Δcyto и m1Δcyto) были созданы путем мутации Y227, L340 или S268, соответственно, для остановки кодонов, что привело к ранней терминации после трансмембранного домена, сохраняя при этом несколько цитоплазматических доменов, заряженных остатков.

                                    Мутанты TIM-1 с заменой цитоплазматического хвоста были созданы путем введения сначала сайта BamHI ниже трансмембранного домена, что привело к мутации YF320GS, которая не влияла на экспрессию или трансдукцию EBOV (данные не показаны). Последовательности, кодирующие цитоплазматические хвосты TIM-3, TIM-4 и mTIM-1, амплифицировали с помощью ПЦР с праймерами, кодирующими выступающие участки рестрикции BamHI (TIM-3 и TIM-4) или BglII (mTIM-1) и XbaI. После вырезания цитоплазматического хвоста TIM-1 с использованием сайтов рестрикции BamHI и XbaI эти продукты ПЦР лигировали в модифицированную плазмиду TIM-1 для конструирования химер TIM-1, содержащих цитоплазматический хвост либо mTIM-1 (h2m1cyto), либо TIM-3. (h2h4cyto) или TIM-4 (h2h5cyto).

                                    (iv) ГФИ-заякоренные мутанты TIM-1.

                                    Плазмида, экспрессирующая GPI-заякоренный мышиный TIM-4 (mTIM-4), в которой трансмембранный и цитоплазматический хвостовые домены mTIM-4 заменены карбоксиконцевыми 37 аминокислотами (аа) фактора ускорения распада (DAF) был любезно предоставлен Коди Равичандран (Университет Вирджинии) (20). Последовательности, кодирующие домены IgV и MLD TIM-1, TIM-3, TIM-4 и mTIM-1, амплифицировали с помощью ПЦР с использованием праймеров, кодирующих выступающие 5′-сайты рестрикционных ферментов BglII и 3′-SbfI, и лигировали в GPI-заякоренные Плазмида mTIM-4 после расщепления вектора по этим же сайтам.В результате были получены экспрессирующие плазмиды mTIM-1 (m1-GPI), TIM-3 (h4-GPI) и TIM-4 (h5-GPI) с заякоренным GPI.

                                    Протокол, использованный Park et al. (20) был изменен для подтверждения связи GPI наших мутантов. Вкратце, клетки HEK 293T, трансфицированные экспрессионными конструкциями TIM дикого типа (WT) или GPI-заякоренными TIM, высевали в 24-луночные планшеты и инкубировали через 48 ч с 0,4 ед. фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PI-PLC; Invitrogen) или без нее. ) при 37°С в течение 1 ч в 100 мкл PBS. PI-PLC расщепляет фосфоглицериновую связь внутри GPI, высвобождая GPI-заякоренные белки из мембраны.Анализ с помощью проточной цитометрии клеток, окрашенных на поверхности, подтвердил, что экспрессия TIM, заякоренных GPI, была снижена с клеточной поверхности после обработки PI-PLC, тогда как потери TIM дикого типа не наблюдалось (см. ).

                                    Цитоплазматические и трансмембранные домены не являются существенными для активности PVEER белков TIM. (A) Поверхностная экспрессия человеческого TIM-1, TIM-3 и TIM-4 и мышиного TIM-1 в клетках HEK 293T. Через 48 часов после трансфекции клетки HEK 293T инкубировали с поликлональными антисыворотками против соответствующего члена семейства TIM.Клетки, трансфицированные пустым вектором, окрашивали поликлональными антисыворотками против TIM-1. (B, D – F и I) Трансдукция вирионов VSV, псевдотипированных с помощью EBOV GP или LASV GPC, в клетки, экспрессирующие членов семейства TIM (B), химеры домена IgV (D), цитоплазматический переключатель хвоста (E) или делеционные (F) мутанты или TIM с привязкой к GPI (I). Схемы WT и химерных белков показаны ниже соответствующих данных трансдукции. Домены IgV представлены полумесяцем, MLD представлены прямоугольником, а трансмембранные/цитоплазматические домены представлены треугольником.(C, G и H) Поверхностная экспрессия химер домена IgV (C), цитоплазматических делеционных мутантов TIM (G) и TIM, заякоренных с GPI (H), в клетках HEK 293T через 48 часов после трансфекции. (C) Химеры IgV были обнаружены с использованием поликлональных антисывороток, специфичных к белкам дикого типа, из которых были получены либо домен IgV, либо MLD. (G) Сравнение экспрессии членов семейства TIM (закрашенная серая линия) и цитоплазматических делеций хвоста (сплошная черная линия). (H) Поверхностная экспрессия WT и GPI-заякоренных членов семейства TIM с (пунктирная черная линия) или без (сплошная черная линия) обработкой PI-PLC.Заштрихованная серая линия представляет фоновое связывание антисыворотки. Трансдукции нормализовали к трансдукции TIM-1 дикого типа (D и E) или эквивалентного TIM дикого типа (F и I). Клетки трансдуцировали с MOI 0,03 (B, D, F и I) или 0,01 (E) на основе титров, определенных в клетках пустого вектора HEK 293T. Показанные данные представляют собой средние значения ± стандартные ошибки среднего (SEM) не менее трех повторов. Для панелей от D до F и панели I значимость была рассчитана с использованием теста t для одной выборки по сравнению со 100 (нормализованное значение для трансдукции EBOV в клетках, трансфицированных WT (**, P <0. 001; *, P < 0,01).

                                    (v) Химеры αDG.

                                    MLD TIM-1 был заменен на мышиный альфа-дистрогилкан (αDG) для получения αDG-MLD. кДНК мышиного дистрогликана (DAG1) была любезно предоставлена ​​Кевином Кэмпбеллом (Университет Айовы). Последовательности, кодирующие MLD мышиного αDG (315-463 а.о.) и трансмембранный и цитоплазматический домены TIM-1 человека (295-364 а.о.), амплифицировали с помощью ПЦР, сливали с помощью дополнительной ПЦР-амплификации с использованием перекрывающегося набора праймеров и клонировали. в вектор экспрессии, содержащий последовательности сигнального пептида и домена IgV TIM-1.Процентную идентичность между MLD αDG (от 314 до 483 аминокислот) и TIM-1 (от 128 до 294 аминокислот) определяли путем выравнивания аминокислотных последовательностей CLUSTAL W с использованием программного обеспечения MegAlign (DNASTAR).

                                    Конструкция, содержащая как MLD TIM-1, так и αDG, называемая 2×MLD, была создана путем вставки последовательностей TIM-1 IgV и αDG MLD из αDG-MLD выше MLD и цитоплазматических доменов TIM-1. Таким образом, MLD αDG находится между IgV и MLD TIM-1.

                                    (vi) Химера AnxV-αDG-GPI.

                                    Плазмида, кодирующая аннексин V человека (AnxV), была любезно предоставлена ​​Симусом Мартином (Тринити-колледж, Дублин, Ирландия).Последовательности, кодирующие AnxV и MLD мышиного αDG (314–485 а.к.), амплифицировали с помощью ПЦР, соединяли второй амплификацией ПЦР с использованием праймеров с выступающими сайтами рестрикции BglII и SbfI и лигировали в вектор mTIM-4 GPI между иммуноглобулином κ -лидерная последовательность цепи и последовательность DAF, заменяющая кодирующую последовательность mTIM-4.

                                    (vii) химера PRR.

                                    h2PRR был создан с использованием In-Fusion HD (Clontech) в соответствии с протоколом производителя. Два фрагмента, кодирующие аминокислоты с 242 по 300 и с 239 по 321 богатой пролином области (PRR) из оболочечного гена амфотропного вируса лейкемии мышей 4070A (MuLV), любезно предоставленные Полом Маккреем (Университет Айовы), амплифицировали с помощью ПЦР. Эти фрагменты были вставлены тандемно между последовательностями, кодирующими аминокислоты 129 и 295 TIM-1 дикого типа, для создания химеры, в которой MLD TIM-1 заменен двумя копиями PRR из MuLV env.

                                    (viii) Химеры RAGE.

                                    h2RAGE был получен с помощью первой ПЦР, амплифицирующей IgV-домен TIM-1 (аминокислоты от 1 до 125) и последовательности ниже человеческого рецептора конечных продуктов усиленного гликирования (RAGE) IgV (аминокислоты от 119 до 404) (Origene). Эти аминокислотные остатки RAGE составляют два IgC2, трансмембранный и цитоплазматический домены белка.Эти последовательности TIM-1 и RAGE соединяли с помощью второй амплификации ПЦР и лигировали в вектор ниже промотора CMV.

                                    h2RAGEh2cyto был создан с помощью In-Fusion HD. Вектор h2RAGE и эктодомен RAGE амплифицировали с помощью ПЦР и соединяли в соответствии с протоколом производителя. Полученная конструкция содержала домен IgV TIM-1 (от 1 до 124 а.о.), внеклеточные домены RAGE без домена IgV RAGE (от 119 до 338 а. о.) и трансмембранный и цитоплазматический домены TIM-1 (от 295 до 364 а.о.). ).

                                    Муцин h2RAGE был сконструирован аналогично h2RAGE, в результате чего часть MLD TIM-1 и целые трансмембранные и цитоплазматические домены TIM-1 (с 209 по 364 а.о.) были вставлены ниже последовательности стебля RAGE (с 119 по 335 а.о.) h2Ярость.

                                    Анализ связывания FITC-псевдовириона.

                                    Через 48 часов после трансфекции TIM-1, пустым вектором или мутантами MLD TIM-1 клетки HEK 293T инкубировали с мечеными FITC псевдовирионами EBOV GP (MOI 2,25, как определено по титру на клетках Vero) в течение 1 часа на лед.Клетки трижды промывали 1× PBS плюс 5% FBS, и клеточную флуоресценцию либо определяли сразу с помощью проточной цитометрии, либо клетки дополнительно окрашивали AKG7, как описано выше, перед проточной цитометрией для анализа экспрессии TIM-1 на клеточной поверхности. .

                                    Иммуноферментный анализ (ИФА).

                                    Растворимый TIM-1 был получен в клетках HEK 293T путем трансфекции экспрессионным вектором, описанным ранее (5), в котором трансмембранный и цитоплазматический домены TIM-1 заменены меткой гемагглютинина (HA). Супернатант собирали через 48 ч после трансфекции. Мутанты TIM-1 MLD были получены аналогичным образом после субклонирования мутантов, описанных выше, в растворимый вектор экспрессии TIM-1 дикого типа. Белки разделяли с помощью SDS-PAGE и переносили на нитроцеллюлозные мембраны (Вестерн-блот) или серийные разведения белков наносили непосредственно на мембраны и протягивали через вакуум с помощью аппарата для дот-блоттинга (дот-блот). Нитроцеллюлозу блокировали в течение 2 ч в 1× PBS с 10% обезжиренного сухого молока и затем инкубировали в течение 2 ч с анти-HA-антисывороткой (1:4000) в 1× PBS с 10% молоком и 0.15% Tween 20. Экспрессию белка визуализировали с помощью LI-CORE Odyssey CLx и количественно определяли путем измерения общего флуоресцентного сигнала и вычитания фонового сигнала с помощью Image Studio (LI-CORE). Уровни белка нормализовали, сначала нанеся флуоресцентные данные из дот-блотов в зависимости от коэффициента разбавления для каждого мутанта TIM-1 и WT TIM-1. На график рассеяния для каждой конструкции накладывали линию, а точки данных вне линейного диапазона из-за насыщения нитроцеллюлозы удаляли. Наклон этих линий затем использовали для нормализации относительных количеств супернатанта для использования для каждого мутанта и дикого типа TIM-1.Надлежащая нормализация разведений была подтверждена вестерн-блоттингом.

                                    Планшеты Nunc MaxiSorp ELISA предварительно покрывали в течение ночи липосомами PtdSer (50 мкМ), разведенными в 1× TBS+ (150 мМ NaCl, 25 мМ Трис, 10 мМ CaCl 2 [pH 7,2]). Липосомы PtdSer были созданы, как описано ранее (5). Супернатанты разводили в 1× TBS+ для нормализации количества белка TIM-1, как описано выше. Планшеты блокировали в течение 2 ч при 4°C 1× TBS+ с 2% бычьим сывороточным альбумином, инкубировали с серийными разведениями супернатантов в течение 2 ч, зондировали кроличьей поликлональной анти-HA-антисывороткой (Sigma) в течение 1 ч и конъюгированной с пероксидазой хрена. вторичные антикроличьи антитела в течение 1 часа и проявляли с помощью 1-Step Ultra TMB-ELISA (Thermo).Планшеты тщательно промывали между этапами 1× TBS+. Поглощение считывали при 450 нм.

                                    РЕЗУЛЬТАТЫ

                                    Члены семьи TIM улучшают запись EBOV.

                                    Мы и другие исследователи недавно идентифицировали TIM-1 и TIM-4 как PVEER (2,–5). Домены IgV членов семейства TIM имеют общий консервативный PtdSer-связывающий карман, ответственный за взаимодействие с PtdSer на поверхности вириона и необходимый для TIM-1-опосредованного усиления проникновения вируса. Однако, несмотря на наличие PtdSer-связывающего кармана, TIM-3 не действует эффективно как PVEER (2,-4).В этих исследованиях мы стремились определить структурную основу высокой эффективности PVEER TIM-1 по сравнению с TIM-3. Кроме того, мы хотели проверить, может ли мышиный гомолог TIM-1 человека (mTIM-1), который имеет многие из тех же структурных особенностей, также опосредовать трансдукцию оболочечного вируса.

                                    Эффективность PVEER была количественно определена путем измерения трансдукции псевдотипированного вируса везикулярного стоматита (VSV), который экспрессировал EGFP в качестве репортерной молекулы вместо нативного G. ) запись наиболее сильно усиливается TIM-1, тогда как запись псевдотипированного VSV LASV GPC (псевдовирионы LASV) не зависит от экспрессии TIM-1 (2, 4, 5).Таким образом, запасы этих двух псевдовирионов использовали для идентификации последовательностей TIM, необходимых для трансдукции вируса. Был использован EBOV GP, лишенный муцинового домена GP1, поскольку этот белок придает тот же тропизм, что и полноразмерный GP вируса Эбола, и продуцирует более высокие титры псевдовируса (15, 21, 22). Однако проникновение, опосредованное полноразмерным GP вируса Эбола, усиливается таким же образом, как и GP с удаленным доменом муцина, за счет экспрессии TIM-1 (2, 4, 5).

                                    Клетки HEK 293T, транзиторно экспрессирующие TIM-1, mTIM-1, TIM-3 или TIM-4 на сопоставимых и устойчивых уровнях на клеточной поверхности (), были трансдуцированы псевдовирионами EBOV и LASV.Для сравнения также трансдуцировали клетки, трансфицированные пустым вектором. Подобно TIM-1 и TIM-4, mTIM-1 увеличивал трансдукцию EBOV, но TIM-3 лишь немного усиливал трансдукцию (<2 раза) (). В соответствии с предыдущими выводами (2, 4, 5), белки TIM не усиливают проникновение LASV. Таким образом, запись псевдовириона LASV использовалась во всех этих исследованиях в качестве контроля.

                                    Домены IgV из всех протестированных TIM опосредуют вход.

                                    Способность других TIM усиливать проникновение EBOV более эффективно, чем TIM-3, может быть связана с уникальными аспектами их доменов IgV или более высокой аффинностью к PtdSer (12).Это было проверено путем замены домена IgV TIM-1 или TIM-4 доменом mTIM-1 (m1h2 и m1h5) или TIM-3 (h4h2 и h4h5). Кроме того, домен IgV TIM-3 был заменен доменом TIM-1 (h2h4). Все химерные белки TIM обильно экспрессировались на поверхности трансфицированных клеток HEK 293T (10). Химеры, содержащие домен IgV либо mTIM-1, либо TIM-3, усиливали трансдукцию псевдовирионов EBOV, сходную с TIM-1 дикого типа (10). Однако химера h2h4, содержащая IgV-домен TIM-1 и остальные домены из TIM-3, была такой же дефицитной, как TIM-3 дикого типа.Эти результаты показали, что домен IgV TIM-3 не отвечает за его сниженную эффективность в усилении трансдукции EBOV, а другие домены.

                                    Цитоплазматические и трансмембранные домены семейства TIM не являются существенными для трансдукции EBOV.

                                    Благодаря сохранению MLD, трансмембранного домена и цитоплазматического хвоста TIM-4 или TIM-1 в наших функциональных химерах TIM-3 мы оценили вклад этих доменов в эффективность трансдукции. TIM-1 (18), TIM-3 (23) и mTIM-1 (24, 25) имеют цитоплазматические хвосты, которые после фосфорилирования тирозина могут усиливать передачу клеточных сигналов, что может способствовать трансдукции.Однако цитоплазматический хвост TIM-4 не имеет известной сигнальной функции (20). Чтобы определить потенциальную роль передачи сигналов цитоплазматического домена во время трансдукции EBOV, мы протестировали химеры, в которых цитоплазматический хвост TIM-1 был заменен хвостом mTIM-1 (h2m1cyto), TIM-3 (h2h4cyto) или TIM-4 (h2h5cyto). ). Трансфекция химерных белков TIM приводила к эквивалентной эффективности трансдукции (12), указывая либо на отсутствие роли цитоплазматического хвоста, либо на то, что механизм передачи сигналов является общим для цитоплазматических хвостов белков TIM.

                                    Для дальнейшего изучения важности доменов цитоплазматического хвоста в трансдукции EBOV мы протестировали мутанты TIM, чьи цитоплазматические хвосты были удалены. Мутанты TIM-3 и TIM-4 (h4Δcyto и h5Δcyto) поддерживали трансдукцию аналогично белкам дикого типа (1), в то время как делеция цитоплазматических хвостов TIM-1 или mTIM-1 (h2Δcyto или m1Δcyto соответственно) приводила к примерно на 60 или 70% меньше. Снижение трансдукции может быть объяснено сниженной экспрессией, и действительно, h2Δcyto и m1Δcyto экспрессировались на меньшем количестве клеток по сравнению с WT (10).Кроме того, цитоплазматические или трансмембранные домены TIM-1 и mTIM-1 могут способствовать соответствующей локализации этих белков на плазматической мембране. Чтобы проверить эту возможность, были созданы мутанты семейства TIM, в которых эктодомены каждого TIM, состоящие из IgV и MLD, были прикреплены к плазматической мембране с помощью якоря GPI, что было подтверждено обработкой PI-PLC (14). В отличие от мутантов с цитоплазматической делецией, не было никаких существенных различий в экспрессии () или трансдукции () любого из GPI-заякоренных TIM по сравнению с их аналогами дикого типа. Эти результаты исключают роль трансмембранного домена в трансдукции.

                                    Делеции в TIM-1 MLD снижают связывание и трансдукцию вируса.

                                    На основании результатов, представленных выше, различия в эффективности PVEER, наблюдаемые между TIM-3 и другими членами семейства, не могут быть объяснены IgV, трансмембранными или цитоплазматическими доменами, что приводит к сосредоточению внимания на оставшемся домене этих белков. , МЛД. MLD членов семейства TIM различаются по нескольким параметрам: аминокислотная последовательность, степень O- и N-связанного гликозилирования и общая длина.Отмечая, что TIM-3 имеет значительно более короткую MLD (~66 а.о.), чем TIM-1, mTIM-1 и TIM-4 (~167, 107 и 174 а.о. соответственно), и что значительная делеция в MLD TIM-1 ингибирует поглощение вируса (2), мы предположили, что длина MLD может быть важна для функции PVEER. Например, может потребоваться минимальная длина MLD, чтобы проецировать домен IgV достаточно далеко от поверхности клетки для взаимодействия с вирусом. Чтобы проверить роль длины MLD, была создана серия мутантов MLD TIM-1 путем удаления различных длин в высоко повторяющейся области MLD.Эти мутанты сохранили либо аминоконцевую (N), среднюю (М), либо карбоксиконцевую (С) последовательности этой области, и длина MLD указана в названии каждого мутанта MLD. Аминокислотные последовательности мутантов TIM-1 MLD выровнены с TIM-1 в . В дополнение к делециям некоторые мутанты имели точечные мутации, вызванные введением сайтов рестрикции.

                                    Первоначальные исследования с этой панелью мутантов были проведены для определения влияния уменьшения длины MLD на связывание вируса.Мы количественно оценили связывание псевдовириона EBOV, меченного FITC, с клетками, трансфицированными WT TIM-1, селекцией мутантов с делецией MLD или пустым вектором. Мутанты, содержащие большие делеции MLD, такие как C66, не показали заметного увеличения связывания вириона по сравнению с клетками, экспрессирующими пустой вектор (10). Однако по мере удлинения MLD связывание вириона увеличивалось, достигая уровней, сравнимых с WT, что позволяет предположить, что длина MLD важна для TIM-1 для связывания EBOV.

                                    Чтобы определить, связывают ли клетки, экспрессирующие наибольшее количество этих конструкций TIM, наибольшее количество вируса, мы связывали вирус с клетками HEK 293T, трансфицированными мутантами MLD, и оценивали клетки на предмет экспрессии TIM-1 с использованием специфичного для MLD MAb AKG7. и связывание FITC-меченого вируса.За исключением C66, мутанты длины MLD были обнаружены на уровне дикого типа или близком к нему (2). MAb с доменом IgV, ARD5, обнаруживал уровни поверхностно-экспрессируемого C66, эквивалентные таковым у WT (данные не показаны), предполагая, что обнаружение этого мутанта с помощью AKG7 было субоптимальным, возможно, из-за стерических затруднений со стороны домена IgV, который намного ближе к Эпитоп AKG7 у этого мутанта (26). Как видно из контурных графиков, показанных на , связывание вируса было более устойчивым с клетками, экспрессирующими более высокие уровни TIM-1. Количественная оценка связывания иллюстрирует сильную корреляцию между связыванием вируса и длиной MLD. Чтобы определить, важна ли длина MLD TIM-1 только для связывания PtdSer, ассоциированного с вирионом, в контексте клеточной поверхности, или растворимые конструкции TIM-1 с укороченными MLD также связываются с пониженной эффективностью, мы оценили способность растворимых TIM различной длины. Мутанты -1 для связывания липосом PtdSer в ELISA. Серийные разведения нормализованных количеств растворимых HA-меченых MLD мутантных белков TIM, как показано с помощью иммуноблота (1), инкубировали с планшетами для ELISA, предварительно покрытыми липосомами PtdSer.Все мутанты длины MLD связывались с липосомами PtdSer аналогично WT (10). Мы подтвердили эти исследования с псевдовирионами EBOV и обнаружили, что связывание является сходным для растворимых мутантов MLD, содержащих короткие или длинные MLD (данные не показаны). Ни мутанты WT TIM-1, ни MLD не связывались только с чашками или чашками, покрытыми фосфатидилхолином (данные не показаны). Таким образом, в то время как сниженное связывание вирионов коротких мутантов MLD наблюдалось, когда TIM был ассоциирован с мембраной, этого не наблюдалось с растворимыми мутантными белками.

                                    Чтобы определить, коррелирует ли уменьшение связывания вируса со сниженной способностью усиливать проникновение вируса, мы оценили трансдукцию, опосредованную всеми 18 делеционными мутантами MLD. Усиление трансдукции EBOV коррелировало с увеличением длины MLD, эффект стабилизировался на уровнях трансдукции WT TIM-1 (до ). Подобного плато не наблюдалось в исследованиях связывания, вероятно, из-за нашей способности обнаруживать связывание нескольких вирионов с одной и той же клеткой с помощью проточной цитометрии, но не трансдукции нескольких вирионов в одну клетку-мишень за счет увеличения экспрессии EGFP.Примечательно, что уровни функции PVEER дикого типа наблюдались независимо от того, присутствовали ли амино-, карбокси-концевые или комбинации обеих делеций, при условии, что общая длина MLD составляла ~120 остатков или больше. Диаграмма рассеяния данных связывания и данных трансдукции показала положительную корреляцию между способностью мутантов TIM-1 связываться с псевдовирионами EBOV и усиливать трансдукцию ().

                                    Трансдукция EBOV коррелирует с длиной MLD TIM-1. (A-C) Трансдукция клеток HEK 293T, мутантных MLD или WT TIM-1, трансфицированных вирусом VSV, псевдотипированным с помощью EBOV GP (A и B) или LASV GPC (C).Трансдукция относительно WT TIM-1 показана в виде гистограммы (A) или нанесена на график в зависимости от длины муцина (B и C). Линии тренда были подобраны для панелей B и C с помощью нелинейной регрессии связывания с одним сайтом с помощью Hill Slope и линейной регрессии, соответственно, с использованием Prism (GraphPad). Клетки трансдуцировали с MOI 0,01 при титровании в клетках HEK 293T с пустым вектором. (D) Связывание вируса (MFI) на графике в зависимости от данных процента трансдукции. (E) Трансдукция псевдовирионов в клетки, экспрессирующие один мутант MLD (●) или различные смеси мутантов MLD (○).Трансдукция для смешанных популяций MLD построена с использованием средней длины MLD трансфицированных мутантов MLD. Данные трансдукции для панелей A, B и D нормализованы к экспрессии TIM-1, оцененной по поверхностному окрашиванию (% TIM-положительных клеток), и все данные представляют собой средние значения ± SEM по крайней мере для трех повторов. Для панели А значимость была рассчитана с использованием одновыборочного сравнения t теста со 100 (**, P <0,001).

                                    Мы предположили, что экспрессия мутантов MLD разной длины в одной и той же клетке может иметь синергетический эффект из-за того, что мутанты с более длинными MLD передают вирус мутантам с более короткими MLD, тем самым повышая связывающую способность более коротких мутантов.Чтобы проверить эту возможность, клетки HEK 293T трансфицировали эквивалентными общими количествами ДНК, содержащей различные группы мутантов C66, C84, C101 и C118 MLD. Эффективность трансдукции в смешанные или одиночные мутанты MLD, WT или популяции пустых векторов строили в зависимости от средней длины MLD (1). Если бы синергия имела место, мы ожидали бы, что трансдукция в смешанные популяции MLD будет эквивалентна трансдукции в клетки, экспрессирующие только самый длинный мутант MLD из этой группы. Однако мы обнаружили, что трансдукция смешанных популяций была эквивалентна средней трансдукции трансфицированных длин MLD, что свидетельствует об отсутствии синергизма.

                                    Конкретная последовательность MLD не имеет значения.

                                    Хотя для усиления трансдукции TIM-1 требуется MLD достаточной длины, мы хотели определить, требуются ли определенные последовательности внутри MLD в дополнение к минимальной длине. Наш первый подход к решению этого вопроса состоял в том, чтобы заменить 167 а.о., которые составляют MLD TIM-1, на 157 а.о. неродственного MLD из мышиного альфа-дистрогликана (αDG) для создания химеры αDG-MLD. Хотя обе последовательности MLD богаты треонинами, серинами и пролинами, их всего 19.9% идентичности между двумя последовательностями (). Экспрессия αDG-MLD была сравнима с экспрессией TIM-1 дикого типа (данные не показаны) и опосредовала уровни трансдукции псевдовириона EBOV дикого типа (). Эти результаты свидетельствуют о том, что специфическая последовательность MLD не требуется.

                                    Домены TIM-1, необходимые для активности PVEER, могут быть функционально заменены. (A) Аминокислотные последовательности переключающих химер TIM-1 MLD выровнены с MLD TIM-1 (128–298 а. о.) (CLUSTAL V). Отмечены концевые аминокислоты выровненных последовательностей.(B, D и F) Трансдукция трансфицированных клеток HEK 293T вирионами VSV, псевдотипированными вирусным гликопротеином, как указано на каждой панели. Схемы химер показаны ниже данных трансдукции (B и D) или рядом с данными экспрессии (E). (B) Трансдукция клеток, экспрессирующих химеры TIM/αDG. MLD мышиного αDG заменялся или добавлялся в дополнение к TIM-1 MLD, генерировал конструкции αDG-MLD или 2×MLD соответственно. (C) Репрезентативные гистограммы поверхностной экспрессии химер TIM-1/PRR и TIM-1/RAGE (черная линия) и WT TIM-1 (закрашенная серая линия), определенная с использованием ARD5.(D) Трансдукция клеток, экспрессирующих химеры TIM-1/PRR и TIM-1/RAGE, по сравнению с трансдукцией в клетки, экспрессирующие эквивалентные количества домена TIM-1 IgV дикого типа. Данные трансдукции пустого вектора сравнивают с теми же данными трансдукции TIM-1, что и для h2RAGE и h2RAGEh2cyto, поскольку они имели самые низкие уровни экспрессии. (E) Экспрессия WT TIM-1 и AnxV-αDG-GPI, обнаруженная с использованием TIM-1 IgV и MLD-специфических MAbs ARD5 и антисывороток AKG7 и AnxV (черная линия) по сравнению с фоновым связыванием IgG (закрашенный серый).(F) Трансдукция клеток, экспрессирующих либо TIM-1, либо AnxV-αDG-GPI. Клетки трансдуцировали с MOI 0,02 (EBOV и LASV на панелях B и F) или 0,03 (EBOV и LASV на панелях D и все другие вирусы на панелях F) при титровании в клетках HEK 293T, трансфицированных пустым вектором. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего по крайней мере для трех повторов. Значимость была рассчитана с использованием двухвыборочного сравнения t с пустым вектором (B) или одновыборочного сравнения t с 100 (D) (**, P <0.001).

                                    Хотя мы обнаружили, что усиление трансдукции стабилизируется при длине MLD ~120 а.о., мы также оценили, будет ли более эффективен более длинный MLD. Вставка TIM-1 MLD ниже αDG MLD, присутствующей в химере αDG-MLD, привела к новой химере TIM-1 с длиной MLD примерно в два раза больше, чем у WT TIM-1, 317 а. о. (2×MLD). Наш мутант 2×MLD опосредовал трансдукцию псевдовирионов EBOV, эквивалентную WT TIM-1 ().

                                    Структурные требования MLD.

                                    Считается, что белковые последовательности, содержащие высокую частоту O-связанных гликозилирований и пролинов, такие как MLD, образуют длинные вытянутые конформации спирали с бета-витком (27).Поэтому мы предположили, что роль MLD в PVEER заключается в обеспечении расширенной структуры стебля, которая позиционирует домен IgV TIM-1 на достаточном расстоянии от поверхности клетки-хозяина для взаимодействия с вирионами. Чтобы проверить эту гипотезу, мы заменили MLD TIM-1 на хорошо изученную область SU вируса лейкемии мышей (MuLV), богатую пролином (PRR), которая не считается MLD, но действует как гибкий шарнир (28). ) и, вероятно, образует спираль бета-поворота (29). Поскольку PRR составляет только половину минимальной длины, необходимой для MLD PVEER, два тандемных повтора PRR «голова к хвосту», состоящих всего из 142 а.о., были заменены на MLD TIM-1 в химере h2PRR. Эта химера h2PRR также, по прогнозам, содержит 35 O-связанных гликозилирований, обнаруженных сервером NetOGlyc 4.0, что примерно вдвое меньше, чем предсказано 67 для WT TIM-1 (30). Экспрессия этой химеры на поверхности клеток была значительно ниже, чем у WT TIM-1. Для исследования трансдукции с использованием клеток с сопоставимой поверхностной экспрессией h2PRR и WT TIM-1 количество трансфицированной ДНК TIM-1 уменьшали до тех пор, пока поверхностная экспрессия домена TIM-1 IgV, обнаруженная с помощью ARD5, не сравнялась с экспрессией ДНК TIM-1. h2PRR-трансфицированные клетки ().После компенсации экспрессии h2PRR поддерживал трансдукцию, аналогичную TIM-1 дикого типа.

                                    Затем мы попытались определить, сможет ли более структурированная ножка эквивалентной или большей длины функционально заменить TIM-1 MLD. Ранее мы показали, что другой PtdSer-связывающий белок, RAGE, не усиливает проникновение вируса (5). Как и TIM-1, RAGE содержит N-концевой домен IgV, но стеблевая область RAGE состоит из двух структурированных Ig-подобных доменов C2, каждый из которых состоит из более чем 90 а. о. (31).Мы создали несколько химер TIM-1/RAGE и сравнили эффективность трансдукции с эффективностью WT TIM-1. Подобно h2PRR, конструкции TIM-1/RAGE имели сниженную экспрессию по сравнению с WT TIM-1, и для этих мутантов мы компенсировали аналогичным образом (1). Для нашей исходной химеры TIM/RAGE мы заменили IgV-домен RAGE доменом TIM-1 (h2RAGE). Присутствие домена IgV TIM-1 на остатке RAGE минимально усиливало проникновение вируса по сравнению с пустым вектором, что приводило к уровням трансдукции TIM-1 дикого типа примерно на 25% (2).Замена происходящих от RAGE трансмембранных и цитоплазматических доменов химеры h2RAGE доменами TIM-1 (h2RAGEh2cyto) не приводила к дальнейшему усилению трансдукции. Хотя мы обнаружили, что экспрессия RAGE не усиливала трансдукцию выше пустого вектора (5), минимальное увеличение с помощью h2RAGE и h2RAGEh2cyto значительно превышало фон, как было определено с помощью теста t с двумя образцами ( P <0,01), что свидетельствует о наличии IgV. домен TIM-1 в контексте этих химер придавал некоторую активность PVEER.Что еще более важно, вставка 86 а.о. из MLD TIM-1 между RAGE Ig-подобными доменами C2 и трансмембранным доменом TIM-1 h2RAGEh2cyto (h2RAGEmucin) восстанавливала трансдукцию до уровней TIM-1 дикого типа. Окончательная химера, в которой домен IgV TIM-1 был заменен доменами RAGE IgV и Ig-подобным доменом C2, сохраняя при этом муциноподобный, трансмембранный и цитоплазматический домены TIM-1, была недостаточной для усиления проникновения EBOV (данные не показано), что согласуется с неспособностью WT RAGE усиливать трансдукцию.

                                    Имитация функций доменов TIM-1 создает искусственный PVEER.

                                    В этом и предыдущих исследованиях мы индивидуально заменили домен IgV (5), MLD () и цитоплазматические домены TIM-1 () и сохранили функциональность PVEER. Вместе мы интерпретируем эти результаты, чтобы указать, что функция PVEER происходит от комбинации PtdSer-связывающего домена, связанного с мембраной клетки-хозяина с помощью MLD, состоящей как минимум из 120 остатков. Если эта интерпретация верна, то должна быть возможность создать химеру PVEER без какой-либо последовательности TIM-1.Мы создали AnxV-αDG-GPI, присоединив аннексин V, PtdSer-связывающий белок, к GPI-заякоренному MLD αDG. Эта химера была обнаружена с помощью антитела, специфичного к аннексину V, но не специфичного к TIM-1 MAb (1), и усиливала проникновение псевдовириона EBOV так же эффективно, как TIM-1 дикого типа (1). Кроме того, как и TIM-1, AnxV-αDG-GPI усиливает проникновение псевдовирионов VSV, несущих env Sindbis 2.2 1L1L (SINV) (32,–34), GP вируса Росс-Ривер (RRV), env вируса Чикунгунья (CHIKV) или бакуловируса. Autographa californica нуклеополиэдровирус GP64.

                                    ОБСУЖДЕНИЕ

                                    TIM-1 и TIM-4, наряду с другими PVEER, такими как Gas6/Axl, недавно были идентифицированы как широкие усилители проникновения вируса посредством взаимодействия с PtdSer на вирусной оболочке (2,–4,8) . Мы и другие обнаружили, что мутации, которые изменяют связывающий карман TIM-1 IgV PtdSer, снижают связывание и трансдукцию вириона, предоставляя убедительные доказательства того, что домен IgV имеет решающее значение для функции PVEER (2, 3, 5). Однако мы подтверждаем здесь, что TIM-3 плохо усиливает проникновение вируса, как обнаружили другие (2,–4), несмотря на сохранение PtdSer-связывающей активности (12).В настоящем исследовании мы расширили это понимание, охарактеризовав особенности других доменов TIM-1, необходимых для усиления проникновения вируса, и определив те, которые объясняют различия в эффективности между членами семейства TIM. Благодаря обширному анализу химерных белков и делеционных мутантов мы сделали несколько выводов относительно характеристик доменов PVEER. Во-первых, ни цитоплазматический хвост, ни трансмембранный домен не нужны для функции PVEER, при условии, что белок все еще связан с мембраной.Во-вторых, для функции PVEER требуется MLD достаточной длины, а дополнительная длина свыше ∼120 а.о. является лишней. В-третьих, специфическая последовательность MLD не требуется, и последовательности, богатые пролином/серином/треонином из других белков, могут заменить последовательность TIM-1 MLD. Однако некоторые структурные ограничения в этой области очевидны, о чем свидетельствует неспособность Ig-подобных доменов C2, содержащих одинаковое количество остатков, заменить TIM-1 MLD. Наконец, искусственно созданный PVEER, который имитирует функциональные домены TIM-1, опосредует трансдукцию так же эффективно, как TIM-1 дикого типа, хотя в нем отсутствуют последовательности любого члена семейства TIM.

                                    Механизм TIM-опосредованного усиления проникновения вируса и захвата апоптотических телец остается неизвестным. Цитоплазматические хвосты TIM-1 и TIM-3 имеют важное значение в Т-клетках для передачи сигналов через пути, связанные с активацией комплекса передачи сигналов Т-клеточного рецептора (18, 23, -25, 35). Однако не сообщалось, что эти члены семейства TIM участвуют в поглощении апоптотических телец или вирусов Т-клетками, и эти сигнальные события могут быть необходимы для других специфических функций Т-клеток.В соответствии с этой возможностью, мы и другие продемонстрировали, что внутриклеточные домены членов семейства TIM незаменимы для усиления проникновения вируса (3). Однако мы не можем исключить, что эти домены вносят свой вклад во время эндогенной экспрессии. Кроме того, наши наблюдения о том, что домен TIM-1 IgV может быть заменен аннексином V (5), а MLD — доменом αDG или Pro/Ser/Thr-богатыми последовательностями из MuLV Env, предполагают, что специфические, прямые, внутриклеточные и внеклеточные белок-белковые взаимодействия несущественны для функции PVEER семейства TIM.С одной стороны, наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями, которые предполагают, что члены семейства TIM усиливают поглощение апоптотических телец или вируса, функционируя в качестве факторов прикрепления (2, 3, 20). Однако такая модель проникновения вириона должна учитывать способность PVEER стимулировать быстрое поглощение вирусов, лишенных гликопротеина (2, 5). Если PVEER непосредственно не опосредуют интернализацию вируса в эндосомы, дополнительные рецепторы или кофакторы, ответственные за интернализацию, также должны связываться с оболочкой вириона.С другой стороны, связывание нескольких PVEER может приводить к локальным изменениям структуры плазматической мембраны, таким как искривление мембраны, что в ответ вызывает интернализацию груза.

                                    Члены семейства рецепторных киназ ТАМ (Tyro3, ​​Axl и Mer) представляют собой PVEER, которые в комплексе с Gas6 усиливают связывание вирионов с клетками (3, 8). В отличие от белков TIM, рецепторы TAM нуждаются в передаче сигналов через свои цитоплазматические домены для надежного усиления вирусной инфекции (3, 8, 36, 37).Однако эта передача сигналов ингибирует врожденные иммунные ответы и, как было показано, напрямую не усиливает проникновение (36). Это подтверждается способностью Axl, мертвого киназой, усиливать интернализацию вируса, эквивалентную WT Axl (3, 36). Таким образом, хотя сигнальные события киназ ТАМ вносят значительный вклад в инфекцию, передача сигналов, вероятно, не влияет на интернализацию вируса и, следовательно, вряд ли способствует функции PVEER, что согласуется с нашими выводами для TIM-1.

                                    Можно предположить, что экспрессия TIM-1 в организме хозяина имеет как полезные, так и вредные эффекты; хотя TIM-1 важен для функций иммунной регуляции и уничтожения умирающих и апоптотических клеток, он также усиливает проникновение вируса. Таким образом, неудивительно, что в человеческих популяциях обнаружены высокая изменчивость последовательностей и доказательства положительного отбора в рамках TIM-1 MLD (38). Имеются также некоторые свидетельства изменчивости у обезьян Старого Света (39). В обоих случаях эта вариация обусловлена ​​аминокислотными заменами или инсерциями/делециями в нескольких сайтах внутри MLD. Например, у людей частый полиморфизм TIM-1 MLD, 157ins/delMTTTVP, приводит к вставке или делеции 6 аминокислот. Однако мы и другие исследователи (2) обнаружили, что для значительного воздействия на поглощение TIM-1 вируса требуются более крупные делеции последовательности MLD, чем это наблюдается в естественных вариациях.Большие делеции TIM-1 MLD могут иметь серьезные последствия для иммунной функции. У мышей делеции в TIM-1 MLD приводят к дефектам продукции IL-10 В-клетками и последующему развитию аутоиммунных нарушений (40). Это связано с неспособностью В-клеток взаимодействовать с апоптозными клетками и индуцировать секрецию ИЛ-10 (41). Даже меньший полиморфизм 157ins/delMTTTVP, обнаруженный у людей, был связан с аутоиммунными проблемами атопии, экземы и астмы (38, 42). Однако связь между этими заболеваниями и полиморфизмом TIM остается спорной, возможно, из-за очень скромных изменений длины MLD.В целом эти исследования показывают, что MLD достаточной длины необходим для эффероцитоза и поддержания гомеостаза. Ожидается, что значительные делеции для уклонения от вирусов будут иметь место за счет значительных пагубных последствий. Интересно, однако, что TIM-1 не функционирует у многих обезьян Нового Света (39), что указывает либо на то, что компенсаторные изменения могут преодолеть эти эффекты, либо на то, что функция TIM-1 может различаться у некоторых видов.

                                    Хотя определенные последовательности MLD не являются существенными для усиления трансдукции, очевидны некоторые ограничения.Отметив, что наши делеционные мутации MLD охватывают около трех четвертей остатков MLD в области, которая содержит повторяющиеся последовательности, богатые треонином, серином и пролином, и предсказанные сайты O-связанного гликозилирования, мы решили сконструировать химеры, используя два гликопротеина, в которых отсутствует последовательности гомологичны TIM-1, но обогащены сходными остатками, а третий белок, RAGE, имеет более конденсированную структуру (2). Хотя домены IgC-2 RAGE из 225 остатков длиннее, чем MLD TIM-1, эти последовательности складываются в жесткие и относительно компактные бета-бочонки, стабилизированные двумя дисульфидными связями (31, 43).Напротив, хотя структуры MLD TIM-1 и αDG и PRR MuLV не были решены, считается, что эти домены имеют расширенную структуру. Интересно, что недавно было показано, что подобные домены с помощью анализа рассеяния рентгеновских лучей под малыми углами, кругового дихромизма и ядерного магнитного резонанса (ЯМР) складываются в несколько конформаций, между которыми они легко взаимопревращаются, создавая внутренний беспорядок, который ускользает от определения структуры с помощью обычного рентгеновского излучения. кристаллография (44). В органических растворителях они сворачиваются в вытянутые спирали полипролина II, в которых все остатки пролина транс , но в воде цис изомеризация одного или нескольких остатков пролина создает витки и генерирует несколько конформеров (44), придавая определенную степень гибкость формы и размера, которая, как было показано, важна для функции домена нескольких белков (45,-48). В нашей модели (см. ), ключевые химеры изображены как стебли вытянутых палочковидных полипролин-подобных спиралей. Однако мы предполагаем, что это одна из многих конформаций, в которых эти домены могут складываться, и что взаимное превращение обеспечивает гибкость значительной области, вращающейся вокруг большинства карбокси-концевых остатков пролина (10).

                                    Модель роли MLD в записи, опосредованной PVEER. (A) Доступность PtdSer на поверхности вирионов для домена IgV TIM зависит от длины MLD. Короткие MLD или структурированные стебли не могут проецировать домен IgV выше большинства белков клеточной поверхности.MLD средней длины в некоторых случаях блокируются соседними белками, но в других случаях частично доступны, если локальное окружение короче. Полноразмерные MLD, однако, полностью доступны и проецируют IgV выше большинства белков клеточной поверхности. MLD, содержащие структурированные области в дополнение к расширенным конформациям или с дополнительной длиной, функционируют аналогично. (B) Потенциальная гибкость MLD обеспечивает большую площадь взаимодействия для более длинных белков MLD, чем для более коротких белков MLD.(C) Гибкость MLD может также позволить TIM соответствовать кривизне вирионов и способствовать связыванию нескольких TIM. Серповидные формы представляют домены, связывающие PtdSer, овалы представляют домены IgC из RAGE или домены с аналогичной структурой, а спирали представляют собой спирали бета-поворота, богатые серином/треонином/пролином.

                                    Более длинный MLD может обеспечить несколько преимуществ для улучшения проникновения вируса по сравнению с более коротким MLD. Увеличенная длина потенциально может проецировать карман связывания PtdSer IgV, необходимый для взаимодействия с PtdSer на вирусе, над другими белками клеточной поверхности и сахарами, тем самым уменьшая стерические затруднения (2).Это может объяснить, почему дополнительная длина мутанта 2×MLD не дает дополнительных преимуществ, поскольку IgV уже очистил большую часть среды клеточной поверхности. Точно так же стерические затруднения могут быть вызваны белками, присутствующими на поверхности вириона, такими как GP. Кроме того, увеличенная длина MLD может обеспечивать большую площадь взаимодействия с вирусной мембраной за счет увеличения окружности вращения вокруг якорного или трансмембранного домена (12). Наконец, более длинный MLD может обеспечить некоторую гибкость для взаимодействия и передачи вируса на другие белки.Хотя наши исследования не обнаружили синергии между MLD различной длины, которая предполагала бы передачу вируса между белками TIM, гибкость все же может позволить нескольким молекулам TIM связываться с одной и той же вирусной оболочкой, изгибаясь по мере необходимости к кривизне вирусной оболочки (12). . В соответствии с этой возможностью, как аденовирусы, так и реовирусы, как было показано, нуждаются в гибкости и длине стебля их белков прикрепления для связывания с рецептором (49, 50). Взятые вместе, эти результаты показывают, что адекватное расстояние и гибкость как со стороны хозяина, так и со стороны вируса необходимы для эффективного взаимодействия рецептор-вирус и инфекции.

                                    Moon lax: Средняя школа Moon Area

                                    Средняя школа Лунного района | Лакросс для мальчиков

                                  1. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    вторник, 15 марта

                                    Средняя школа Верхнего Сент-Клера


                                    18:30

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  2. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    вторник, 22 марта

                                    Средняя школа района Батлера


                                    18:30

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  3. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Суббота, март.26

                                    Винчестер Терстон


                                    13:00

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  4. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    вторник, 29 марта

                                    Старшая школа Кнох


                                    16:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  5. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    четверг, март. 31

                                    Средняя школа Quaker Valley


                                    17:30

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  6. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Суббота, 02 апреля

                                    Средняя школа Южного Фейета


                                    14:30

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  7. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    вторник, апр.05

                                    Старшая средняя школа округа Индиана


                                    20:00

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  8. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Четверг, 7 апреля

                                    Средняя школа Тринити


                                    18:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  9. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Суббота, апр.09

                                    Региональная средняя школа Франклина


                                    12:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  10. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    вторник, 12 апреля

                                    Средняя школа Хэмптона


                                    уточняется

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  11. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Среда, апр. 13

                                    Средняя школа района Фрипорт


                                    20:00

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  12. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Среда, 20 апреля

                                    Средняя школа сливы


                                    20:00

                                    Дом


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  13. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Суббота, апр.23

                                    Средняя школа Чартье-Вэлли


                                    14:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  14. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Понедельник, 25 апреля

                                    Средняя школа Норт-Хиллз


                                    19:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  15. МАЛЬЧИКИ (V)

                                    Лакросс


                                    Среда, апр.27

                                    Северо-католическая средняя школа


                                    17:00

                                    На выезде


                                    Нажмите, чтобы узнать больше

                                  16. Лакросс-профиль Кэти Мун | КоннектЛАКС

                                    Лакросс-профиль Кэти Мун | КоннектЛАКС

                                    Microsoft прекратила поддержку Internet Explorer в пользу Edge, и поэтому мы также прекратили его поддержку. Пожалуйста, используйте Edge или другие браузеры, такие как Chrome, Firefox или Safari, для безопасного доступа к нашей платформе.Спасибо.

                                    Возможно, вы используете устаревший браузер. Убедитесь, что ваш браузер обновлен, и используйте поддерживаемый браузер, например Microsoft Edge, Chrome, Firefox или Safari. Спасибо.

                                    Кэти еще не пошла в школу.

                                    Агрессивный защитник и спортсменка с оценками, соответствующими ее слабым навыкам. Чрезвычайно обучаемый и лидер команды, любит кондиционировать. Также конкурентоспособный танцор, так что отличный баланс и сила.


                                    Игровой фильм виден только зарегистрированным тренерам колледжа.

                                    Награды и награды:

                                    Стартовый курс на 3 года

                                    Атлетическая конференция округа Семинол Все академические награды 2018-2020

                                    Пресс:

                                    Сыграно других видов спорта HS:

                                    Университетское приветствие

                                    Заниматься двумя видами спорта в колледже?

                                    Соответствующие награды в лакроссе:

                                    Стартовый курс на 2 года

                                    См. статистику HS

                                    Контакты тренера

                                    Средняя школа:

                                    Средняя школа Лейк Брантли

                                    Автобус:

                                    Джон Олт

                                    Название команды:

                                    Патриоты

                                    Номер Джерси:

                                    33

                                    Название клуба:

                                    Шторм Селект Лакросс

                                    Автобус:

                                    Энн Бомлени

                                    Название команды:

                                    Шторм Селект 2022

                                    Номер Джерси:

                                    33

                                    См. контактную информацию

                                    Средний балл (невзвешенный):

                                    93-96; 4.0; А

                                    Просмотреть всех академиков

                                    Для полной оценки игры Кэти
                                    , ее атлетизма и учебы, пожалуйста, напишите мне прямо по телефону (407) 558-9590.

                                    Работа клубным тренером Кэти позволила мне в первую очередь увидеть ее прогресс в качестве солидного защитника.
                                    рука. Она обладает большой скоростью и очень хорошо защищается в космосе. Очень обучаемый и потрясающая рабочая этика.

                                    Тренировки Кэти в клубе и старшей школе особенные. Эта юная леди зашла так далеко как защитник и игрок. Молниеносная скорость и отличная работа ног делают ее надежным защитником 1 на 1, которого ищут тренеры колледжей. Катя, продолжай усердно работать!

                                    Просмотреть все одобрения

                                    Твиты от katiemoon33

                                    Посмотреть @katieemoon в Instagram

                                    По времени Лос-Анджелеса | БИРЮЗОВАЯ ЛУНА

                                  17. Ограниченное издание виниловой пластинки — вариант Venice Beach Sunrise

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    «The Sunset City» возвращается в 2021 году с очень ограниченным (150 копий) вариантом «Venice Beach Sunrise» знаменитого синтезаторного опуса 80-х.

                                    Желтый винил с оранжевым свечением в центре, как показано на рисунке (настоящий винил, а не макет). Этот второй выпуск поставляется без полосы оби. Нумерация рук как обычно.

                                    Восстановленная работа Джона Бергина. Мастеринг до звукового совершенства Энди Фосберри.

                                    ** Максимум 2 копии на человека. Дополнительные заказы будут отменены **

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    отправляется в течение 7 дней

                                    6 осталось

                                    Можно приобрести с помощью подарочной карты

                                    Купить Пластинка/Винил

                                     

                                    17 фунтов стерлингов.

                                    99

                                    фунтов стерлингов
                                    Отправить в подарок 

                                  18. Купить полный цифровой альбом

                                  19. Лимитированная серия, 2 виниловых набора: Sunset + Soul

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    Возьмите выпуск The Sunset City 2021 года на желто-оранжевом светящемся виниле Venice Beach Sunrise… ПЛЮС окончательные копии красно-черной версии исполненного соула электро-соула «Things That We Should Fear» группы Nevergrand (Ян Борре и Стив Кашала) с нашего дочернего лейбла Spun Out Sounds… по выгодной комбинированной цене!

                                    Код загрузки для «Вещей, которых нам следует опасаться» будет отправлен по электронной почте отдельно после покупки.

                                    ** ОДИН пакет на одного покупателя. Деньги за несколько заказов будут возвращены **

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    отправляется в течение 7 дней

                                    2 осталось

                                    Можно приобрести с помощью подарочной карты

                                    Купить Пластинка/Винил

                                     

                                    28 фунтов стерлингов

                                    фунтов стерлингов
                                    Отправить в подарок 

                                  20. Ограниченная серия виниловых пластинок — вариант LA Sunset Fireball

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    Эта версия, выпущенная строго ограниченным тиражом в 150 пронумерованных вручную копий по всему миру, включает в себя съемную полосу OBI в японском стиле, антистатические внутренние рукава и защитный пластиковый пакет

                                    .

                                    Реставрация художественного произведения Джона Бергина (Stranger Things / Lakeshore Records)
                                    Мастеринг Энди Фосберри

                                    *** Это непрозрачный желтый и прозрачный оранжевый цвета в цветовом варианте, как показано ***

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    Продано
                                  21. Ограниченное издание «Sun + Moon» 2 виниловых пластинки в комплекте

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    Получите ОБЕ виниловые версии альбома Turquoise Moon’s The Sunset City, как показано на рисунке, на пару фунтов меньше, чем при покупке по отдельности… а также сэкономьте на почтовых расходах!

                                    Это может выйти дешевле для наших зарубежных друзей по всему миру и в США в частности.

                                    ** СТРОГО 1 НАБОР НА ЧЕЛОВЕКА **

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    Продано
                                  22. LA Винил Sunset Fireball (только 6 копий — без бумаги OBI)

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    Последние 6 копий варианта LA Sunset Fireball LP Turquoise Moon The Sunset City.

                                    NB: Обратите внимание, что на этих копиях отсутствует рекламная лента OBI, как показано на рисунке, поэтому цена снижена.

                                    Реставрация художественного произведения Джона Бергина (Stranger Things / Lakeshore Records)
                                    Мастеринг Энди Фосберри

                                    *** Это непрозрачный желтый и прозрачный оранжевый цвета в цветовом варианте, как показано ***

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    Продано
                                  23. Ограниченное издание виниловой пластинки — вариант бирюзовой луны

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    Пронумерованный вручную виниловый альбом, выпущенный строго ограниченным тиражом, со съемной бумажной лентой OBI в японском стиле, антистатическим внутренним конвертом и защитным пластиковым пакетом. ..

                                    Обложка восстановлена ​​Джоном Бергином (Stranger Things/Lakeshore Records)
                                    Мастеринг оригинальных барабанов 1985 года Энди Фосберри

                                    *** Это прозрачная бирюзовая версия «Бирюзовая луна» — всего 150 копий по всему миру! ***

                                    «Фантастический фрагмент работы аналогового синтезатора…» Электронный звук

                                    «Кинематографический шедевр» Король ностальгии

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    Продано
                                  24. Виниловая пластинка «Бирюзовая луна», выпущенная ограниченным тиражом (*На складе нет полосы OBI*)

                                    Пластинка/винил + цифровой альбом

                                    ** НАХОДИТСЯ НА СКЛАДЕ – ТОЛЬКО 3 ЭКЗЕМПЛЯРА **

                                    ПОЖАЛУЙСТА, ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ: ЭТИ КОПИИ SUNSET CITY VINYL LP ПОСТАВЛЯЮТСЯ БЕЗ БУМАЖНОЙ ПОЛОСКИ OBI, КАК ПОКАЗАНО, И ПРОДАЮТСЯ ПО СООТВЕТСТВУЮЩЕЙ СНИЖЕННОЙ ЦЕНЕ. .. СДЕЛАЙТЕ СЕБЯ СДЕЛКУ!

                                    Включает неограниченную потоковую передачу THE SUNSET CITY
                                    через бесплатное приложение Bandcamp, а также высококачественную загрузку в MP3, FLAC и других форматах.

                                    Продано
                                  25. Рыбная луна

                                    Рыба-Луна — это прежде всего самая необычная рыба, самая большая, самая плодовитая, самая глупая и т. д.

                                    Тело рыбы Луны похоже на диск. В переводе с другого названия рыбы лат. «Мола мола» как «мельничный диск».

                                    Рыба Акула обитает преимущественно в тропическом, субтропическом и умеренном поясах, в водах Атлантического, Индийского и Тихого океанов. Рыбу-луну часто можно встретить недалеко от Великобритании, Исландии и иногда недалеко от Японии.

                                    Эта интересная рыба получила свое название из-за своей необычной формы, напоминающей неполную луну. Ее также часто называют рыбой-солнцем и рыбой-головой. Так или иначе, рыба-луна на сегодняшний день считается самой крупной костной рыбой. Средний размер рыбы-луны составляет около трех метров в длину и весит добрых 1,5 тонны.

                                    Эта рыба почти всегда лежит на поверхности воды незадолго до начала шторма. В целом рыба-луна очень медлительна, даже ленива, ведет пассивный образ жизни, даже попав на борт корабля, не предпринимает попыток спастись.

                                    Выплывшую на поверхность рыбу-луну часто путают с акулой, принимая ее верхний плавник за гребень акулы. Еще одной отличительной чертой рыбы луны является тот факт, что, несмотря на то, что рыба луна и является представителем костных рыб, на ее поверхности совершенно отсутствует чешуя. Он покрыт не менее хорошим средством защиты – толстой и грубой кожей, иногда с выступающими костными бугорками.

                                    Луна-рыба также считается самой глупой из всех рыб.Потому что на всю массу такой махины приходится всего 4 грамма мозга. Но на то она и отличная мать, рыба-Луна способна выметать за один раз до 300 миллионов икринок. Несмотря на такое большое количество икры, до зрелого возраста доживают лишь единицы, и популяция этих рыб не растет, а скорее наоборот.

                                    Рыба-луна питается в основном планктоном, потому что охотиться они не умеют, а значит, вам придется есть то, что найдете. А также кальмары, медузы, различные личинки.

                                    RAJONNIEVESTI / Рубрики / Луна в октябре

                                    Вы, наверное, замечали, что в одни дни месяца вы просыпаетесь бодрыми и полными сил, в другие – вялыми и уставшими. Если наше поведение определяется лунными днями, то состояние нашего организма, степень его бодрости и активности влияет фаза луны. Календарь лунных дней на октябрь поможет спланировать успех в делах, когда будут следующие новолуния и полнолуния, благоприятные, хорошие дни и неблагоприятные.

                                    Благоприятные дни

                                    • со 2 по 8 октября, с 10 по 15 октября – растущая луна
                                    • с 17 по 21 октября, с 23 по 29 октября – убывающая луна.

                                    Дни растущей, новолуния хорошие дни, можно начинать разные новые дела, планировать будущее, принимать важные решения. Это самые благоприятные дни для похудения, диеты, борьбы с вредными привычками, можно начинать бросать курить, и т. д. Удача и успех в делах и в личной жизни будут сопутствовать вам в эти дни растущей (новой, молодой, восходящей, восходящей) Луны.

                                    Плохие дни

                                    • 1 октября — Новолуние 1 фазы луны
                                    • 9 октября — 1 четверть 2 фазы луны
                                    • 16 октября — Полнолуние 3 фазы луны
                                    • 22 октября — 4 четверть 4 фазы луны
                                    • 30 октября — Новое Луна 1 фаза луны

                                    Это негативные дни, будьте осторожны! Не рекомендуется начинать какие-либо новые важные дела, а по возможности постараться перенести их на дни растущей луны. Обратите внимание на свое здоровье.

                                    Период полнолуния можно назвать мистическим, так как вся накопленная энергия начинает расходоваться. Как ваше тело будет расходовать энергию, это главная загадка, здесь начинается загадка. Если человек экстрасенс, в этот период он очень сильный. Если человек здоров, то полная луна иногда может управлять его эмоциями. Но для людей со слабой психикой наступает момент обострения заболеваний.

                                    Фотография взята с сайта www.galactic.name

                                    Обратная сторона Луны — Лена Миро: — LiveJournal

                                    Красивым и умным вообще труднее жить.Именно Цыпленок и Оладух быстро находят себя друг в друге, довольствуясь малым – второсортной внешностью, подвальным высшим образованием, работой за три копейки. Умные и красивые, с детства предъявляют повышенные требования к окружающему миру и к себе.

                                    Думаю, это правильно. Если бы мы не были такими, если бы мы были другими и менее требовательными, мир скатился бы вниз по эволюционной лестнице. Человечество деградирует до стадии обезьян и мышей. Никаких антибиотиков и никаких прорывов в космос.

                                    Несмотря на то, что мы движемся вперед, в спину раздаются проклятия, напоминающие шипение змей. Серая масса ненавидит тех, кому это выгодно.

                                    Сколько дерьма льется в мой адрес, все видят. Каждый день непрерывно находятся те, кто унижен своей жизнью, но видят проблему не в себе, а в том, что я называю жирной задницей – жиром, бандеровской мразью – мразью, а дерьмом – дерьмом.

                                    Да серой массе легче, это понятно.Пыхтели от ненависти, ругались и продолжали жрать целлюлит в мозгу. У них полный холодильник маргарина с майонезом, вялый член мужа, который не встает от минета, неубранная квартира и соплежуи дети. небо, чтобы быть фоном для тех, кто двигает человечество вперед.

                                    Я намеренно обошел тему того, что вас ждет, если вы осмелитесь подняться над серой массой.Да, с одной стороны, перед вами непременно откроются большие возможности, но с другой стороны, вы непременно столкнетесь с направленным на вас потоком ненависти.

                                    Очень рад, что благодаря мне, моему письму и моему примеру, многие из вас осознали изъян в своей скорлупе и пошли приводить себя в порядок.
                                    Я очень рад, что сегодня многие люди разделяют мои политические взгляды и позицию, хотя всего год назад в том же ЖЖ на главной странице я был единственным, кто высказывался за Россию.
                                    Я рад, что мне удается достучаться до сознания тысяч людей, открыть им глаза на реальное положение дел, разбудить спящий мозг.

                                    Но в то же время было бы нечестно не предупредить, что вас ждет, если вы проснетесь от сна разума. А вас ждет ненависть собратьев-хомяков, их яростная зависть с желанием вашей смерти. Серость всегда ненавидит тех, кто возвышается над ней.

                                    И даже те, кто пойдет с тобой в одном направлении, будут ненавидеть тебя.Сегодня они смотрят вам в рот, заражаясь примером. А завтра, не догнав вас в каком-то деле, точно так же начнут пыхтеть от ненависти. Будто ты виноват в их заднице целлюлитной, которая не может самоуничтожиться от мостов и приседаний. Вам начнут подражать, но это будут лишь бледные копии, что вызовет у них ярость и гнев.

                                    Будьте к этому готовы и не обращайте внимания на бурлящее дерьмо под ногами. Так было всегда, так есть и так будет.Быть красивой, умной, успешной – это довольно тяжелое бремя. Но разве это повод сдаться?

                                    В комментариях вы можете сказать мне спасибо, а еще лучше рассказать, с каким отношением окружающих вы столкнулись, когда начали подниматься над серой массой.

                                    Лунные дела 8 августа 2021

                                    Лунные дела 8 августа 2021 года, сегодня или в интересующую вас дату по лунному календарю дел. Какая фаза луны, видимость
                                    восход, закат и вхождение Луны в знак зодиака вы можете посмотреть на этой странице, а еще все о лунных делах на весь месяц в
                                    лунном календаре дел на август 2021 .А также благоприятные и неблагоприятные дни для лунных дел на сегодня или на любую другую дату.

                                    8 августа 2021 г.


                                    лев

                                    29
                                    лунный день

                                    Восход
                                    03:46

                                    Закат
                                    20:57

                                    Новолуние

                                    Видимость: 0%

                                    Широта: 55. 75, Долгота: 37.62 Часовой пояс: Европа/Москва (UTC+03:00) Расчет фазы Луны на 01.08.2021 (12:00)
                                    Для расчета фазы Луны для вашего города зарегистрируйтесь
                                    или
                                    войти.

                                    Характеристики Луны на 8 августа 2021 года

                                    На дату 08.08.2021 в 12:00 Луна в фазе «Новолуние (наступит 08.08.2021 в 16:51)» . Это 29 лунный день по лунному календарю.Луна в знаке зодиака Лев ♌ . Процент освещенности Луны 0%. Восход Луны в 03:46 и закат в 20:57.

                                    Хронология лунных дней
                                    • 28 лунный день с 02:31 07.08.2021 по 03:46 08.08.2021
                                    • 29 лунный день с 03:46 08.08.2021 по 16:51 08.08.2021
                                    • 1 лунный день c 16:51 08.08.2021 и до следующего дня

                                    Влияние Луны на дела 8 августа 2021 г.

                                    Луна в знаке зодиака Лев (±)

                                    Луна в знаке Лев . Благоприятный период для посещения ювелирных магазинов, театров, дворцов, но избегайте лишних забот. Это хорошее время для реализации амбициозных планов, но оно создает обманчивое впечатление, что ваших сил хватит на все.

                                    Люди становятся неустойчивыми к лести и невнимательными при подписании документов.

                                    29 лунный день (-)

                                    8 августа 2021 года в 12:00 – 29 лунный день . В этот день даже мысленно нельзя строить никаких планов, а уж тем более нельзя начинать ничего нового. Нельзя верить никаким обещаниям, слухам или прогнозам на будущее – кругом только обман. Один из критических дней!

                                    Природа систематизирует объекты по принципу «сходства судеб» — возникающие ситуации являются отражением внутреннего мира.Я рекомендую вам проявить целеустремленность и устойчивость к внешним воздействиям.

                                    Новолуние (-)

                                    Луна в фазе Новолуние . Что несет с собой эмоциональную неустойчивость, нервозность и чувство тревоги. В результате упадка энергии человек становится вялым, заторможенным и равнодушным. Снижение продуктивности мозга, ослабление памяти и внимательности.

                                    Как следствие, вероятность ошибок значительно возрастает. Снижается скорость реакции на изменение жизненных обстоятельств.

                                    Влияние дня недели (-)

                                    День недели – Воскресенье . Если вы что-то меняете в этот день, то делать это следует с большой осторожностью.

                                    Навигация по лунному календарю дел

                                    Другие лунные календари на 8 августа 2021 года
                                    Лунный календарь дел на текущий 2021 год

                                    Точку отсчета в мире лунного календаря и все о влиянии Луны на нашу жизнь можно найти на странице «Лунный календарь».

                                    Лунный календарь дел за предыдущие 6 дней
                                    Лунный календарь дел на ближайшие 6 дней
                                    Интересные материалы и новости

                                    Оперная труппа Большого театра

                                    В партии Матье в балете «Холстомер. Князь Серпуховский» — Игорь Вялых.
                                    Фото: архив Камерного музыкального театра. Б.А. Покровский.

                                    В роли Матье в балете «Холстомер».
                                    Фото: архив Камерного музыкального театра. Б.А.Покровский.

                                    В роли Матье в балете «Холстомер».
                                    Фото: архив Камерного музыкального театра. Б.А. Покровский.

                                    В роли Вителлии в «Милости Тита».
                                    Sext – Виктория Преображенская.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Вителлии в «Милости Тита».
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Вителлии в «Милости Тита».
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Вителлии в «Милости Тита».
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Лизетт, служанки Буонафеде в Лунном мире.
                                    Буонафеде, богатый купец – Роман Шевчук.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Лизетт, горничной Буонафеде в Лунном мире.
                                    Чекко – Борислав Молчанов.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Лизетт, служанки Буонафеде в Лунном мире.
                                    Чекко – Борислав Молчанов.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Как Антония в Сервилии.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Как Антония в Сервилии.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Сцена из спектакля. Как девушка в «Один день» из жизни Ивана Денисовича. Еще одна девушка — Александра Наношкина.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Как первая сестра в Периколе. Маркиз де Терапо – Сергей Остроумов.
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Три сестры. В роли первой сестры в опере «Перикола».
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    Как первая сестра в Периколе.
                                    Алексей Сулимов — Дон Мигель де Панателия
                                    Фото Владимира Майорова.

                                    В роли Роуэна в опере «Маленький трубочист».
                                    Фото Павла Рычкова.

                                    Как Роуэн
                                    в «Маленьком трубочисте».
                                    Фото Павла Рычкова.

                                    В роли Роуэна в опере «Маленький трубочист».
                                    Фото Павла Рычкова.

                                    В роли Роуэна в опере «Маленький трубочист».
                                    Фото Павла Рычкова.

                                    В роли Роуэна в опере «Маленький трубочист». Черный Боб/Том – Анатолий Захаров. Моллюск / Альфред – Петр Мелентьев.
                                    Фото Павла Рычкова.

                                    90 000 Кто кого играет в сериале «Луна»

                                    Дебютанты и хорошо забытые старые звезды сериалов, молодые звезды и легенды отечественного кино – разбираемся, кто есть кто.

                                    Екатерину Панину играет Лидия Вележева

                                    Знаменитая актриса проснулась в 2001 году — после выхода сериала « Вор ».У Лидии Вележевой в сериале были разные роли — от учительницы в «Простых истинах» до Настасьи Филипповны в «Идиоте». В новом проекте канала СТС «Луна» она играет следователя прокуратуры — суперпрофессионала с железной хваткой, которому предстоит расследовать смерть собственного мужа.

                                    Лидия Вележева замужем за актером Алексеем Гуськовым («Граница. Таежный роман», «Турецкий гамбит», « Мусорщик »). Супруги воспитывают двоих сыновей: Владимира 1998 года рождения и Дмитрия 1994 года рождения.

                                    Читайте также:

                                    Мистический сериал «Луна»: актеры — о героях

                                    Николая Панина играет Анатолий Кот

                                    Как и Лидия Вележева, Анатолий Кот заявил о себе в 2001 году. Тогда же его стали приглашать сниматься в кино: сначала в фильме «В августе 1944 года», затем — в комедии « Путеводитель » (роль офтальмолога). режиссер Александр Ефремов .Позже началась работа над сериалами: «Охотник», «Черные волки», «Лектор», «Жизнь и приключения Мишки Япончика», «Отдел» и другие.

                                    « Луна » — не первый проект канала СТС, в котором участвует Анатолий Кот: он сыграл Анатолия Леонидовича Жилина в сериале «Молодежка». В «Луне» у актера роль следователя военной прокуратуры. Как и его жена, Николай человек долга. Сходство характеров их сблизило, но позже разлучило: работа стала важнее семьи. Так, Панин мог по звонку сорваться в командировку на несколько месяцев, ничего не сказав родным, ведь ему часто поручали самые секретные и опасные задания.Казалось, что в Старокаменске он занимается скучными местными делами, но Екатерина точно знает: таких специалистов не отправляют «отдыхать» на рутинной работе.

                                    Анатолий Кот был женат на Юлии Высоцкой, которая сейчас замужем за Андреем Кончаловским. Правда, тот брак был фиктивным. В то время Юлии Высоцкой для продолжения учебы в Минске нужна была прописка. Сейчас Анатолий Кот женат на Алене Кот и имеет общего ребенка – дочь Алису.

                                    Анастасию Панину играет Дарья Новосельцева

                                    Дарья Новосельцева окончила В.Щепкиной в 2014 году и вошла в состав труппы Малого театра, на сцене которого выступает с 2012 года в составе образовательных спектаклей. Кроме того, в прошлом году она дебютировала в кино — в мини-сериале «Война и мифы», в котором также снимались Михаил Пореченков, Сергей Безруков, Андрей Мерзликин, Андрей Смоляков, Ирина Пегова, , Алексей Барабаш, , Константин Хабенский.

                                    Сериал «Луна» канала СТС стал второй киноработой в фильмографии Дарьи Новосельцевой.Она сыграла роль дочери Николая и Екатерины Паниных. Из-за профессии родителей в детстве Насте не всегда удавалось проводить много времени с родителями, что в подростковом возрасте становилось причиной ссор между ними… Настя , которую воспитывал дедушка, выросла умной и самостоятельной девочкой. Увлекается танцами: музыка помогает ей обрести гармонию с окружающим миром. Даша никогда не хочет бросать хобби и друзей, но мама считает, что важнее вернуть единство семьи, и настаивает на переезде.

                                    Игоря Демидова играет Макар Запорожский

                                    Младший сын актера Виктора Николаевича Запорожского уже сыграл два десятка ролей в фильмах и сериалах, но знаменитым он проснулся два года назад – после выхода сериала СТС «Молодежка», в котором Макар сыграл вратаря Дмитрия Щукина. Кроме того, Макар Запорожский сыграл одну из главных ролей в сериале СТС «Мир тьмы: Равновесие», где снимался вместе с Павлом Прилучным, Евгенией Брик, Валерией Ланской и другими.

                                    В новом сериале «Луна» канала СТС актеру досталась роль Игоря Демидова, который с детства страдает редким генетическим заболеванием крови, а потому живет в полной изоляции от сверстников. Герой замкнутый парень, но в то же время самостоятельный, остроумный и сильный. Мать Игоря умерла, когда он был еще ребенком, и мальчика воспитывал отец, готовый на все ради сына. Благодаря переезду в Старокаменск и правильному лечению недуг Игоря отступает – появляется надежда на полноценную жизнь. , но знакомство с Настей Паниной переворачивает все с ног на голову.

                                    Старший брат Макара Запорожского Кирилл тоже актер. Они друзья, но отличаются профессиональными взглядами. Макар Запорожский женат на своей сокурснице ГИТИС Екатерине Смирновой . Они познакомились на вступительных экзаменах и поженились после четырех лет отношений.

                                    Скоро Макар Запорожский можно будет увидеть на Первом канале в российской версии Декстера — сериале Юрия Быкова «Метод» с Константином Хабенским в главной роли, затем в проекте «Мата Хари».

                                    Читайте также:

                                    Макар Запорожский: «В тот момент я понял, что без этой женщины я не смогу…»

                                    Алексей Демидов играет Алексея Барабаша

                                    Петербургский гуманитарный университет профсоюзов, факультет искусств под руководством Зиновия Корогодского. Актер начал участвовать в телевизионных проектах в начале 2000-х. Он появился в роли Мортона Шейна в сериале Ниро Вулфа и Арчи Гудвина , Александра I в историческом фильме Бедняк, Бедного Павла , Князя Долгорукого в Любовь императора и многих других.В 2011 году Алексей снялся вместе с Валерией Гай Германикой в ​​фильме «Краткий курс счастливой жизни» в роли Димы, бывшего мужа главной героини, которую сыграла Светлана Ходченкова. В 2012 году Барабаш снова встретился с актрисой на той же съемочной площадке — на этот раз на съемках исторической ленты «Василиса». Кстати, он снова исполнил роль императора Александра I.

                                    В сериале СТС «Луна» Алексей Барабаш сыграл отца Игоря, учителя истории в местном лицее. Несмотря на свое скромное положение, герой является авторитетным историком, знатоком славянской культуры.Изменение его блестящих карьерных перспектив на жизнь в провинции кажется его коллегам прихотью. Но у поступка Алексея есть более чем серьезные мотивы, о которых он не может никому рассказать.

                                    Скоро мы сможем увидеть Барабаша в главной роли в мини-сериале «Эти глаза напротив», который расскажет о судьбе талантливого советского эстрадного исполнителя Валерия Ободзинского.

                                    Что касается личной жизни, то актер четырежды разводился. У него двое детей от разных браков.Первой женой была актриса Ольга Белинская . Детей у пары не было. Второй женой актера стала Наталья Бурмистрова, которая родила ему сына Арсения. Потом Барабаш женился на Юлии. Детей в браке не было. На съемках фильма «Мужчина во мне» Алексей познакомился с Анной Здор и ушел из семьи ради новой возлюбленной. Летом 2012 года у пары родилась дочь Варвара. Тем не менее пара развелась.

                                    Читайте также:

                                    Алексей Барабаш: «От Оттепели можно считать качественные российские сериалы»

                                    Романа Соколова играет Сергей Стрельников

                                    Звезда сериала «Страсти по Чапаю» Первого канала в проекте СТС Луна» сыграла капитана милиции — принципиального, прямолинейного и неподкупного человека.В результате загадочного и трагического происшествия Роман остался сиротой. С тех пор он одержим поиском истины, поэтому, когда в семье Паниных случается несчастье, капитан Соколов не остается в стороне, и не только в силу своего профессионального долга.

                                    Сергей Стрельников также играл в таких сериалах, как «Куприн. Яма», «Девять жизней Нестора Махно», «Екатерина», « Баллада о бомбардировщике », «Ангел-хранитель», «Колдовская любовь», «Это было на Кубани».

                                    Марину Соколову играет Ксения Лаврова-Глинка

                                    Выпускница Школы-студии МХАТ (курс О. Табакова) и звезда сериала «Монтекристо» сыграла в сериале «Луна» канала СТС жену Соколова, бизнесвумен и мать двоих детей, чьи отец не Роман. Яркая, эмоциональная, острая на язык женщина со взрывным характером – о ней мечтают все мужчины, ей завидуют все женщины города, но никто не догадывается, чего стоил Марине этот успех.

                                    Ольгу Луневу играет Анна Скиданова

                                    Анна Скиданова из Саратова. Там она окончила Гуманитарный лицей в 2004 году, а в 2012 году стала выпускницей Российской академии театрального искусства (ГИТИС).

                                    Анна Скиданова дебютировала в кино в 2011 году: она появилась в мистическом многосерийном фильме «Закрытая школа» в роли Полины Александровны Мальцевой, педагога хореографии школы-интерната «Логос» и участницы нацистского проекта «Близнецы».В 2012 году Анна Скиданова была приглашена в Голливуд для участия в съемках пятой полнометражной американской комедии «Очень страшное кино » . С работой в США актрисе помогал продюсер Харви Вайнштейн , с которым Анна познакомилась на одной из вечеринок в Москве.

                                    В новом проекте канала СТС – сериале «Луна», который, кстати, является работой создателей «Закрытой школы», – актриса играет сестру Романа Ольгу. На ее долю выпало немало испытаний: она рано овдовела и теперь пытается в одиночку справиться с прогрессирующей болезнью сына Артема.Единственная опора в трудной жизненной ситуации – ее брат.

                                    Кроме того, Анна Скиданова снялась в сериалах Метод Лавровой и Екатерина . Вскоре мы увидим актрису в фильме « Москва никогда не спит » и драме Александра Миндадзе «Дорогой Ганс, дорогой Питер».

                                    Читайте также:

                                    Анна Скиданова: «Свои главные и любимые роли я получила в России»

                                    Анна Скиданова закрутила роман с Киану Ривзом

                                    Артем Лунев играет Даниила Вахрушева

                                    Вахрушев город Котлас.Он окончил Европейскую школу заочного образования и хотел стать менеджером по рекламе, но когда начал работать по специальности, понял, что хочет не продавать, а писать и снимать рекламные ролики. Одно время я даже думал о том, чтобы стать директор. Тем не менее в Котласе я пошла на театральные курсы при местном драмтеатре, а после этого поступила в Московский государственный университет культуры и искусств на платное отделение, но через три месяца учебы бросила учебу.Наконец, Даниил Вахрушев поступил во ВГИК на курс Сергея Александровича Соловьева.

                                    Актер проснулся знаменитым после выхода сериала «Физрук» канала ТНТ, в котором он сыграл Валентину Вялых по прозвищу Усач, безнадежно влюбленную в главного героя. Даниил Вахрушев появился на большом экране в комедии «Выпускной» в образе молодого рэпера. В целом к ​​22 годам актер успел сняться в двух короткометражках, нескольких сериалах и дебютировать в полнометражном фильме.

                                    В сериале СТС «Луна» Даниил Вахрушев сыграл сына Ольги, подростка-инвалида Артема. Врачи считают, что наследственное заболевание не оставляет герою шансов выжить, но юноша не сдается и готов испробовать любые средства, даже если близкие не разделяют его убеждений.

                                    Скоро мы увидим Вахрушева в сериале «Закон каменных джунглей» на канале ТНТ и, конечно же, в третьем сезоне «Физрука».

                                    Читайте также:

                                    Даниил Вахрушев: «Режиссер сказал, что я похож на парня из «Сумерек

                                    »

                                    Смотрите сериал Луна с понедельника по четверг в 23:00 на канале СТС.

                                    90,000 Что должны сделать родители, чтобы их ребенок мог хорошо есть и спать?

                                    ПРОБЛЕМЫ АППЕТИТА РЕШАЮТ ГОЛОД

                                    — Уважаемый Евгений Олегович! Подскажите как быть. Все врачи разводят руками, не знают, что делать. Ребенку 2,5 года. До сих пор ест пищу только в виде пюре, другую не признает, даже когда голоден. Умеет жевать: если дать ему печенье, вафлю, батончик, он прожует .Но он ест здоровую пищу только в виде пюре. Мы испробовали все приемы.

                                    – Какие там фокусы, ребята! Есть такое понятие – избирательный аппетит. Эту кашу я буду, эту – не буду, или этот суп, этот – не буду. Теперь аксиома: голод решает все проблемы с избирательностью аппетита. Все! Другой вопрос, когда ребенок сказал: «Не буду». Если вам невыносимо, у вас нет мира и покоя в семье, потому что ребенок не хочет есть кусочки, то вы принимаете волевое решение: «Хотим заставить ребенка жевать.«На, ешь. Не хочет. Не вопрос, пойдем гулять. На. Не хочу? Пойдем гулять. Просто когда второй раз откажешь ему в еде, то маме нужно будет вызывать скорую. Поэтому основной проблемой является психологическая проблема родителей.

                                    Когда ребенок плохо ест, лежит вялый, бледный, смотрит в одну точку – тогда разберитесь. Если у него шило в одном месте и мать не может его догнать, чтобы накормить, совсем другое дело. В такой ситуации я всегда советую маме переключиться на папу.Теперь мой совет всем девушкам. Учитесь правильно делиться своей любовью. Очень часто оказывается, что при появлении ребенка 80 процентов материнской любви уходит к ребенку, и не каждый мужчина с этим согласен. Если у мужчины много любви, то эта любовь отражается от него и идет в семью, к детям. Как вам теория отраженной любви? Красиво, не так ли? Мне пора романы писать, а то я про сопли и пеленки.

                                    – Девочка 6 лет часто жалуется на боли в животе, чаще по вечерам.

                                    – И что? Это нормальный вопрос. Чаще всего боль в животе возле пупка у детей по вечерам связана с недостаточной дефекацией. Когда сто лет назад у ребенка так болел живот, любая мама сказала бы: «Марш на горшок!» А теперь говорят: «Сдайте анализ на дисбактериоз». Одна клизма может заменить кучу процедур.

                                    – Ребенку два года. Максимум, что говорит, это «ма», «па». Это хорошо?

                                    — Это нормально! Всякий раз, когда вы оцениваете, как ребенок говорит, помните, есть ли динамика.Если в два года он говорит лучше, чем в год и восемь, расслабьтесь, подождите. Все развивается. Если через два месяца новых слов нет, придется суетиться.

                                    ЛЮДИ СТАЛИ БОЯТЬСЯ ПРИВИВОК, И ЗАБОЛЕВАНИЯ ПЕРЕСТАЛИ БОЯТЬСЯ ПРИВИВОК,

                                    – В прошлом году мы ходили в школу. Сделайте прививку от гриппа. И теперь врачи, которые сказали сделать прививку, говорят, что сделали это зря. Теперь ходим с кашлем и красным горлом.

                                    — Стоп! Существует два глобальных заблуждения о прививках от гриппа.Первое заблуждение. «Я сделал прививку, но у меня все еще есть сопли». Прививка от гриппа не защищает от всех насморков и насморков. Прививка от гриппа защищает только от гриппа и больше ничего. Поэтому можно заболеть сотней других болезней. И второе заблуждение: «Что я буду делать прививку, если вирус гриппа меняется каждый день». Классический. Главное, что вы должны знать, это то, что вирус каждый год разный и вакцина каждый год разная. Если в моем городе появился грипп, то на следующий день в моем кабинете будет сидеть больной гриппом.Каждый год болел гриппом. И вот я как инфекционист не болею гриппом с 2000 года: я привит 18 лет. Привит я, привиты мои дети, привиты внуки, привиты мои друзья, привит весь персонал моей клиники.

                                    – Увеличилась ли заболеваемость корью из-за прекращения вакцинации?

                                    – Корь – вирусная инфекция с общей заболеваемостью. Вирус с воздушными потоками, не теряя своей заразности, перемещается на сотни метров.Условно говоря, если в обычной минской многоэтажке ребенок на шестнадцатом этаже болеет корью, то ребенок на первом этаже в контакте. Корью всегда болели все, и один процент всех заболевших всегда умирал. Такая своеобразная дань природе, пока не появились прививки. Некоторые говорят, что корь исчезла не из-за прививок, а из-за улучшения гигиены. Все это полная ерунда. Корь не имеет ничего общего с мытьем рук. Он распространяется по воздуху. Корь исчезла, потому что люди начали вакцинироваться.

                                    Высочайшая эффективность прививок привела к тому, что люди перестали хоронить детей от кори. Но они стали рассказывать друг другу, что у человека поднялась температура или его присыпали после прививки. Поэтому люди стали бояться прививки от кори, и перестали бояться самой кори. Прививки — меньшее из зол.

                                    – Ребёнок ежемесячно болеет герпесом на губах. Врачи разводят руками…

                                    – Честно говоря, я не понимаю. Вы просто не нашли своего врача. Герпес прекрасно лечится противогерпетическими препаратами, курсами стандартными, проблем нет. Конечно, полностью устранить герпес невозможно, но сделать так, чтобы эти обострения были не каждый месяц, а раз в два года или раз в год, не очень сложно. Ищите нормального врача. Так как обычные люди не помогают, ищите инфекциониста.

                                    ЕСЛИ ВОЗДУХ В КВАРТИРЕ СУХОЙ, ТЕПЛЫЙ, ПЫЛЕННЫЙ, РЕБЕНОК БУДЕТ ПОСТОЯННО БОЛЕТЬ

                                    — Моей дочери пять лет, у нее постоянная температура 36.9 – 37 градусов. Это хорошо?

                                    — Это не просто нормально, это более чем нормально. Это в сознании наших мам парадигма, что температура должна быть 36,6, а если 36,8 – дайте нам золотую таблетку. В целом у 25 процентов детей и людей температура 37,2 является абсолютно нормальной. И это не повод суетиться.

                                    – Если вечером и ночью поднимается температура до 38 градусов и в последнее время часто бронхит, как улучшить самочувствие ребенка?

                                    — В любом случае сделайте хотя бы стандартный клинический анализ крови и разберитесь, что с ним не так. В основе частых бронхитов у детей почти всегда лежат вирусные инфекции и снижение местного иммунитета – защитных свойств слизистых оболочек. Функционирование слизистых оболочек на 99 процентов связано с параметрами воздуха. Если воздух сухой, теплый, запыленный, то от болезней не вылечишься. Начните проветривать и гулять с утра до вечера, купите увлажнитель воздуха.

                                    – Ребенку полтора года. Больше полугода очень плохой сон. Днем он спит максимум полчаса.Ночью он просыпается каждые полтора часа с криком.

                                    — Если ребенок в полтора года плохо спит, значит, он неправильно проводит день. Больше физической активности, прохладная спальня – чисто, прохладно. Теплая пижама. Почему ребенок просыпается каждый час? То ли у меня во рту сухо, то ли какой-то зуд. Что-то его беспокоит. Поэтому гулять с таким ребенком весь день, вечером – прохладный душ, хорошо кормить – он быстро заснет.

                                    СОЗДАЙТЕ АУРУ Добра И ХОРОШИХ НОВОСТЕЙ

                                    – Ребенку 10 лет, уже года два-три периодически болит голова, иногда до тошноты. После сна все проходит. Врачи говорят, что все в порядке. Может мигрень в 10 лет?

                                    — Да, можно. Мигрень имеет специфические симптомы. Есть препараты, которыми ее лечат в детстве. Но диагноз «мигрень» ставит не доктор Комаровский по радио, а нормальный живой врач в поликлинике. Сходи к врачу.

                                    – дочке 4,5 года. Поставили диагноз аденоиды второй степени. С сентября постоянные боли в горле.Врач назначает промывание носа. Должен ли я использовать назальные спреи в этой ситуации?

                                    — Тысячи назальных спреев. Но вы должны понимать, что фармакологического лечения аденоидов не существует – нет волшебной таблетки – и аденоиды исчезнут. Все препараты для лечения аденоидов – это, как правило, «фуфломицины», коммерция и попытка нажиться. на вашу безграмотность. Если аденоиды мешают жить, их необходимо своевременно удалять.

                                    Можно ли сказать, что иммунитет зависит от позитивного настроения и характера?

                                    – Человек отличается от животных тем, что его состояние здоровья очень сильно определяется корой головного мозга. Когда мы улыбаемся, когда нас окружают хорошие классные люди, когда рядом нет стрельбы, когда нет болезней, когда мы слышим хорошие новости по телевизору, нам хочется жить. И когда мы слышим то, что сейчас, к сожалению, слышим , то восстанавливаться не хотим. Поэтому необходимо создать эту ауру добра и хороших новостей.

                                    Продолжить чтение

                                    Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

                                    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


                                    Настройка браузера на прием файлов cookie

                                    Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

                                    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
                                    • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
                                    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
                                    • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
                                    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

                                    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

                                    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


                                    Что сохраняется в файле cookie?

                                    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

                                    Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

                                    ведущих фирм проявляют творческий потенциал, рост своих ученых | Наука

                                    Процветающие биотехнологические и фармацевтические компании разделяют философию, когда речь идет о стимулировании инноваций, поощрении профессионального развития и уважении границ между работой и личной жизнью сотрудников. Эти работодатели знают, что стратегические союзы должны помочь им оставаться на переднем крае, и что ученым нужно предоставить пространство, свободу и ресурсы для изучения их самых рискованных и самых творческих идей. Они придают первостепенное значение профессиональному росту своих ученых и предоставляют им возможность добавлять технические навыки и расширять руководящие обязанности. И когда долгий день продвижения проектов заканчивается, эти рабочие места балуют своих исследователей праздничным отдыхом и простыми способами оставаться активными, здоровыми и на связи — и даже грузовиками с мороженым в летнее время.

                                    Открытие лекарств — поворотный момент в творчестве — стремление решить больше неудовлетворенных медицинских потребностей с помощью подходов, основанных на биологических, а не химических решениях. Эти препараты включают более сложные терапевтические средства на основе антител, а также препараты на основе матричной РНК (мРНК); иммуноонкологические терапевтические средства, которые борются с раком с помощью дизайнерских сверхзаряженных Т-клеток; и действительно персонализированная медицина, такая как противоопухолевые вакцины, предназначенные для борьбы с отдельными опухолями. В то же время применение биоинформатики больших данных к геномам человека, аннотированным за всю жизнь врачебными записями каждого пациента, выявляет новые цели и помогает адаптировать оптимальные методы лечения для пациентов.

                                    Современная эра биофармацевтических проектов требует уровня творческого мышления, выходящего далеко за рамки традиционного поиска лекарств на основе химии. Поэтому неудивительно, что ученые получают наибольшее удовлетворение от работы в отрасли, которая позволяет им проявить свои творческие способности, дает им свободу преследовать рискованные идеи и ресурсы для проверки этих идей на максимальной скорости. В этом году Наука Карьера Лучшие работодатели — лидеры биотехнологической, биофармацевтической и фармацевтической промышленности — преуспевают во всех трех областях.Они также разделяют приверженность инновациям, раздвигающим биологические границы, и отдают приоритет карьерному росту, который расширяет навыки и таланты сотрудников. И последнее, но не менее важное: они поощряют здоровый уровень интеграции работы и личной жизни, чтобы сотрудники оставались продуктивными и работали наилучшим образом.

                                    Наше видение сосредоточено на трех вещах: совместной работе, инновациях и переводе. Мы считаем, что приверженность всем трем направлениям — лучший способ заниматься наукой.

                                    • Джордж Янкопулос, президент ведущей компании Regeneron Pharmaceuticals

                                    Итоги этого года

                                    В число 20 лучших работодателей 2016 года входят компании с богатым опытом разработки лекарственных средств, которые освоили глобализацию, а также относительные новички с гибкими и быстрыми технологиями. темповые программы.Regeneron Pharmaceuticals (№ 1) возвращается на первое место в продолжающейся демонстрации силы, будучи названной № 1 или № 2 в течение последних шести лет. Технология полностью гуманизированных антител, разработанная 28-летней компанией, превратилась в дюжину таких кандидатов в клинических испытаниях. Компания Ново Нордиск, занявшая второе место в этом году, продолжает свою более чем 90-летнюю традицию лидерства в области лечения диабета. Базирующаяся в Багсверде, Дания, фирма использовала этот опыт в инновациях, которые помогают пациентам справляться с другими хроническими заболеваниями: гемофилией, нарушениями роста и ожирением.

                                    После того, как в прошлом году компания Moderna Therapeutics дебютировала на 7-м месте, она быстро поднялась в рейтинге и заняла 3-е место. Компании Moderna со штаб-квартирой в Кембридже, штат Массачусетс, всего пять лет, и в ней работает около 460 сотрудников. Но это центр инноваций, который быстро превратил свою технологическую платформу мРНК в две основанные на мРНК вакцины от инфекционных заболеваний, которые уже проходят ранние клинические испытания. Moderna ожидает, что к концу 2016 года несколько других внутренних и партнерских кандидатов пройдут испытания на людях.

                                    Каждый год лидерство в инновациях признается одним из основных факторов, определяющих деятельность ведущих фирм. Однако в этом году респонденты опроса также выбрали «четкое видение» как одну из самых сильных характеристик лучших работодателей. Джордж Янкопулос, президент Regeneron Pharmaceuticals, а также ее главный научный сотрудник и ученый-основатель, говорит, что успех Regeneron во многом обусловлен видением, которое не изменилось с момента основания компании Леонардом Шлейфером в 1988 году.

                                    «Наше видение сосредоточено на трех вещах: совместной работе, инновациях и переводе. Мы считаем, что приверженность всем трем направлениям — лучший способ заниматься наукой», — говорит он.

                                    20 компаний с наилучшей репутацией в качестве работодателей и три лучших ведущих качества для каждой компании, по мнению респондентов опроса 2016 года, проведенного для Science /AAAS Custom Publishing Office. Компании без рейтинга 2015 года не получили достаточного количества упоминаний для квалификации или не получили достаточно высокого рейтинга во время опроса 2015 года.

                                    Загрузить PDF

                                    5000 сотрудников компании поощряются к выдвижению идей на любом уровне, но они не могут стесняться, потому что строгая критика считается корпоративным спортом. «Двадцать, тридцать или сорок из нас вместе разработают идею в комнате, обсудив ее», — говорит Янкопулос. «Это даст нам наилучшие шансы на успех».

                                    Еще одна составляющая духа Regeneron — скорость. Это компания быстро говорящих и быстро делающих. «То, насколько быстро здесь происходят события, делает Regeneron отличным местом для работы», — говорит Христос Кирацоус, заместитель директора группы инфекционных заболеваний и технологий вирусных векторов.«Я здесь всего пять лет, и я видел, как четыре молекулы дошли до разработки, а некоторые даже до утверждения». По его словам, это редкость и удача в фармацевтической промышленности. Regeneron может похвастаться одним из самых высоких в отрасли процентом доходов от НИОКР, который в 2015 году составил чуть более 39%. следы и, конечно же, большие ставки на биологию.Компания Eli Lilly and Company (Lilly) из Индианаполиса поднялась в рейтинге на 4-е место с 11-го в прошлом году. Компания Lilly, основанная 140 лет назад, в прошлом году потратила 4,7 миллиарда долларов США на исследования и разработки — почти четверть своего дохода от продаж — и насчитывает 9000 сотрудников, занимающихся исследованиями и разработками в шести странах.

                                    Точно так же немецкий гигант Merck KGaA (Merck — не путать с американской фармацевтической фирмой Merck & Co. ) в этом году поднялся на шесть позиций и занял 11-е место.

                                    Белен Гарихо, главный исполнительный директор сектора здравоохранения Merck и член исполнительного совета, говорит, что за последние пять лет в Merck произошла крупная трансформация.Компания имеет глубокие немецкие корни, она была основана почти 350 лет назад, но, как объясняет Гарихо, она отвернулась от своего европоцентричного подхода. Он вырос за счет приобретений, которые привносят разнообразие культур, таких как недавнее приобретение гиганта в области наук о жизни и технологий Sigma-Aldrich за 17 миллиардов долларов США.

                                    После того, как компания Novartis не попала в рейтинг в 2015 году, она снова заняла 19-е место с новым научным руководством во главе — бывший онколог из Гарварда Джеймс Брэднер занял пост президента исследовательского подразделения компании, Института биомедицинских исследований Novartis (NIBR). в марте 2016 года.Компания, у которой, по словам сотрудников, всегда была налаженная работа, реализует 137 фармацевтических проектов в таких областях, как онкология, сердечно-сосудистые заболевания, офтальмология и неврология.

                                    Прежде всего, в эти компании привлекают талантливых и амбициозных исследователей творческие, передовые научные разработки, способные улучшить или спасти жизни пациентов. «В конечном счете, мы хотим стать единственной компанией, которая победит глобальное бремя диабета, — говорит Мадс Крогсгаард Томсен, главный научный сотрудник и исполнительный вице-президент Novo Nordisk.

                                    Thomsen говорит, что компания занимается факторами риска заболевания путем поиска новых целей, которые могли бы предотвратить или замедлить прогрессирование диабета 2 типа. Кроме того, они реализуют то, что он называет «святым Граалем» для лечения диабета, включая инвестиции в размере 2 миллиардов долларов США в преобразование инъекционных белковых препаратов в пероральные таблетки, а также разработку терапии стволовыми клетками, которые регенерируют или заменяют бета-клетки, секретирующие инсулин. в поджелудочной железе.

                                    ФОТО: © ПАВЕЛ ВАХРУШЕВ/SHUTTERSTOCK.COM; ИЛЛЮСТРАЦИЯ: © MULTISTOCK/SHUTTERSTOCK. COM

                                    Скачать PDF

                                    Ингредиенты для лучшего работодателя

                                    Каждый год Наука Карьера проводит опрос сотрудников биотехнологической, фармацевтической и биофармацевтической промышленности, чтобы выяснить, какие компании являются лучшими работодателями, и определить характеристики, которые делают их таковыми. В 2016 году 5 984 респондента приняли участие в онлайн-опросе, который был отправлен по электронной почте (см. Методология опроса).

                                    Большинство респондентов сообщили, что им от 30 лет и старше (85%), и что они проживают в Северной Америке или Европе (84%).Две трети респондентов имеют ученую степень и 10 и более лет опыта работы, а 60% сообщают о том, что они занимались исследованиями и разработками (см. вставку «Демография»).

                                    В этом году, как и в прошлом, сотрудники выбрали «инновационного лидера» в качестве главной характеристики лучшего работодателя. Другими характеристиками компании, которые повлияли на рейтинг, были «уважительное отношение к сотрудникам», наличие «лояльных сотрудников», наличие «ценностей рабочей культуры, соответствующих» ценностям сотрудников, «социальная ответственность» и наличие «ясного видения» (см. стол).

                                    В опросе 2016 года респондентов также просили определить, что делает компании худшими из худших. Компании получили низкие оценки за неэффективное руководство; слишком много иерархии, политики или бюрократии; и плохая этика, которая привела к причинению вреда пациентам или окружающей среде. Респонденты также упрекали компании в приоритетах, ориентированных на получение прибыли, и слабом развитии исследовательских проектов.

                                    На вопрос, что делает лучшие компании лучшими, сотрудники ответили, что лучшие фирмы действуют по принципу меритократии, обладают достаточными ресурсами, имеют надежные бренды и реагируют на запросы заинтересованных сторон.Компании, демонстрирующие эти качества, включают остальных из 10 лучших работодателей этого года: Vertex Pharmaceuticals (№ 5), Novozymes (№ 6), Genentech (№ 7), Alexion Pharmaceuticals (№ 8), Biocon (№ 9). и Roche (№ 10) (полный список 20 лучших см. в таблице).

                                    Инновации по-крупному, творческий подход

                                    Последние 14 лет в списке лучших работодателей доминируют компании, занимающиеся инновационными решениями в области здравоохранения и биотехнологий. В этом году ведущие компании продвигают инновации еще дальше, ища творческие биологические решения, которые сделают их методы лечения рака, диабета и болезни Альцгеймера по-настоящему нестандартными — или, скорее, пузырек с таблетками.Неудивительно, что компании, которые культивируют научное творчество и поощряют исследователей следовать туда, куда ведет их любопытство, привлекают и удерживают лучшие научные кадры.

                                    Ученые Moderna мотивированы миссией компании использовать науку о мРНК для создания преображающих лекарств, в том числе лекарств, которые могут заменить отсутствующие или поврежденные внутриклеточные белки. Терапевтические препараты мРНК Moderna, изготовленные из запатентованных аналогов нуклеотидов, могут генерировать любой мыслимый белок с использованием собственных клеточных механизмов организма.

                                    Керри Бененато, заместитель директора по химии в Moderna, была захвачена «проблемами, с которыми мы столкнулись, зная, что то, что написано в литературе, недостаточно хорошо, поэтому нам нужно было сделать несколько довольно изобретательных открытий». Ее энтузиазм по поводу науки, которой она занимается, заразителен: за два года работы в Moderna она наняла шестерых друзей и коллег.

                                    Regeneron считает, что «инновациям можно научить следующее поколение», — говорит Янкопулос.Он отмечает, что многие ведущие технологические новаторы компании «по-прежнему каждый день находятся в конференц-зале, помогая взращивать новых великих ученых».

                                    Yancopoulos цитирует Praluent, новый препарат Regeneron для снижения уровня холестерина, как пример нового поколения препаратов, разработанных с использованием множества данных о генетике человека. Центр генетики Regeneron, открывшийся в 2014 году, уже содержит последовательности более 100 000 экзомов человека — частей генома, кодирующих белки, — связанных с электронными медицинскими записями пациентов из системы здравоохранения Гейзингера и других сотрудников.

                                    В прошлом году Novartis инвестировала 8,9 млрд долларов США в исследования и разработки, поддерживая более 11 000 сотрудников, занимающихся исследованиями и разработками по всему миру. Энн Тейлор, глобальный руководитель программного офиса NIBR, говорит, что компания культивирует культуру, которая прислушивается ко всем и обращается к множеству источников для следующей отличной идеи — от внешних сотрудников до постдоков.

                                    В качестве руководителя группы в Биологическом центре NIBR в Базеле, Швейцария, Дарко Скегро разрабатывает биспецифические антитела для борьбы с раком и модифицирует антитела для преодоления устойчивости к раку.«Обычно антитела против рака рекрутируют естественные клетки-киллеры, но можем ли мы переключить антитела таким образом, чтобы они внезапно рекрутировали другие типы клеток, чтобы они пришли и убили раковые клетки?» он спросил. Когда его группа поделилась этой рискованной идеей с коллегами в Базеле и Кембридже, они сразу же получили зеленый свет, чтобы попробовать ее. «Вот почему Novartis — отличное место для работы — у меня есть свобода исследовать вещи и вводить новшества — и при поддержке многих других групп».

                                    Альянсы укрепляют инновации

                                    Путем слияний и поглощений, партнерства или академического сотрудничества ведущие работодатели находят стратегические способы заставить альянсы работать на благо своего портфолио. И Regeneron, и Moderna представляют собой относительно небольшие, но молниеносные компании, чьи платформенные технологии превратились в клинические программы, быстро развивающиеся. Ключом к успеху обеих компаний стало определение подходящих партнеров для проектов по разработке лекарств.

                                    ФОТО: © PESHKOVA/SHUTTERSTOCK.COM

                                    Скачать PDF

                                    Этим летом Moderna объявила о двух крупных сделках с фармацевтическими партнерами для продвижения проектов в области онкологии и муковисцидоза.Сделка на 200 миллионов долларов США с американской компанией Merck & Co. позволит объединить иммуноонкологический препарат Keytruda от Merck & Co. с персонализированными противораковыми вакцинами на основе мРНК, производимыми Moderna. Moderna также объединилась с Vertex Pharmaceuticals (5-е место в списке этого года) для обнаружения и разработки мРНК-терапии для пациентов с муковисцидозом, у которых есть дисфункциональный белок трансмембранного регулятора проводимости муковисцидоза (CFTR) или он вообще отсутствует.

                                    Оба этих сотрудничества сочетают в себе глубокие знания в области болезней и опыт партнера с основной технологией Moderna, чтобы попытаться разработать революционные методы лечения, говорит Стивен Хоге, президент Moderna.«Мы знаем нашу технологию. Но мы также понимаем, что нам нужна помощь от тех, кто больше всего знает о данной болезни. Поэтому мы ищем партнеров везде, где, по нашему мнению, это может повысить наши шансы на доставку лекарств пациентам».

                                    Лидеры Moderna любят подчеркивать, что хотя компания чувствует себя уютно и молодо, как стартап, у нее есть ресурсы для гораздо более масштабной деятельности. По состоянию на сентябрь Moderna располагала наличными активами в размере 1,4 миллиарда долларов США — в немалой степени благодаря этим альянсам — для инвестирования в свой большой и разнообразный портфель разработки лекарств.«Нам не нужно ограничивать себя. Имеющаяся у нас финансовая поддержка позволяет нам двигаться быстро и проводить правильные эксперименты», — говорит Бененато. «Это уникально в Модерне».

                                    Янкопулос также называет альянс Regeneron с Geisinger Health Systems «идеальным браком». Regeneron получает доступ к высококачественным медицинским записям и ДНК пациентов, а взамен Geisinger получает подробную генетическую информацию, которая помогает им улучшать и прогнозировать медицинское обслуживание пациентов.

                                    Растяжка делает карьеру гибкой

                                    В целом удовлетворенность работой среди работников научно-исследовательской отрасли высока.Только пятая часть респондентов заявила, что они, вероятно, будут искать новую должность в следующем году. Но более половины из них (54%) назвали «карьерный рост», «профессиональный рост» или «поиск новых впечатлений» причиной своего потенциального переезда. Ведущие фирмы-работодатели поддерживают занятость сотрудников и бросают им вызов, угождая беспокойным умам исследователей.

                                    «Все ученые любят узнавать что-то новое, а люди учатся по-разному, — отмечает Адам Киевман, глава отдела управления талантами Moderna. И поэтому Moderna University, программа профессионального развития компании, расширяет свои предложения с каждым днем. Этой осенью сотрудники могут выбирать между 30-часовой серией клинических лекций об эволюции генома, семинарами по созданию профессионального бренда и беседами о ведущих членах группы через изменения.

                                    Lilly обслуживает ученых, которые хотят подняться по карьерной лестнице, не становясь при этом страшным словом на букву «М» — менеджментом. Техническая лестница позволяет исследователям занимать больше руководящей должности в компании и продвигаться по службе за свои технические знания.

                                    Выдающийся научный сотрудник Генри Брайант, иммунолог, достиг вершины технической лестницы в Lilly, заняв должность, эквивалентную старшему вице-президенту. По его словам, он может влиять на направление и стратегию компании, но по-прежнему проводит большую часть своего времени, «придумывая эксперименты, чтобы решить ключевой вопрос, наблюдая за результатами и реконструируя».

                                    Он также говорит, что широта охвата Lilly позволяет сотрудникам совершать горизонтальные или географические перемещения, которые способствуют их профессиональному росту.Сотрудники могут работать по обмену на срок от шести месяцев до двух лет в другом научно-исследовательском центре, таком как Нью-Йорк, Сан-Диего, Шанхай, Великобритания или Испания. «Работая над диабетом в Китае, сотрудники видят, что там это совсем другое заболевание, чем в Соединенных Штатах», — говорит Брайант.

                                    Сотрудники Merck имеют возможность работать в трех секторах бизнеса компании: здравоохранение, медико-биологические науки и производство материалов компании, говорит Кай Бекманн, главный административный директор.Например, специалисты по материалам и медики сотрудничают в проекте LicriEye, целью которого является разработка метода лечения катаракты с использованием линзы на основе жидких кристаллов.

                                    Глобализация компании Merck означает, что компания уделяет первостепенное внимание разнообразию и инклюзивности среди своих сотрудников, которые представляют 122 разных национальности. По словам Гарихо, компания Merck рассматривает гендерное, возрастное и культурное разнообразие как источник конкурентного преимущества, позволяющего собрать правильную группу людей за стол переговоров для решения сложных задач.Женщины составляют 41% рабочей силы Merck и занимают 27% высших руководящих должностей компании.

                                    «Наш кадровый резерв вырос, чтобы соответствовать динамике нашего бизнеса», — говорит Гарихо. Поддержание вовлеченности и продуктивности этого кадрового резерва при одновременном предотвращении выгорания и стресса является ключом к удержанию лучших ученых. «Мы не только семейная компания, но и компания, ориентированная на семью. Баланс между работой и личной жизнью является одним из наших главных приоритетов и одним из наиболее важных факторов, привлекающих людей в Merck сегодня.»

                                    Содействие лучшему балансу

                                    Тот факт, что растущая часть рабочей силы отрасли приходится на поколение миллениалов, означает, что многие сотрудники выросли со смартфоном в руках и привыкли поддерживать постоянную связь со своими коллегами по работе, семьей, и друзья. Эта связь может быть как благом для производительности, так и быстрым путем к выгоранию. Лучшие работодатели выяснили, как помочь своим исследователям интегрировать их работу и личную жизнь, чтобы проекты продолжались, а свободное время было защищенным и спокойным.

                                    Руководители компаний Regeneron и Novo Nordisk осознают, что быстрый темп работы сопряжен с повышенным риском утомления сотрудников, поэтому они рекомендуют по возможности уделять личное время и работать из дома. Они также устанавливают жесткие границы в отношении выходных и отпусков.

                                    Загрузить PDF

                                    Два года назад Novartis ввела в свой годовой календарь несколько вынужденных простоев, зарезервировав две недели в середине лета для общекорпоративного перерыва от официальных встреч.Этот «период омоложения» дает сотрудникам возможность заняться второстепенным проектом, погрузиться в поиск литературы или просто пообщаться с коллегами за обедом. Этим летом Скегро использовал свое время, чтобы «покопаться в интеллектуальной собственности, посмотреть, что делают наши конкуренты, и посмотреть, что мы можем сделать, чтобы стать сильными конкурентами».

                                    Lilly, как и многие ведущие работодатели, предлагает традиционные варианты баланса между работой и личной жизнью: гибкий график, неполный рабочий день, разделение работы и детский сад на месте для поддержки работающих родителей.Но, по словам Терри Грант, вице-президента по персоналу глобальных исследований и разработок, именно удобства на территории кампуса больше всего помогают сотрудникам снять стресс. Сотрудники Индианаполиса бегают по беговой дорожке, играют в футбол или пьют пиво во внутреннем дворике паба REVeli; а у сотрудников Сан-Диего есть место для хранения досок для серфинга. «Когда вы действительно обдумываете проблему, нет ничего лучше, чем иметь возможность выйти и побегать в течение 15 минут», чтобы буквально вытолкнуть идею на поверхность, говорит научный сотрудник Lilly Дженнифер Хауэлл.

                                    Другие способы, с помощью которых работодатели помогают работникам сохранять баланс, включают предоставление дополнительного ухода за больными детьми или престарелыми родственниками (Novartis), еженедельные поставки свежих фруктов (Novo Nordisk) и консультирование на месте, когда сотрудники чувствуют себя подавленными жизненными трудностями (Merck). Компания Novo Nordisk со штаб-квартирой в Дании поддерживает определенный баланс между работой и личной жизнью, поддерживаемый национальной политикой: компания предлагает годовой полностью оплачиваемый отпуск по беременности и родам для молодых матерей (или совместно с молодыми отцами) и 37-часовую рабочую неделю.Когда старший научный сотрудник Шань Рен взяла отпуск по уходу за вторым ребенком, она, естественно, беспокоилась, что может потерять место в своей команде по мере продвижения проекта. Вместо этого, по ее словам, ее группа помогла ей перейти и проинформировала ее о новых аспектах, которые развились. «Оглядываясь назад, я не чувствовала, что что-то потеряла. Это был год радости» — быть дома с новорожденным ребенком, — говорит она.

                                    Дело в мелочах

                                    Уважение времени сотрудников, поддержка работающих родителей и поощрение здорового и активного образа жизни являются нормой для лучших работодателей.Это проверенный рецепт для привлечения лояльных сотрудников, желающих работать в социально ответственных компаниях. Но это также мелочи, которые компании предоставляют в качестве привилегий или забавных преимуществ, которые делают сотрудников счастливыми и мотивируют их нанимать своих коллег.

                                    И у Novartis, и у Lilly есть сетевые группы сотрудников, которые объединяют людей с общими интересами, целями или опытом. Выдающийся научный сотрудник Цзирон Лу является частью Сети китайской культуры в Lilly, насчитывающей 700 человек: «Это одна из вещей, которая заставляет вас чувствовать, что Lilly — это семья.»

                                    Семейный фургончик с мороженым, который летом каждый вторник подъезжает к Кембриджу, чтобы угостить сотрудников Novartis. Ежедневные обеды Moderna с такими блюдами, как aloo mutter, бразильское чоризо и салат из свеклы из лебеды, заставляют рабочих вместе преломлять хлеб. и обмен идеями. А удачливые победители лотереи Regeneron могут занять лучшие места на бейсбольном матче New York Yankees или Mets со своими детьми. — и старшеклассники (Novartis) или отправка сотрудников на двухнедельные глобальные сервисные проекты (Lilly). Лу типичен для респондентов, которые ищут компании, ценности которых отражают их собственные: «Честность, уважение к людям и превосходство — я очень горжусь тем, что работаю в компании, которая разделяет эти ценности».

                                    Конечно, самым важным «бонусом» для исследователей является ощущение того, что их наука действительно меняет мир к лучшему.

                                    В компании Novo Nordisk старший научный сотрудник Рен работает над проектом компании по производству пероральных препаратов в Молёве, Дания. Ее привлекла новаторская задача стабильного помещения больших пептидов или белков в таблетированную форму, которая могла бы безопасно усваиваться, но не разрушаться в кишечнике.По ее словам, либо GLP-1 (глюкагоноподобный пептид-1), стимулирующий секрецию инсулина, либо инсулин в таблетированной форме произведут революцию в лечении пациентов, которым требуется несколько инъекций в день.

                                    Рен признает, что многие люди скептически относятся к возможности изготовления таблеток из пептидных препаратов. Ее команда не только верит, что это сработает, но и что именно они создадут первую успешную формулу. «Мы систематически и серьезно работаем над этой концепцией», — говорит она, и люди часто спрашивают ее, когда могут быть одобрены первые таблетки.«Осознание того, что я делаю что-то, что принесет большие перемены стольким пациентам, заставляет меня по-настоящему гордиться».

                                    Презентация на тему «Библейские предания. Сотворение мира». Создание презентации мира к уроку по орке на тему Человек — любимое творение Бога презентация

                                    слайд 2

                                    слайд 3

                                    Для древних греков Хаос – это «зияющее пространство», существовавшее гораздо раньше Вселенной. Хаос состоял из тумана и тьмы.Под действием времени туман Хаоса от вращательного движения принял овоидную форму, содержащую в себе эфир. От стремительного движения яйцо созрело и разделилось на две половинки, из которых возникли земля и небо.

                                    слайд 4

                                    От быстрого движения яйцо созрело и разделилось на две половинки, из которых возникли земля и небо.

                                    слайд 5

                                    Айвазовский Иван Константинович «Сотворение мира»

                                    слайд 6

                                    Слайд 7

                                    Слайд 8

                                    Там, где была суша, были море и воздух.И нельзя было стоять на суше или плыть по воде. Воздух был лишен света, и ничто не хранило формы. Все было еще в борьбе, потом в единой массе. Холод боролся с жаром, сухость боролся с влагой, Невесомое, твердое с мягким боролось с тяжелым. «Метаморфозы» Овидия

                                    Слайд 9

                                    Слайд 10

                                    С древних времен человек задумывался над вопросом «Как появился мир и все, что существует в мире?» Происхождение мира — одна из центральных проблем естествознания.Философы утверждают, что возникновение жизни есть результат творческого акта духовного начала, «высшего разума», Бога.

                                    слайд 11

                                    Другие, в отличие от этого, считают, что жизнь материальна по своему происхождению и возникла естественным образом на основе общих законов природы.

                                    слайд 12

                                    Посмотреть картину Пьетро да Кортона «Торжество божественного промысла» Изображенные фигуры людей и животных, включенные в пейзажную композицию, выглядят маленькими среди величественных, «космических» пейзажей

                                    слайд 13

                                    Фреска Микеланджело «Отделение света от тьмы» — на ней изображен библейский сюжет — сотворение мира — гимн физической и духовной красоте человека, утверждение его безграничных творческих возможностей

                                    Слайд 14

                                    Айвазовский Иван Константинович «Хаос. Сотворение мира» На полотне Айвазовского «Хаос. Сотворение мира» тьма передана с необычайной выразительностью, постепенно сменяется светом. Библия — Книга Книг — по-своему рассказывает нам о сотворении мира.

                                    слайд 15

                                    Давайте прочитаем первые строчки великой книги. «В начале сотворил Бог небо и землю. Земля была безвидна и пуста, и тьма над бездною, и Дух Божий носился над водами.И сказал Бог: «Да будет свет!» И был свет. И увидел Бог свет, что он хорош, и отделил Бог свет от тьмы. И назвал Бог свет днем, а тьму ночью. И был вечер, и было утро: день один. И сказал Бог: «Да будет твердь!» и стал твердым. И назвал Бог твердь небом. Это был второй день. И сказал Бог: «Да соберется вода в одно место, и да явится суша!» Так и стало. И назвал Бог сушу землею, а собрание вод назвал морями.И сказал Бог: «Да произрастит земля траву, траву и деревья!» Так и стало. Это был третий день. И сказал Бог: «Да будут на небе светила!» И Бог создал солнце, луну и звезды. На четвертый день Бог сказал: «Да соберется вода в одно место, и да явится суша!» Так и стало. И назвал Бог сушу землею, а собрание вод назвал морями. И сказал Бог: «Да произрастит земля траву, траву и деревья!» Так и стало. Это был третий день.И сказал Бог: «Да рождает вода рыб, и да летают по небу птицы!» И создал Бог разных рыб и птиц. Это был пятый день. И сказал Бог: «Да будут на земле разные виды животных!» Так и стало. Наконец, Бог создал человека. Это был шестой день. И Бог посмотрел на все, что Он создал. И я увидел, что все очень хорошо. В седьмой день Бог почил от всех Своих дел, благословил седьмой день и освятил его. Последнее творение было самым замечательным.Как сказано в Библии, Бог создал человека по Своему образу и подобию.

                                    слайд 16

                                    История шести дней творения открывает первую книгу Библии, Книгу Бытия. До Микеланджело живописцы уже брались за эту тему, но очень редко. Никто не мог изобразить Бога и сотворение неба и земли, дня и ночи, отделение земли от воды, сотворение небесных светил, живую природу и, наконец, человека, не погрешив против истины. Более того, только очень образованные, мудрые и, главное, святые люди брались даже просто рассуждать на столь глубокие темы.

                                    Слайд 17

                                    Микеланджело, конечно, осознавал меру своей ответственности. Поэтому при всем богатстве росписи он практически не давал никаких подробностей.

                                    Слайд 18

                                    На переднем плане только самое главное — мысль о том, что все на земле создано Богом, развивалось и существовало по Его непостижимому замыслу.

                                    Слайд 19

                                    Микеланджело начал свою гигантскую работу в 1508 году и закончил в 1512 году. Он расписал потолок площадью 800 кв. м, изобразил 300 фигур, работал без помощников, изнемогая от головных болей, усталости, забывая о сне и отдыхе.

                                    Двойственность человеческой природы.

                                    Священное Писание говорит, что сотворение человеческой природы не заканчивается сотворением человека. В Быт. 1:27 говорится: «И сотворил Бог человека (единственное число), мужчину и женщину сотворил их (множественное число). Почему в Библии сказано, что женщина сделана из ребра? Еврейское слово села не обязательно означает «ребро», оно может означать «бок, бок». Не следует полагать, что автор Быт. 2:18 -23 попытался объяснить появление жены в биологическом смысле.Это символическое повествование, которое в наглядной форме выражает идею двойственного единства человеческой природы.Человек есть две человеческие ипостаси, существующие в единстве природы Человеческая природа принципиально несовершенна в сексуальной изоляции, и в этом смысле ни мужчина, ни женщина по отдельности не представляют полноты человеческого существования.Эта истина связана с важным для учения о человеке вопросом о браке.

                                    Ткачева Татьяна Геннадьевна Учитель истории, обществознания, кубановедения, Основ православной культуры Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение общеобразовательная школа № 14 с. Соколовский Гулькевичского района Краснодарского края ТВОРЕНИЕ ПЕРВЫХ ЛЮДЕЙ Жизнь первых людей в раю. Изгнание Адама и Евы из рая.

                                    слайд 2

                                    СОЗДАНИЕ ПЕРВОГО ЧЕЛОВЕКА  И сказал Бог: сотворим человека по образу Нашему и по подобию Нашему; и да владычествуют они над рыбами морскими, и над птицами небесными, и над скотом, и над всею землею, и над всеми гадами, пресмыкающимися по земле.

                                    слайд 3

                                    КАК БОГ СОЗДАЛ ПЕРВЫХ ЛЮДЕЙ Бог создал человека из праха земного, то есть из вещества, из которого был создан весь материальный мир. И вдунул в лицо ему дыхание жизни, то есть дал ему свободный, разумный, живой и бессмертный дух; и стал человеком с бессмертной душой.  Таким образом, мы принадлежим двум мирам: телом – миру зримому, материальному, а душой – миру невидимому, духовному, небесному. Бог дал первому человеку имя Адам, что означает «взятый от земли». 

                                    слайд 4

                                    ЖИЗНЬ ЛЮДЕЙ В РАЙ Для него Бог вырастил Рай на земле, то есть прекрасный сад и посадил в нем Адама, чтобы он возделывал Вал и хранил его. В раю росли всевозможные деревья С прекрасными плодами, среди которых были два особенных дерева: Одно называлось деревом жизни, а другое называлось деревом познания добра и зла. Сила, защищающая человека от болезней и смерти.На дереве познания добра и зла заповедал Бог, то есть заповедал Человеку: «От всякого дерева в раю ты можешь есть, а от дерева познания Добра и Зла не ешь. Потому что, если ты съешь его, ты умрешь».

                                    слайд 5

                                    ЖИЗНЬ ЛЮДЕЙ В РАЙ  Тогда, по повелению Божию, Адам дал имена всем зверям и птицам небесным, но не нашел среди них такого друга и помощника, как он сам. Затем Бог усыпил Адама крепким сном; и когда он заснул, он взял одно из его ребер и покрыл это место плотью (телом).И создал Бог жену из ребра, взятого у человека. Адам назвал ее Евой, то есть матерью людей.  Создав жену из ребра первого человека, указал нам Бог. Что все люди произошли от одного тела и души, они должны быть едины — любить и заботиться друг о друге.

                                    слайд 6

                                    ЖИЗНЬ ЛЮДЕЙ В РАЙ  Жизнь людей в раю была полна радости и блаженства. Их совесть была спокойна, их сердце было чисто, их ум был ясен.Они не боялись ни болезней, ни смерти, им не нужна была одежда. Во всем у них был достаток и довольство. Их пищей были плоды райских деревьев.  Бог дал людям полную свободу: любить Его или не любить. Без свободы не может быть любви. А любовь проявляется в радостном исполнении желаний того, кого любишь. Но люди были менее совершенны, чем ангелы, и Бог научил их любви. Выполняя заповедь, они могли показать свою любовь к Нему.

                                    Слайд 7

                                    ПЕРВЫЕ ЛЮДИ ИЗ РАЯ Но дьявол начал лгать, чтобы соблазнить Еву. Он сказал: «Нет, ты не умрешь; но знает Бог, что если будете есть, то сами будете как боги и познаете добро и зло». Дьявольская речь подействовала на Еву. Она посмотрела на плоды, они были приятны для глаз, хороши в пищу и давали знания. Она сорвала плод с запретного дерева и ела; потом дала мужу своему, и он ел. Люди поддались искушению дьявола, нарушили заповедь или волю Божию — согрешили, впали в грех.Так произошло падение человека. Когда первые люди согрешили, им стало стыдно и страшно, как это бывает со всеми, кто делает плохие дела. Они сразу заметили. Что они голые. Они делали себе одежду из листьев.

                                    Слайд 8

                                    ЭКСПЛУАТАЦИЯ АДАМ И ЕВА ИЗ РАЯ. Диавол позавидовал райскому блаженству первых людей и задумал лишить их райской жизни. Для этого он вошел в змея и спрятался в ветвях дерева познания добра и зла.И когда Ева прошла рядом с ним. Дьявол стал внушать ей есть плоды запретного дерева. Он хитро спросил Еву: «Правда ли, что Бог не позволил тебе есть ни с какого дерева в раю?» «Нет, — ответила Ева змею, — мы можем есть плоды со всех деревьев, только плоды с дерева, которое посреди рая, сказал Бог, не ешь и не прикасайся к ним, чтобы тебе не умереть»

                                    Слайд 9

                                    ЭКСПЛУАТАЦИЯ АДАМА И ЕВЫ ИЗ РАЯ Первородный грех Адама и Евы со всеми его последствиями перешел через естественное рождение на все их потомство, то есть на все человечество, на всех нас.Вот почему мы рождаемся грешниками и имеем все последствия греха: болезни, горе и смерть.  Через свою греховность люди утратили общение с Богом, Он уже не являлся им видимым образом, как в раю.  Люди утратили райскую блаженную жизнь: земля перестала давать урожай на полях, вместе с добрыми плодами стали расти сорняки, животные стали бояться человека, стали дикими и хищными. Были болезни, страдания и смерть. 

                                    Чтобы использовать предварительный просмотр презентаций, создайте учетную запись Google (аккаунт) и войдите: https://accounts.google.com


                                    Подписи к слайдам:

                                    СОЗДАНИЕ МИРА

                                    ДЕНЬ ПЕРВЫЙ В начале сотворил Бог небо АНГЕЛ 1

                                    ДЕНЬ ПЕРВЫЙ В начале сотворил Бог небо и землю, но земля была безвидна и пуста, и тьма была над бездною, и Дух Божий носился над водами 1 1

                                    ДЕНЬ ПЕРЬЕЙ И сказал Бог: да будет свет. один

                                    И стал CVE T

                                    ДЕНЬ ВТОРОЙ И отделил воду, которая под твердью, от воды, которая над твердью.2

                                    ДЕНЬ ВТОРОЙ И сотворил Бог твердь 2 1

                                    ДЕНЬ ВТОРОЙ И отделил воду, которая под твердью, от воды, которая над твердью. NOT BO 2

                                    И сказал Бог: да соберется вода, которая под небом, в одно место, и да явится суша. ДЕНЬ ТРЕТИЙ ЗЕМЛЯ ЗЕМЛЯ ВОДА 3

                                    ДЕНЬ ТРЕТЬИХ И ЗЕМЛЯ ПРИНЕСЛА РАСТЕНИЕ, ТРАВУ И ДЕРЕВО, ПРИНОСЯЩЕЕ ПЛОДОВЫЕ РАСТЕНИЯ 3

                                    ДЕНЬ ЧЕТВЕРГ 4

                                    И сотворил Бог два великих светила: светило большее, чтобы управлять днем, и меньший свет, чтобы управлять ночью; ДЕНЬ ЧЕТВЕРТЫЙ ЧЕТЫРЕ СОЛНЦА ЦЕЛИ НА 4

                                    И сотворил Бог два великих светила: светило большее, чтобы управлять днем, и светило меньшее, чтобы управлять ночью; и ЗВЕЗДА ЗВЕЗДЫ ДЕНЬ 4

                                    ДЕНЬ ПЯТЫЙ И сотворил Бог рыб великих и всякую душу пресмыкающихся, которых произвела вода, И сотворил Бог всякую птицу пернатую РЫБЫ-ПТИЦЫ 5

                                    ДЕНЬ ШЕСТОЙ И сотворил Бог зверей земных , и скот, и все гады земные ЗВЕРИ 6

                                    И сотворил Бог человека по образу Своему, по образу Божию сотворил его ДНЕЙ 6


                                    По теме: методические разработки, презентации и заметки

                                    контрольная по миру по всему миру I четверть 2 класс

                                    контрольная по теме «Из чего состоят все предметы.Календарь и компас. Земля имеет форму шара. Глобус — это модель Земли. Земля в космосе» по программе «Школа 2100»…

                                    «Книга – великое чудо, созданное человеком»

                                    Урок чтения ориентирован на учащихся гимназий с использованием проектной деятельности. Цель занятия: 1. Познакомить с историей развития книги.2….

                                    Урок окружающего мира «Как жить в мире людей?» 4 класс

                                    Урок окружающего мира по учебнику Вахрушев А.А., (комплект «Школа 2100»). 1 строка. Освоение картины мира: объяснить, что такое правила поведения. Познакомить учащихся с основными понятиями…

                                    Презентация из цикла «Священная библейская история Ветхого Завета» о сотворении Богом мира и человека по учебнику архиепископа Вениамина (Пушкаря), митрополита Владивостокского и Приморского (3,9 МБ, pptx).

                                    Дополнительные адреса для скачивания:
                                    Все презентации этой серии можно скачать или перенести в свои аккаунты (по отдельности или в виде архива) на Яндекс.Диск и [электронная почта защищена]

                                    Сканы некоторых слайдов. Увеличенное изображение открывается в отдельном окне по клику на картинку:

                                    Содержание слайда презентации.

                                    Слайд 2. Джеймс Тиссо. сотворение мира . Сотворение Богом мира и человека
                                    Книга Бытия
                                    Бог есть Творец
                                    мир ангельский
                                    Мир материальный
                                    1 Слайд 3.4 Книга Бытия . Эта книга называется так потому, что рассказывает нам о том, как «все начало быть, что начало быть», т.е. как Бог призвал видимый мир из небытия в бытие.
                                    Слайд 4. Моисей пишет книгу Бытие . Автором этой Священной Книги является великий пророк и вождь еврейского народа Моисей. Скрытый текст : Он написал эту книгу, чтобы увековечить историю происхождения мира и изначальную судьбу человечества, когда устные предания об этом стали искажаться и даже постепенно исчезать.
                                    слайд 5 . Все повествование книги Бытия, которое содержит 50 глав , можно разделить на три основных и существенных частей .
                                    Первый (1-3 гл.) рассказывает о происхождении мира и падении предков.
                                    Второй (4-11 гл.) излагает историю первобытного падшего человечества, его гибель в водах потопа, размножение и расселение по миру послепотопного человечества.
                                    В третьем (12-50 гл.) содержится история жизни еврейского народа.
                                    Слайд 6. Айвазовский И.К. Создание мира. Хаос . Бог — Творец мира и человека .
                                    Слайд 7. Фотосъемка природы . Красота, гармония, разнообразие Скрытый текст : Мир, рассматриваемый в его внешней красоте и внутренней гармонии, есть дивное творение, изумляющее гармонией своих частей и дивным разнообразием своих форм.
                                    Слайд 8. Космическая фотография . «Космос» — красота, заказ . Скрытый текст : Еще древнегреческий гений, созерцая разумное устройство мироздания, дал ему имя космос (космос), что означает красота, порядок.
                                    Слайд 9 . Познание мира — познание Творца . Скрытый текст : Познавая бескрайние глубины космоса через телескопы и радиотелескопы и одновременно проникая в мир элементарных частиц, современная наука видит печать незримого Надземного Разума на всем видимом.
                                    Слайд 10. Икона «Троица». Преподобный Андрей Рублев, первая половина 15 века год. Творец мира и человека — Бог . Скрытый текст : Именно этот Надмирной или Божественный Разум, открывающийся в мире и через мир человеку, по Священному Писанию является не только устроителем этого мира, но и его Творцом.
                                    Слайд 11. Книга Библии . Святая Библия на первых своих страницах открывает нам тайну происхождения этого видимого мира.
                                    слайд 12. Айвазовский И.К. сотворение мира . Время есть форма бытия материального мира . «В начале сотворил Бог небо и землю» (Быт. 1:1), — говорит летописец Моисей. Скрытый текст : В этих немногих словах выражена необъятная по своей глубине истина о том, что все сущее на небе и на земле, а значит, первобытная материя, имеет свое начало. Слово «в начале» указывает на то, что мир не вечен, он призван из небытия быть Богом во времени, вернее, с самим временем.Времени до возникновения мира не было, потому что время есть форма бытия материального мира.
                                    слайд 13. Фотография Земли из космоса . Причина возникновения мира — воля Бога . Скрытый текст : Бог — естественная причина Вселенной, и без Него ничего не могло бы произойти. Мир не мог возникнуть ни из «случайности», ни из «самопроизвольного зарождения». Оно произошло от свободного решения воли всемогущего Бога, благоволившего из небытия призвать мир к временному бытию.
                                    Слайд 14 . Это решение вытекало исключительно из любви и доброты Творца, чтобы дать творению возможность насладиться этими величайшими свойствами Его Бытия.
                                    слайд 15. Гюстав Доре. Создание света . В начале было Слово, и Слово было у Бога, и Слово было Бог (Иоанна 1:1). Итак, «…Он», по словам боговдохновенного псалмопевца, «сказал, и сделалось, Он повелел, и явилось» все (Пс. 32:9). Скрытый текст : По толкованию святых отцов Церкви, творческое Слово Божие следует понимать как Вторую Ипостась Святой Троицы — Сына Божия, через Которого, по словам евангелиста Иоанна Богослова, Богослов, «все… начало быть, и без Него начало быть ничто, что начало быть» (Ин.1,3). Поскольку во втором стихе первой главы книги Бытия говорится об участии Святого Духа в творении, можно думать, что Бог действовал в сотворении мира как вечная Троица.
                                    слайд 16 . Мир создан из ничего . Скрытый текст : Сотворение мира из ничего или из небытия — одна из основных истин христианской веры. Хотя в Библии нет слова «из ничего», но оно подразумевается уже на первых ее страницах. Это слово впервые было введено в обиход святыми отцами и учителями Церкви, в противовес господствовавшему тогда дуалистическому мировоззрению многих языческих мыслителей, признававших, наряду с вечным Богом, вечно существующую материю, из которой Бог затем сотворил различные формы видимого мира. В свою очередь языческие мудрецы возражали против монистического взгляда святых отцов и говорили, что из ничего нельзя создать что-то. Св. Василий Великий в ответ на их возражение разъяснял, что Бог сотворил мир не из ничего в буквальном смысле этого слова, а из «силы Своей». Значит, надо понимать слово «из ничего» в том смысле, в каком его употребляли святые отцы. Поскольку в Боге нет изменений, можно думать, что образ мира всегда существовал в Его Разуме.Иными словами, идея мира всегда существовала у Бога, но потом, по Его всеблагой воле, получила свое осуществление во времени.
                                    слайд 17. Небесные силы (фрагмент росписи Михайловского Златоверхого собора в Киеве) . ангельский мир .
                                    Слайд 18. Коллаж — земля и небо . Бог создал два мира: небесный, земной . Скрытый текст : Библия дает нам очень мало информации о духовном мире.Из контекста всей Библии можно вывести следующее представление о духовном или ангельском мире.
                                    слайд 19. Священник Александр Егоров. Силы небесные . Ангельский мир был создан Богом раньше мира материального. Скрытый текст : Об этом ясно говорит нам Сам Господь в книге Иова: «Когда звезды были (сотворены), все Ангелы Мои славили Меня громким голосом» (Иов 38:7).
                                    слайд 20. Рисунок ангела . Ангелы — существа думающие, желающие, чувствующие подобные людям, но бестелесные .
                                    слайд 21. Гюстав Доре. Ангельская феерия («Потерянный рай»). Ангелов очень много.
                                    слайд 22. Гюстав Доре. «Потерянные небеса ». По своим совершенствам ангелы неодинаковы и делятся на несколько степеней. Низший из ангелов по своей природе выше самого одаренного человека. Скрытый текст : Судьба духовного мира сокрыта от нас, но одно событие, известное нам из Священного Писания, немного приоткрывает тайну этого мира.
                                    слайд 23. Гюстав Доре. «Потерянные небеса ». Все ангелы были созданы Богом, чтобы быть хорошими. Они жили в непосредственном общении с Богом и пребывали в блаженном состоянии.
                                    слайд 24. Гюстав Доре. «Потерянные небеса ». И тогда один из высших ангелов, по имени Денница, гордый своими совершенствами, оставил послушание Богу…
                                    ↓ … стал злым дьяволом (клеветником), сатаной (противником) и увлек многих подвластных ему ангелов.
                                    слайд 25. Гюстав Доре. «Потерянные небеса ».Архангел Михаил — предводитель Ангелов, сохранивших верность Богу…
                                    ↓ …ввергший всех злых ангелов в ад, т.е. в место, где отсутствует спасительная благодать Божия.
                                    слайд 26. Гюстав Доре. «Потерянные небеса ». Так беспредельная гордыня, не допускающая и тени смирения и не дающая места для покаяния, навсегда закрыла Царство Небесное для падших ангелов…
                                    ↓ … и низвергла их в адскую бездну, где они содержатся в вечных узах духовной тьмы в день Страшного Суда.
                                    слайд 27. Фотография Земли из космоса . Материальный мир . Материальный мир был создан Богом за шесть творческих дней или творческих периодов. Скрытый текст : Еврейское слово день (йом) — означает не только наш земной день, но вообще неопределенный период времени.
                                    слайд 28. Чюрленис М.К. сотворение мира . Первый творческий акт Бога — первичная материя. ↓ Из изначальной материи – ↓ все формы бытия.
                                    слайд 29.Чюрленис М.К. сотворение мира . Исходное состояние Моисей называет новосотворенную материю:
                                    земля ( Скрытый текст : потому что земной шар тогда образовался именно из этой первичной материи)
                                    бездна ( Скрытый текст : указывающая этим на ее бесконечность и необъятность для человеческого глаза)
                                    вода ( Скрытый текст : подразумевая под этим неустойчивость, подвижность, разреженность примитивной материи, по сравнению с нынешним состоянием материи)
                                    невидимый ( Скрытый текст : в смысле отсутствия тех специфических черт и качеств, с которыми материя проявилась позже, в конце творческой деятельности, и с которыми она наблюдается сейчас)
                                    неустроенный ( Скрытый текст : В смысле отсутствие тех законов, которые так мудро и стройно определяли ее дальнейшую жизнь («земля была безвидна и пуста» (Быт. 1.2))
                                    слайд 30. Чюрлёнис М.К. сотворение мира . Над бездной праматерии была тьма . Скрытый текст : Это выражение житейского писателя можно интерпретировать в том смысле, что это первичное состояние праматерии недоступно человеческому познанию. Эта субстанция предстает перед человеческим сознанием как «бездна», не исследованная и «в глубину», и «вширь».
                                    . « И Дух Божий носился над водою » (Быт.1,2). Скрытый текст : Этими словами писатель выражает мысль о том, что Третья Ипостась Святой Троицы — Дух Божий — подготовила эту изначальную субстанцию ​​к дальнейшим творческим Божественным действиям.
                                    слайд 31. Айвазовский И.К. сотворение мира . Скрытый текст : И из этой готовой, изначальной, но еще неорганизованной субстанции происходит дальнейшее творение, происходившее в течение шести дней, или периодов, когда всемогущая рука Божия, по словам священнописца книга Премудрости Соломона, творит мир «из бесформенной субстанции» (Премудрость 11, восемнадцать).

                                    Gesellschaft zur Erforschung EurAsiens / www.exploration-eurasia.com

                                    Eurasien Die Gesellschaft zur Erforschung EurAsiens frdert archologische Projekte im Kulturraum Eurasiens. Евразия Общество изучения Евразии продвигает археологические проекты в культурной сфере Евразии. Zentralasien Zentralasien билде Ein Kultureller Schmelztiegel Eurasiens. Центральная Азия Центральная Азия была культурным плавильным котлом внутри Евразии. Sogdien Sowohl Новопокровка также является Ургутским gehrten zum antiken Kulturraum Sogdiens.Согдия, Согдиана, Новопокровка и Ургут принадлежали к культурному царству древней Согдианы. Buddhismus Bis zur islamischen Eroberung im 8. Jh. война дер Буддизм в Согдиен Weit verbreitet. Буддизм Буддизм процветал в Согдиане до мусульманского завоевания в 8 веке. Nestorianer Es wird vermutet, da bei Urgut einnestorianisches Kloster bestand. Несторианство Предполагается, что в Ургуте был несторианский монастырь. Новопокровка Bei Новопокровка II в Кыргызстане wird nach einem mutmalichen buddhistischen Kloster geforscht. Новопокровка Археологические раскопки Новопокровки II в Кыргызстане ведут поиск руин предполагаемого буддийского монастыря. UrgutBei Urgut, Узбекистан, werden die 1997-1999 durchgefhrten Ausgrabungen eines mutmalichen christlichen Klosters wieder aufgenommen. Ургут Возобновлены археологические раскопки возможного христианского монастыря, проводившиеся в 1997-1999 годах в Ургуте в Узбекистане. Mongolei Auch die Mongolei gehrt zum Kulturraum Eurasiens. МонголияТакже Монголия принадлежит к культурной сфере Евразии.Archologie Die Archologie bildet den Schwerpunkt der Gesellschaft zur Erforschung Eurasiens. Археология, археологияАрхеология находится в центре внимания Общества изучения Евразии Seidenstrasse Die Seidenstrasse war eine der vielen Handelswege innerhalb Eurasiens. Шелковый путь Шелковый путь был одним из многих торговых путей через Евразию. Kirche des Ostens In Urgut werden architektonische Zeugnisse der Kirche des Ostens vermutet. Церковь Востока Архитектурные реликвии Церкви Востока можно найти в Ургуте. Die Gesellschaft zur Erforschung EurAsiens frdert archologische Projekte im Kulturraum Eurasiens. Общество изучения Евразии продвигает археологические проекты в культурной сфере Евразии. Узбекистан Киргизия, Кыргызстан, Киргизия Скайтен Сака, Сакен Степь Туркменистан Хиршштейн Балбал Баба-Штайне Петроглиф млрд Сибирия Ак-Бешим Вазкард Ибн Хаукал Шаманизм Херрин дер Тиере Герр дер Тьере Эми Хеллер Кристоф Баумер Майкл Хенсс Матиас Хотц Василиос Кляйн Пер Квэрне Маркус Мод Ниу Руджи Кеннет Пэрри Нита Премчанд Филипп Ротт Алексей Савченко Юрген Тубах Ван Тао Тереза ​​Вебер Идрис Абдурессул Дандан Ойлик Эндере Кимо Такламакан Ост-Тибет Валерий Кольченко Асан Торгоев Внутренний Монголей Амреддин Бердымурадов Самареддин Мустафакулов Бам Гктепе Бакира Алчи Карша Пунцолинг Ладакх Тибет мистер Цагаан Салаа Даян Батыр Китай Курган Зороастризм Узбекистан Киргизия, Киргизия, Киргизия, Киргизия скифы Сака Степь Туркменистан Оленьи камни Балбал Баба-камни Петроглифы млрд Сибирь Ак-Бешим Вазкард Ибн Хаукал Шаманизм Хозяйка животных Мастер животных Эми Хеллер Кристоф Баумер Майкл Хенсс Матиас Хотц Василиос Кляйн Пер Квэрне Маркус Мод Ниу Руджи Кеннет Пэрри Нита Премчанд Филипп Ротт Алексей Савченко Юрген Тубах Ван Тао Тереза ​​Вебер Идрис Абдурессул Дандан Ойлик Эндере Кимо Такламакан Восточный Тибет Валерий Кольченко Асан Торгоев Внутренняя Монголия Амреддин Бердымурадов Самареддин Мустафакулов Бам Гктепе Бакира Алчи Карша Пунцолинг Ладакх Тибет мистер Цагаан Салаа Даян Батыр Китай Курган зороастризм ГРНДУНГ ЕВРАЗИЯ Евразия Центральная Азия Согдиен Буддизм
                                    Новопокровка
                                    Несториан
                                    Ургут

                                    Монголей
                                    Архология
                                    Зайденштрассе
                                    Кирхе-де-Остенс
                                    Евразия
                                    Центральная Азия
                                    Буддизм
                                    Несторианская церковь Востока
                                    Аркология Шелкового пути

                                    .